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输血传播病毒(TTV)基因变异的临床意义

发布时间:2021-02-21 23:10
  目的 TTV是从一名输血后肝炎病人血清中分离出的一种新型DNA病毒。TTV感染在各种人群中普遍存在,可存在于无任何症状健康者,也可以是一些病因不明肝病及非甲一非庚型暴发性肝炎患者的病原体和在其他肝炎病毒感染基础上发生重叠感染。目前对TTV的致病性的研究存在争论,有些学者认为TTV不能致病,有些持相反意见。有学者认为TTV的致病性与其基因型或基因变异有关。因此研究TTV在各人群中的感染情况,尤其是TTV感染在HBV慢性感染的基础上重叠感染是否加重其病情,以初步探讨TTV的致病性及TTV是否影响HBV的复制,并探讨TTV的基因变异及其准种复杂性与其致病性的关系有重要意义。方法 (1)在ORF1区设计特异性引物建立巢式多聚酶链反应(PCR),检测献血员、非甲-非庚型肝炎患者及HBV感染患者血清中TTV DNA,对PCR产物进行测序,并比较TTV DNA阳性患者与阴性患者之间的肝功能指标(ALT、TBIL)的差异。(2)TTV DNA阳性患者采用不对称PCR获得单链DNA,然后对其进行SSCP分析,并结合TTV DNA熔点曲线分析基因变异。(3)在ORF1区的高变区(HVR)设计特异性引物建... 

【文章来源】:中南大学湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】:93 页

【学位级别】:博士

【部分图文】:

输血传播病毒(TTV)基因变异的临床意义


TTVDNA阳性者PCR产物电泳图

电泳图,乙型肝炎病毒携带者,献血员,电泳


(一)SSCP一PAGE电泳结果所有标本均得到较清晰的SSCP条带,条带数为1一8条,少数标本只有1~2条主带(图3一图6),由于采用不对称PCR技术进行扩增,所得的不同条带代表不同的基因变异株(准种),提示在同一份血清中存在TTV不同的基因变异株。从电泳结果看,献血员与乙型肝炎病毒携带者组的SSCP条带数较其它组少,在重型肝炎患者中SSCP条带数相对较多。234567891011图3献血员与乙型肝炎病毒携带者SSCP电泳1一4献血员;5一n乙型肝炎病毒携带者。图4慢性乙型肝炎患者SSCP电泳1一3慢性乙型肝炎患者中度4~11慢性乙型肝炎患者重度图5慢性重型乙型肝炎患者SSCP电泳图6非甲一庚型肝炎患者SSCP电泳1一2中度;3一6重度;7~11重型

曲线,曲线图


81皿T印p度的.欣C目匆5图9.单个TW克隆DNA的熔点曲线图(每条曲线代表不同的克隆).军价圣畴时翎划枷朋明。网翎卜P、︵n﹂优︶P·匆公到肠马臼铭创“岛邓龙洲冗花臼陀例岛咫叨犯例岛叨l切丁.理.成口e,Cd如5图10.多个TTV克隆DNA混合物的熔点曲线图

【参考文献】:
期刊论文
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本文编号:3045058

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