PKM2在LPS/D-Gal诱导的急性肝损伤中的致病作用及其机制研究

发布时间：2021-02-21 23:22

　　目的:丙酮酸激酶（pyruvate kinase,PK）是糖酵解中最后一步关键酶,其亚型丙酮酸激酶M2型（pyruvate kinase M2,PKM2）对肿瘤细胞的增殖有重要的调节作用。近期研究发现PKM2在炎症反应的病理生理过程中也产生了重要作用。本研究探讨PKM2在脂多糖（lipopolysaccharides,LPS）/右旋半乳糖胺（D-galactosamine,D-Gal）诱导的小鼠急性肝损伤模型中的潜在作用及可能机制。方法:雄性BALB/c小鼠腹腔注入LPS（10μg/kg）/D-Gal（700mg/kg）建立急性肝损伤模型。为了明确PKM2在LPS/D-Gal模型中的变化,我们在不同时间点处死小鼠（LPS/D-Gal注入后0h、2h、4h和6h）,采用免疫印迹分析测定肝组织中PKM2的表达,用比色法检测肝组织中丙酮酸激酶活性的变化及丙酮酸含量。为了探究PKM2在LPS/D-Gal诱导的小鼠急性肝损伤模型中的作用,我们用PKM2激动剂ML265（其作用是抑制PKM2核转位,故又称PKM2核转位抑制剂）做前处理（在LPS/D-Gal注射前30min腹腔注入）和后处理（在LP... 

【文章来源】：重庆医科大学重庆市

【文章页数】：59 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

PKM2核蛋白在LPS/D-Gal模型中表达增强（n=4）

图 1 PKM2 核蛋白在 LPS/D-Gal 模型中表达增强（n=4）Fig.1 The level of PKM2 nuclear protein increased in the LPS/D-Gal model.2 LPS/D-Gal 模型中丙酮酸激酶活性和丙酮酸含量均降低丙酮酸激酶活性结果如图 2A 所示，LPS/D-Gal 诱导急性肝损伤模型中，激酶活性降低。如图 2B 所示，丙酮酸的含量在 LPS/D-Gal 模型中减少。

白的磷酸化水平。在不同样本比较中，获取所有磷酸化位点蛋白的组间磷酸化水平调变比值。设置 Fold Change 阈值为 2，获得组间调变差异的磷酸化位点蛋白。使用 KEGG PATHWAY 对差异基因进行分析。2.11 统计学分析与第一部分相同3.实验结果3.1 PKM2 激活剂 ML265 下调 LPS/D-Gal 模型中 PKM2 表达Western 结果如图 3 显示：经 PKM2 激活剂 ML265 预处理后，细胞核内 PKM2的表达较 LPS/D-Gal 模型组降低，说明 PKM2 在胞核内聚集减少。

【参考文献】：
期刊论文
[1]肿瘤有氧糖酵解的研究进展[J]. 张凤娟,张红胜,刘洋.  生命的化学. 2015(03)
[2]Caspase Family Proteases and Apoptosis[J]. Ting-Jun FAN Li-Hui HAN Ri-Shan CONG Jin LIANG College of Marine Life Sciences,Division of Life Science and Technology,Ocean University of China,Qingdao 266003,China;College of Chemistry & Chemical Engineering,Ocean University of China,Qingdao 266003,China.  Acta Biochimica et Biophysica Sinica. 2005(11)
[3]丙酮酸对大鼠小肠缺血再灌注损伤的保护作用[J]. 郝志强,王为忠,李孟彬,管文贤,罗兰.  中国临床康复. 2004(02)



本文编号：3045072