川西獐牙菜及龙胆苦苷对胆汁淤积大鼠肝脏MRP2、BSEP表达的影响

发布时间：2017-04-15 19:00

  本文关键词：川西獐牙菜及龙胆苦苷对胆汁淤积大鼠肝脏MRP2、BSEP表达的影响，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：研究背景和目的： 胆汁淤积是由胆汁生成和流动障碍所致肝脏疾病共同的临床综合征，也是直接导致肝细胞损伤、肝功能衰竭的主要因素。胆汁淤积的治疗目前除梗阻引起的可以进行外科手术外，绝大多数胆汁淤积的临床治疗都缺乏行之有效的药物。导致胆汁淤积的分子机制和保护机制十分复杂，现在主要认为与肝细胞膜胆汁酸转运蛋白功能的改变密切相关，肝细胞膜胆汁酸转运蛋白异常表达导致胆汁酸排泌障碍，肝细胞内有毒物质(如胆汁酸盐)的积聚，造成肝脏损伤。胆盐输出泵(BSEP)和多耐药相关蛋白2（MRP2）是肝细胞毛细胆管膜面最重要的两种转运蛋白。BSEP的作用是通过消耗ATP将肝细胞内各种结合型胆盐转运到毛细胆管中，刺激胆盐依赖性胆汁流的形成，是影响胆汁流最重要的因素；MRP2也消耗ATP跨膜主动转运有机阴离子，包括结合型胆红素、谷胱甘肽、电解质、色素、毒素和植物甾醇等，使胆汁流成为排泄内源性和外源性毒素的重要途径。川西獐牙菜（Swertia mussotii Franch）自古被认为具有利胆护肝、清热解毒、祛湿消炎的作用，民间多用做治疗肝胆疾病。龙胆苦苷（Gentiopicroside）是其中主要的活性单体成分之一。本研究观察川西獐牙菜及其单体成分龙胆苦苷对内毒素所致大鼠胆汁淤积性肝损伤的保护作用，以及检测肝细胞胆管膜面转运蛋白BSEP和MRP2表达变化，进一步评价川西獐牙菜及其单体成分龙胆苦苷对肝脏胆汁淤积的影响。 方法： 1、Sprague Dawley大鼠，清洁级，雄性，体重200～230g，采用随分组的方式分为6组，每组5只：生理盐水组、川西獐牙菜组、龙胆苦苷组、LPS+生理盐水组、LPS+川西獐牙菜组，LPS+龙胆苦苷组，所有大鼠均于处理后16h取材。 2、测定各组实验大鼠胆汁流速，收取血清检测血清生化指标ALT，AST、TBIL，，HE染色观察肝脏组织病理； 3、采用Western blot及qRT-PCR检测各组大鼠肝组织中BSEP和MRP2在转录以及蛋白水平的表达。 结果： 1、LPS+生理盐水组与生理盐水组相比肝损伤指标ALT、AST、TBIL明显升高（P0.05），胆汁流速明显下降（P0.05）,病理损伤明显；而与LPS+生理盐水组相比,LPS+川西獐牙菜组和龙胆苦苷组ALT、AST、TBIL明显下降（P0.05），胆汁流速明显升高（P0.05），对大鼠肝损伤病理有显著改善作用。 2、与生理盐水组相比，川西獐牙菜组和龙胆苦苷组BSEP蛋白水平的表达明显增高（P 0.05），mRNA水平无明显变化；LPS+生理盐水组与生理盐水组相比相比BSEP蛋白水平的表达明显降低（P 0.05）；与LPS+生理盐水组相比，LPS+川西獐牙菜组和LPS+龙胆苦苷组BSEP蛋白水平的表达明显增高（P 0.05）；但各组之间BSEP mRNA变化均不明显。 3与生理盐水组相比，川西獐牙菜组和龙胆苦苷组MRP2蛋白水平的表达明显增高（P 0.05），mRNA水平无明显变化；LPS+生理盐水组与生理盐水组相比相比MRP2mRNA和蛋白水平的表达明显降低（P 0.05）；与LPS+生理盐水组相比，LPS+川西獐牙菜组和LPS+龙胆苦苷组BSEP mRNA和蛋白水平的表达明显增高（P 0.05）。 结论： 川西獐牙菜以及单体成分龙胆苦苷均能减轻内毒素所致大鼠胆汁淤积性肝损伤，可能的作用机制是上调肝细胞膜胆管膜面胆汁酸转运蛋白BSEP和MRP2的表达。
【关键词】：川西獐牙菜 龙胆苦苷 内毒素 胆汁淤积 BSEP MRP2 大鼠
【学位授予单位】：第三军医大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R575
【目录】：

• 缩略语表4-6
• Abstract6-9
• 摘要9-11
• 第一章 前言11-14
• 第二章 川西獐牙菜及其单体成分龙胆苦苷对内毒素所致大鼠胆汁淤积性肝损伤的保护作用14-22
• 2.1 材料与方法14-18
• 2.2 结果18-20
• 2.3 讨论20-22
• 第三章 川西獐牙菜及其单体成分龙胆苦苷对内毒素所致胆汁淤积大鼠肝细胞膜转运蛋白 MRP2、BSEP 调控机制研究22-37
• 3.1 材料与方法22-29
• 3.2 结果29-34
• 3.3 讨论34-37
• 全文结论37-38
• 参考文献38-42
• 文献综述 肝脏胆汁淤积疾病和 ABC 转运蛋白42-56
• 参考文献52-56
• 在读期间发表的论文56-57
• 致谢57

【参考文献】

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1 张建胜;王雪梅;董秀华;杨海英;李干鹏;;川西獐牙菜化学成分研究[J];中药材;2009年04期

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本文编号：309019