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幽门螺杆菌cag致病岛CagL蛋白的功能预测及其在消化道组织中的表达

发布时间:2021-02-21 22:15
  幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)是人类胃病的重要病原体之一,是一种可长期定植于人类胃粘膜的革兰阴性螺旋形微需氧菌。目前,全球感染率已达到50%。已经证实,患有慢性胃炎、消化性溃疡、胃癌和胃粘膜相关淋巴样组织(MALT)淋巴瘤等的多种胃肠道疾病皆与H.pylori感染密切相关。I型H.pylori菌株因携带cag致病岛(cag pathogenicity island,cag PAI)而致其毒性较强。幽门螺杆菌的重要毒力因子-细胞毒素相关基因A蛋白(Cytotoxin-associated gene A,CagA)被合成并通过致病岛编码的IV型分泌系统合成并转运进入宿主细胞内,导致细胞功能紊乱。目前,已知致病岛由27个基因组成,编码27种蛋白,但大多数基因的功能和发病机制尚未完全明确。本文以cagL基因作为研究对象,利用生物信息学方法预测其功能,并通过微生物学、分子生物学和免疫学等技术验证其功能,为进一步研究cag致病岛的功能和致病机制奠定基础。方法:1.用在线服务器及软件计算CagL的各种理化参数,分析其重复序列、疏水性曲线、抗原性曲线、进化树;进... 

【文章来源】:江苏大学江苏省

【文章页数】:51 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
摘要
ABSTRACT
英文缩略词表
第一章 绪论
    1.1 研究背景
        1.1.1 幽门螺杆菌简述
        1.1.2 幽门螺杆菌致病机制的研究现状
        1.1.3 幽门螺杆菌cagPAI研究现状
        1.1.4 幽门螺杆菌cagPAI编码的T4SS研究现状
    1.2 本研究的目的、内容及技术路线
        1.2.1 研究目的
        1.2.2 研究内容
        1.2.3 技术路线
第二章 幽门螺杆菌幽门螺杆菌cagL基因的生物信息学分析
    2.1 材料和方法
        2.1.1 材料
        2.1.2 方法
    2.2 结果
        2.2.1 CagL的序列组成和基本性质
        2.2.2 同源性分析
        2.2.3 二级结构的预测
        2.2.4 三级结构预测
        2.2.5 功能位点分析
    2.3 讨论
第三章 幽门螺杆菌cagL基因缺失株的构建及对CagA转运的影响
    3.1 材料
        3.1.1 载体与菌株
        3.1.2 主要试剂和仪器
    3.2 方法
        3.2.1 细菌的培养
        3.2.2 自杀质粒同源臂片段的扩增
        3.2.3 重组自杀质粒的构建和鉴定
        3.2.4 cagL基因缺陷株的构建与鉴定
        3.2.5 CagA蛋白转运实验
    3.3 结果
        3.3.1 cagL基因缺陷重组自杀质粒的构建
        3.3.2 cagL基因缺陷株的鉴定
        3.3.3 CagA蛋白转运实验
    3.4 讨论
第四章 CagL蛋白的亚细胞定位及其在消化道组织中的表达
    4.1 方法
        4.1.1 菌株、质粒
        4.1.2 主要试剂
        4.1.3 主要溶液配制
        4.1.4 主要仪器
    4.2 方法
        4.2.1 H.pylori培养
        4.2.2 H.pylori分离组分及亚细胞定位
        4.2.3 免疫组化鉴定CagL蛋白胃组织中的表达
    4.3 结果
        4.3.1 CagL蛋白的亚细胞定位
        4.3.2 免疫组化鉴定CagL蛋白在胃粘膜组织中的表达
    4.4 讨论
第五章 主要结论及展望
    5.1 主要结论
    5.2 主要展望
参考文献


【参考文献】:
期刊论文
[1]幽门螺杆菌Ⅳ型分泌系统cagT基因的克隆表达及其重组蛋白对SGC-7901细胞增殖和分泌细胞因子功能的影响[J]. 崔蕾蕾,邵世和,李良菊,王华,母润红,鞠小丽,董苏荣,钟桥.  微生物学报. 2008(04)
[2]NF-κB and ERK-signaling pathways contribute to the gene expression induced by cag PAI-positive-Helicobacter pylori infection[J]. Wataru Shibata,Yoshihiro Hirata,Haruhiko Yoshida,Motoyuki Otsuka,Yujin Hoshida,Keiji Ogura,Shin Maeda,Tomoya Ohmae,Ayako Yanai,Yuzo Mitsuno,Naohiko Seki,Takao Kawabe,Masao Omata.  World Journal of Gastroenterology. 2005(39)



本文编号:3045001

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