乙型肝炎病毒表面抗原与烯酰辅酶A水合酶相互作用及对细胞凋亡的影响
发布时间：2021-02-09 09:21
目的：进一步验证乙肝病毒表面抗原（hepatitis B surface antigen，HBsAg）与烯酰辅酶A水合酶（Enoyl CoAHydratase，ECHS1）之间的相互作用，研究这种相互作用对宿主细胞的影响，探讨HBsAg的长期持续表达在HBV致病机制中的作用。方法：采用GST pull-down、免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation，Co-IP）、激光共聚焦显微镜等多种方法进一步验证HBsAg与ECHS1之间的相互作用。应用Western blot技术检测瞬时及稳定表达表面抗原主蛋白（Small hepatitis B surfaceantigen, SHBs）的肝癌细胞系Huh7细胞和HepG2细胞中，ECHS1蛋白表达水平。流式细胞分析技术观察稳定表达SHBs的HepG2-SHBs细胞及对照细胞HepG2-neo对Camptothecin诱导的细胞凋亡的敏感性差异。为研究SHBs导致的ECHS1表达下降是否在SHBs促凋亡中起作用，在HepG2-SHBs细胞中，利用siRNA技术下调ECHS1表达，或者转染pcDNA3.1-ECHS1过表达ECH...
【文章来源】：福建医科大学福建省
【文章页数】：92 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图12010年我国不同地区的HBsAg携带率
LHBs)[10-11]。C 区基因包括前 C 基因和 C 基因，分别编atitis B core antigen, HBcAg)[12]即内衣壳蛋白和 e 抗原(hepatitis eAg)[13]。P 区基因最长，约占病毒基因组的 75%以上，编码病毒录功能的 DNA 聚合酶蛋白(polymerase)[14]。X 区编码 X 蛋白[15]otein, HBx)(见图 2)。
蛋白、HBcAg、HBeAg 抗原、X 蛋白以及聚合酶蛋白用于包装新的病毒基因组。HBcAg 组装成内衣壳，内衣壳将病毒前基因组 mRNA 与病毒聚合酶蛋白包裹在一起组装成核衣壳，病毒在核衣壳内部进行反转录，在 HBV DNA 多聚酶的反转录活性作用下，以前基因组 mRNA 为模板，合成负链 DNA，再以负链 DNA 为模板，合成正链 DNA，形成子代的部分双链环状 DNA，含有子代的部分双链环状 DNA 的核衣壳再包上病毒的包膜蛋白，装配成完整的病毒颗粒[19-21]，以出芽的方式从肝细胞浆释放至肝细胞外，再开始一轮新的感染(见图 3)。
【参考文献】：
期刊论文
[1]HBx activates FasL and mediates HepG2 cell apoptosis through MLK3-MKK7-JNKs signal module[J]. Ren-Xian Tang,Fan-Yun Kong,Bao-Feng Fan,Xiao-Mei Liu,Hong-Juan You,Peng Zhang,Kui-Yang Zheng ,Department of Pathogenic Biology and Lab of Infection and Immunology,Xuzhou Medical College,Xuzhou 221002,Jiangsu Province,China. World Journal of Gastroenterology. 2012(13)
[2]乙型肝炎病毒表面抗原大蛋白致HepG2细胞凋亡的蛋白质组学分析[J]. 郑大利,黄清玲,吴云丽,林建银,林旭. 中华微生物学和免疫学杂志. 2010 (12)
[3]剖析乙肝病毒的包膜——乙肝表面抗原的生物学功能及其致病机制[J]. 田晓晨,闻玉梅. 自然杂志. 2010(06)
[4]线虫烯脂酰CoA水合酶的克隆、表达、纯化及初步晶体学分析[J]. 李志杰,张凯,翟宇佳,周强军,耿运琪,孙飞. 生物物理学报. 2010(01)
[5]烯酯酰辅酶A水解酶1生物学特性及其与肿瘤的关系[J]. 张军,唐建武. 国际肿瘤学杂志. 2010 (01)
[6]烯酰辅酶A水合酶单克隆抗体的制备与鉴定[J]. 鞠艳芳,刘蓉,柳晓兰,杨金菊,高建恩,孙启鸿. 南方医科大学学报. 2009(04)
[7]免疫共沉淀技术的研究进展[J]. 郭纯. 中医药导报. 2007(12)
[8]乙型肝炎表面抗原阳性转基因小鼠肝组织基因表达谱及蛋白组学的初步研究[J]. 任军,赵超,方彩云,马张妹,杨芃原,闻玉梅. 微生物与感染. 2006(01)
[9]噬菌体展示技术筛选干扰素α启动子DNA结合蛋白[J]. 曲建慧,成军,张玲霞,钟彦伟,刘妍,王琳,戴久增. 中华肝脏病杂志. 2005(07)
[10]Expression and purification of the complete PreS region of hepatitis B Virus[J]. Qiang Deng, Yu-Ying Kong, You-Hua Xie, Yuan Wang, State Key Laboratory of Molecular Biology, Institute of Biochemistry and Cell Biology, Shanghai Institutes of Life Science, Chinese Academy of Sciences, Shanghai 200031, China Qiang Deng, You-Hua Xie, Yuan Wang, Sino-France Center for Life Science and Genome Research, Shanghai 200031, China. World Journal of Gastroenterology. 2005(20)
本文编号：3025419
【文章来源】：福建医科大学福建省
【文章页数】：92 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图12010年我国不同地区的HBsAg携带率
LHBs)[10-11]。C 区基因包括前 C 基因和 C 基因，分别编atitis B core antigen, HBcAg)[12]即内衣壳蛋白和 e 抗原(hepatitis eAg)[13]。P 区基因最长，约占病毒基因组的 75%以上，编码病毒录功能的 DNA 聚合酶蛋白(polymerase)[14]。X 区编码 X 蛋白[15]otein, HBx)(见图 2)。
蛋白、HBcAg、HBeAg 抗原、X 蛋白以及聚合酶蛋白用于包装新的病毒基因组。HBcAg 组装成内衣壳，内衣壳将病毒前基因组 mRNA 与病毒聚合酶蛋白包裹在一起组装成核衣壳，病毒在核衣壳内部进行反转录，在 HBV DNA 多聚酶的反转录活性作用下，以前基因组 mRNA 为模板，合成负链 DNA，再以负链 DNA 为模板，合成正链 DNA，形成子代的部分双链环状 DNA，含有子代的部分双链环状 DNA 的核衣壳再包上病毒的包膜蛋白，装配成完整的病毒颗粒[19-21]，以出芽的方式从肝细胞浆释放至肝细胞外，再开始一轮新的感染(见图 3)。
【参考文献】：
期刊论文
[1]HBx activates FasL and mediates HepG2 cell apoptosis through MLK3-MKK7-JNKs signal module[J]. Ren-Xian Tang,Fan-Yun Kong,Bao-Feng Fan,Xiao-Mei Liu,Hong-Juan You,Peng Zhang,Kui-Yang Zheng ,Department of Pathogenic Biology and Lab of Infection and Immunology,Xuzhou Medical College,Xuzhou 221002,Jiangsu Province,China. World Journal of Gastroenterology. 2012(13)
[2]乙型肝炎病毒表面抗原大蛋白致HepG2细胞凋亡的蛋白质组学分析[J]. 郑大利,黄清玲,吴云丽,林建银,林旭. 中华微生物学和免疫学杂志. 2010 (12)
[3]剖析乙肝病毒的包膜——乙肝表面抗原的生物学功能及其致病机制[J]. 田晓晨,闻玉梅. 自然杂志. 2010(06)
[4]线虫烯脂酰CoA水合酶的克隆、表达、纯化及初步晶体学分析[J]. 李志杰,张凯,翟宇佳,周强军,耿运琪,孙飞. 生物物理学报. 2010(01)
[5]烯酯酰辅酶A水解酶1生物学特性及其与肿瘤的关系[J]. 张军,唐建武. 国际肿瘤学杂志. 2010 (01)
[6]烯酰辅酶A水合酶单克隆抗体的制备与鉴定[J]. 鞠艳芳,刘蓉,柳晓兰,杨金菊,高建恩,孙启鸿. 南方医科大学学报. 2009(04)
[7]免疫共沉淀技术的研究进展[J]. 郭纯. 中医药导报. 2007(12)
[8]乙型肝炎表面抗原阳性转基因小鼠肝组织基因表达谱及蛋白组学的初步研究[J]. 任军,赵超,方彩云,马张妹,杨芃原,闻玉梅. 微生物与感染. 2006(01)
[9]噬菌体展示技术筛选干扰素α启动子DNA结合蛋白[J]. 曲建慧,成军,张玲霞,钟彦伟,刘妍,王琳,戴久增. 中华肝脏病杂志. 2005(07)
[10]Expression and purification of the complete PreS region of hepatitis B Virus[J]. Qiang Deng, Yu-Ying Kong, You-Hua Xie, Yuan Wang, State Key Laboratory of Molecular Biology, Institute of Biochemistry and Cell Biology, Shanghai Institutes of Life Science, Chinese Academy of Sciences, Shanghai 200031, China Qiang Deng, You-Hua Xie, Yuan Wang, Sino-France Center for Life Science and Genome Research, Shanghai 200031, China. World Journal of Gastroenterology. 2005(20)
本文编号：3025419
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