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自体树突状细胞疫苗治疗乙型肝炎病毒感染者的免疫机制研究

发布时间:2021-03-07 10:26
  第一章HBcAg/HBeAg对人树突状细胞表型和功能的影响目的在已研究的HBsAg对体外培养的人自体树突状细胞治疗性疫苗表型和功能的影响基础上,研究HBcAg/HBeAg对体外培养的人自体树突状细胞治疗性疫苗表型和功能的影响。方法1、取20例健康志愿者外周静脉血,肝素抗凝,以密度梯度离心法分离淋巴细胞。以GM-CSF,IL-4刺激,常规培养获得DC。再分别加入TNF-α、HBcAg+TNF-α、HBeAg+TNF-α刺激后,依次分组为:mDC组、HBcAg+mDC组、HBeAg+mDC组。2、在培养第10天检测各组树突状细胞的表型以及分泌的细胞因子IFN-γ和IL-12p70的变化。3、mDC组、HBcAg+mDC组、HBeAg+mDC组树突状细胞诱导的自体悬浮淋巴细胞增殖效应:在培养第7天与自体悬浮淋巴细胞共培养5天,在培养结束前12h加入1μCi/孔3H甲基胸腺嘧啶,用液体闪烁计数仪检测树突状细胞诱导的自体悬浮淋巴细胞增殖效应(cpm值)。4、mDC组、HBcAg+mDC组、HBeAg+mDC组树突状细胞体外诱导的淋巴细胞毒活性:以HepG2为靶细胞,在第13天以乳酸脱氢酶法,按C... 

【文章来源】:重庆医科大学重庆市

【文章页数】:68 页

【学位级别】:博士

【部分图文】:

自体树突状细胞疫苗治疗乙型肝炎病毒感染者的免疫机制研究


HBcAg和HBeAg影响mDC的CD83、CD86和HLA-ABC表达的影响FCM图

形态图,慢性乙型肝炎,光镜,形态


图 1:慢性乙型肝炎组Ⅰ-Ⅳ;健康对照组 1-4;依次为:mDC、imDC、imDC+TNF-α、DC光镜下的形态(诱导 7d,×200 倍)Fig.1 Cellular Morphology of matural Dendritic Cells of CHB group and control group:mDC、imDC、、imDC+TNF-α、DC(Induced 7 Days,200 Magnmcation)2.2 树突状细胞的表型测定流式细胞仪检测健康对照组和慢性乙型肝炎组不同状态DC的HLA-A, B, C、HLA-DR、CD86表达发现:两组组内mDC的HLA-A, B, C、HLA-DR、CD86的水平明显高于imDC、imDC+TNF-α、DC(P<0.01);imDC加入TNF-α后HLA-A, B, C、HLA-DR、CD86表达增加不明显;imDC、imDC+TNF-α组HLA-A, B, C、HLA-DR、CD86表达均低于DC组,结果具有显著性差异(P<0.01)。表3 慢性乙型肝炎组不同状态DC的HLA-A, B, C、HLA-DR、CD86表达(%)

【参考文献】:
期刊论文
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本文编号:3068912

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