枯草芽孢杆菌、粪肠球菌、屎肠球菌上清对肠上皮细胞SERT表达调控研究

发布时间：2021-02-06 06:07

　　目的:肠易激综合征（Irritable Bowel Syndrome,IBS）是临床常见的引起患者腹痛、腹胀、腹部不适等症状的功能性消化道疾病,在全球发病率较高,并严重影响患者的生活质量和过分占用医疗卫生资源。然而,目前对于IBS的发病机制了解仍然不足,有效的治疗措施亟待研究发现。近年来研究表明,IBS的发生与肠道运动功能密切相关,而5-羟色胺（5-hydroxytryptamine,5-HT）和5-羟色胺转运体（serotonin transporter,SERT）则是影响肠道运动的关键物质。有研究表明,SERT的水平受肠道菌群的影响。大量的基础和临床实验都证实了益生菌对于IBS的治疗有着很好地疗效。然而,益生菌治疗IBS的机制尚不明确。历史研究表明,鼠李糖乳杆菌上清液作用于肠上皮细胞和感染后IBS小鼠的结肠组织可以引起SERT水平上调。枯草芽孢杆菌、粪肠球菌、屎肠球菌是常用的三种益生菌类型,然而,对于此三种益生菌是否也可以对SERT表达进行调控尚无证据。本研究旨在观察枯草芽孢杆菌、粪肠球菌、屎肠球菌上清对肠上皮细胞SERT蛋白的表达有无影响,进而影响5-HT的水平,从而为益生菌缓解... 

【文章来源】：天津医科大学天津市 211工程院校

【文章页数】：53 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

PT-PCRSERT扩增曲线

下游为 CAT GGT GGT GAA GAC GCC AG；SERT 上游为 AAT GGGTAC TCA GCA GTT CC，下游为 CCA CAG CAT AGC CAA TCA C；（3）反应体系Components VolumeAceQ Universal SYBR qPCR Master Mix 10μl上游引物 0.4μl下游引物 0.4μlddH2O 4.2μlcDNA（适度稀释） 5μl总体系 20μl（4）反应条件（见图 1 和图 2）95℃ 5min95℃ 10s60℃ 30s40 个循环

图 3. 枯草芽孢杆菌刺激 Caco-2 细胞 SERT 表达水平（a. 12 小时 SERT mRNA 表达水平 b. 12 小时 SER蛋白表达水平 c. 24 小时 SERT mRNA 表达水平 d. 24 小时 SERT 蛋白表达水平）2.2 粪肠球菌上清液上调 Caco-2 细胞 SERT 蛋白表达水平粪肠球菌（CGMCC 1.2135）上清液刺激 Caco-2 细胞 12 小时，各浓度刺激组 SERT mRNA 表达均有明显上调，分别是对照组表达的 2.0 倍、1.9 倍、1.9 倍但上调无差异（见图 4a）；此时，刺激组 SERT 蛋白表达水平较对照组均无上调表现（见图 4b）。粪肠球菌（CGMCC 1.2135）上清液刺激 Caco-2 细胞 24 小时，SERT mRN表达只在 1:50 刺激浓度组出现有统计学意义的上调，约为对照组的 1.3 倍（见图 4c）；此时的 SERT 蛋白在 1:50 和 1：20 稀释的粪肠球菌上清液条件下表现出明显上调，以 1：20 刺激浓度最为显著，呈浓度-依赖性（见图 4d）。因此，粪肠球菌上清液可以上调Caco-2细胞的SERT蛋白表达。SERT mRN在 12 小时呈明显上调，随浓度增长未表现出浓度-依赖性，至 24 小时表达已逐渐回落，只有 1:50 稀释浓度组仍有轻度上调。而 SERT 蛋白的表达晚于 mRNA

【参考文献】：
期刊论文
[1]Effect of Lactobacillus rhamnosus GG supernatant on serotonin transporter expression in rats with post-infectious irritable bowel syndrome[J]. Ya-nan Cao,Li-juan Feng,Yuan-Yuan Liu,Kui jiang,Mao-jun Zhang,Yi-xin Gu,Bang-Mao Wang,jia Gao,Ze-Lan Wang,Yu-Ming Wang.  World Journal of Gastroenterology. 2018(03)
[2]Irritable bowel syndrome: Pathogenesis, diagnosis, treatment, and evidence-based medicine[J]. Lekha Saha.  World Journal of Gastroenterology. 2014(22)
[3]Small intestinal bacterial overgrowth syndrome[J]. Jan Bures,Jiri Cyrany,Darina Kohoutova,Miroslav Frstl,Stanislav Rejchrt,Jaroslav Kvetina,Viktor Vorisek,Marcela Kopacova.  World Journal of Gastroenterology. 2010(24)
[4]Lower Bifidobacteria counts in both duodenal mucosa-associated and fecal microbiota in irritable bowel syndrome patients[J]. Angèle PM Kerckhoffs,Melvin Samsom,Michel E van der Rest,Joris de Vogel,Jan Knol,Kaouther Ben-Amor,Louis MA Akkermans.  World Journal of Gastroenterology. 2009(23)
[5]小肠细菌过度生长的诊断方法评价[J]. 陈实,练海燕.  国际消化病杂志. 2009(02)
[6]Probiotic effects on intestinal fermentation patterns in patients with irritable bowel syndrome[J]. Jacqueline S Barrett,Kim EK Canale,Richard B Gearry,Peter M Irving,Peter R Gibson.  World Journal of Gastroenterology. 2008(32)



本文编号：3020281