急性肝损伤血清诱导骨髓间充质干细胞分化为类肝细胞的实验研究
发布时间:2021-02-14 07:32
目的:探讨急性肝损伤血清诱导骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchyme stem cells,BMSCs)体外分化为类肝细胞的能力,为利用BMSCs治疗终末期肝脏疾病患者提供实验依据。方法:利用全骨髓培养法分离提取大鼠BMSCs,在倒置显微镜下观察所提取的原代细胞的形态学变化,免疫荧光染色法检测BMSCs表面特异性标志物CD29及造血干细胞(Hematopoietic stem cells,HSCs)表面特异性标志物CD34的表达。建立急性肝损伤模型:模型组将四氯化碳(Carbon tetrachloride,CCL4)-大豆油溶液腹腔注射入大鼠后对其进行部分肝叶切除术;假手术组腹腔注射等剂量的生理盐水后开腹后即关腹,造模后用全自动生化分析仪检测大鼠血清谷丙转氨酶(glutamic pyruvic transaminase,ALT)、谷草转氨酶(Glutamic oxaloacetic transaminase,AST)及总胆红素值(total bilirubin,TBIL),取大鼠肝脏进行HE染色,倒置显微镜下观察两组大鼠肝脏病理学改变。将造模组、假手术组大鼠血清...
【文章来源】:南昌大学江西省 211工程院校
【文章页数】:52 页
【学位级别】:硕士
【文章目录】:
摘要
ABSTRACT
第1章 前言
第2章 材料与方法
2.1 实验动物
2.2 主要实验试剂
2.3 主要液体配制
2.4 主要实验仪器、设备
2.5 实验方法
2.5.1 BMSCs 的提取、分离、纯化及鉴定
2.5.2 急性肝损伤大鼠模型的建立及相关指标测定
2.5.3 不同血清作用于BMSCs 及相关指标测定
2.6 统计学处理
第3章 结果
3.1 大鼠骨髓间充质干细胞的提取、分离、纯化及鉴定
3.2 模型组及假手术组大鼠相关指标检测
3.2.1 两组大鼠术后24 小时生存率
3.2.2 手术操作方式
3.2.3 血清ALT、AST、TBIL 测定
3.2.4 大鼠肝脏变化
3.3 经各组细胞形态学观察及RT-PCR 检测结果
3.3.1 各组细胞形态学观察
3.3.2 各组细胞RT-PCR 检测
第4章 讨论
4.1 BMSCs 分离及培养
4.2 BMSCs 诱导为类肝细胞
第5章 结论与展望
致谢
参考文献
附图
攻读学位期间的研究成果
综述
【参考文献】:
期刊论文
[1]大鼠骨髓间充质干细胞体外诱导分化为肝细胞[J]. 王忠琼,李昌平,夏世萍,刘彦,钟晓琳. 基础医学与临床. 2009(04)
[2]大鼠骨髓间充质干细胞向肝细胞的分化[J]. 徐洪军,关晓辉,关兴卓. 中国组织工程研究与临床康复. 2008(43)
[3]肝癌术后肝再生状态与肝癌复发关系的初步研究[J]. 蔡云峰,甄作均,陈焕伟,苏树英. 中国普通外科杂志. 2008(07)
[4]磁标记猪骨髓间充质干细胞自体肝内移植后MR活体示踪研究[J]. 方亮,施晓雷,褚薛慧,方胜,丁义涛. 肝胆外科杂志. 2008(03)
[5]成人骨髓间充质干细胞的鉴定与体外BrdU标记[J]. 王小蕊,侯相麟,席亚明,张海红. 中国组织工程研究与临床康复. 2008(21)
[6]不同诱导条件对大鼠骨髓间充质干细胞体外诱导类肝细胞的影响[J]. 何文艳,刘树贤,姜慧卿. 世界华人消化杂志. 2008(05)
[7]肝衰竭大鼠血清诱导间充质干细胞向肝细胞分化的实验研究[J]. 孙庆国,赵文静,王日中,彭慧杰. 中国实验诊断学. 2007(11)
[8]自体骨髓干细胞移植治疗失代偿期肝硬化[J]. 王娟,邵丽春,郭庆,孔欣,朱丹,李晓惠. 中国组织工程研究与临床康复. 2007(46)
[9]异体骨髓间充质干细胞在骨髓嵌合小鼠体内分化为肝细胞的实验研究[J]. 王连友,徐辉,董世武,粟永萍,庞学利,刘登群,王军平,冉新泽,王锋超. 第三军医大学学报. 2007(11)
[10]免疫磁珠法分离纯化骨髓间充质干细胞及向神经细胞定向分化[J]. 徐鹏,舒畅,赵子义,张伟. 中国组织工程研究与临床康复. 2007(20)
本文编号:3033349
【文章来源】:南昌大学江西省 211工程院校
【文章页数】:52 页
【学位级别】:硕士
【文章目录】:
摘要
ABSTRACT
第1章 前言
第2章 材料与方法
2.1 实验动物
2.2 主要实验试剂
2.3 主要液体配制
2.4 主要实验仪器、设备
2.5 实验方法
2.5.1 BMSCs 的提取、分离、纯化及鉴定
2.5.2 急性肝损伤大鼠模型的建立及相关指标测定
2.5.3 不同血清作用于BMSCs 及相关指标测定
2.6 统计学处理
第3章 结果
3.1 大鼠骨髓间充质干细胞的提取、分离、纯化及鉴定
3.2 模型组及假手术组大鼠相关指标检测
3.2.1 两组大鼠术后24 小时生存率
3.2.2 手术操作方式
3.2.3 血清ALT、AST、TBIL 测定
3.2.4 大鼠肝脏变化
3.3 经各组细胞形态学观察及RT-PCR 检测结果
3.3.1 各组细胞形态学观察
3.3.2 各组细胞RT-PCR 检测
第4章 讨论
4.1 BMSCs 分离及培养
4.2 BMSCs 诱导为类肝细胞
第5章 结论与展望
致谢
参考文献
附图
攻读学位期间的研究成果
综述
【参考文献】:
期刊论文
[1]大鼠骨髓间充质干细胞体外诱导分化为肝细胞[J]. 王忠琼,李昌平,夏世萍,刘彦,钟晓琳. 基础医学与临床. 2009(04)
[2]大鼠骨髓间充质干细胞向肝细胞的分化[J]. 徐洪军,关晓辉,关兴卓. 中国组织工程研究与临床康复. 2008(43)
[3]肝癌术后肝再生状态与肝癌复发关系的初步研究[J]. 蔡云峰,甄作均,陈焕伟,苏树英. 中国普通外科杂志. 2008(07)
[4]磁标记猪骨髓间充质干细胞自体肝内移植后MR活体示踪研究[J]. 方亮,施晓雷,褚薛慧,方胜,丁义涛. 肝胆外科杂志. 2008(03)
[5]成人骨髓间充质干细胞的鉴定与体外BrdU标记[J]. 王小蕊,侯相麟,席亚明,张海红. 中国组织工程研究与临床康复. 2008(21)
[6]不同诱导条件对大鼠骨髓间充质干细胞体外诱导类肝细胞的影响[J]. 何文艳,刘树贤,姜慧卿. 世界华人消化杂志. 2008(05)
[7]肝衰竭大鼠血清诱导间充质干细胞向肝细胞分化的实验研究[J]. 孙庆国,赵文静,王日中,彭慧杰. 中国实验诊断学. 2007(11)
[8]自体骨髓干细胞移植治疗失代偿期肝硬化[J]. 王娟,邵丽春,郭庆,孔欣,朱丹,李晓惠. 中国组织工程研究与临床康复. 2007(46)
[9]异体骨髓间充质干细胞在骨髓嵌合小鼠体内分化为肝细胞的实验研究[J]. 王连友,徐辉,董世武,粟永萍,庞学利,刘登群,王军平,冉新泽,王锋超. 第三军医大学学报. 2007(11)
[10]免疫磁珠法分离纯化骨髓间充质干细胞及向神经细胞定向分化[J]. 徐鹏,舒畅,赵子义,张伟. 中国组织工程研究与临床康复. 2007(20)
本文编号:3033349
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