WISP-1：研究乙肝诱发肝癌的新途径

发布时间：2021-03-11 15:28

　　目的通过免疫组化和Western blot等方法,观察由乙肝病毒X蛋白（HBX）引起的HepG2细胞内Wnt诱导的分泌型蛋白1（以下简称为WISP-1）的变化,探索乙肝病毒导致肝癌的新的机制。方法（1）分别收集肝癌,癌旁,及正常肝组织标本。采用免疫组化的方法检测WISP-1在这些组织内的表达及差异。（2）采用脂质体Lipofectamine2000为媒介,分别将pc-DNA3.1（+）和pc-DNA3.1（+）-HBX两种质粒转染HepG2细胞,经过G418长期筛选,得到稳定转染的细胞株G0和Gx。（3）采用PCR技术检测G0和Gx中WISP-1mRNA的表达水平及差异。（4）采用Western blot从蛋白水平检测G0和Gx中WISP-1的表达水平及差异。结果（1）免疫组化结果显示,肝癌组织中WISP-1的阳性表达率高于癌旁组织及正常肝组织,结果经X2检验差异有统计学意义。提示WISP-1在肝癌组织中高表达。（2）经过G418稳定筛选一月后,成功建立能够稳定分泌HBX蛋白的Gx细胞系及相应的空转细胞系G0。（3）Western blot鉴定Gx和G0转染成功。且Gx细胞能够表达HB... 

【文章来源】：华中科技大学湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：50 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

不同组织中WISP-1蛋白的表达（SP,×400）

Westernblot鉴定Gx与G0细胞内HBX的表达b-actin

PCR反应检测Gx和G0细胞中WISP-1mRNA的表达M:DNAMarker;G:GAPDH;W:WISP-1;

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3076678