PYC通过PI3K/PPARα调控HepG2细胞内Plin5表达及脂质蓄积的机制研究

发布时间：2021-03-27 18:05

　　目的:非酒精性脂肪肝病（Nonalcoholic Fatty Liver Disease,NAFLD）是指除外酒精和其他明确的肝损伤因素所致的以肝细胞内脂质过度蓄积为主要特征的临床病理综合征。其病理过程可从非酒精性脂肪肝进展到非酒精性脂肪肝炎甚至肝硬化、肝癌。脂肪储存小滴蛋白5（Perilipin5,Plin5）是PAT（Perilipin1、ADRP、Tip47）家族的新成员,主要表达于氧化代谢高的心脏、肝脏、骨骼肌及棕色脂肪组织中,其与细胞内脂质蓄积有着密切的联系。NAFLD患者肝脏及肥胖小鼠肝脏中Plin5表达显著增高,小鼠过表达Plin5可促进肝脏内甘油三酯蓄积,提示Plin5参与NAFLD的形成。然而,目前关于Plin5在参与脂质蓄积过程中的调控机制并不十分明确。碧萝芷（Pycnogenol,PYC）是法国沿海松树皮提取物,具有强大的抗炎、抗氧化作用。本课题组前期研究发现,在小鼠巨噬细胞中PYC可以抑制脂多糖（LPS）诱导的脂肪储存小滴蛋白2（Plin2）表达,在ApoE敲除鼠中PYC可以改善动脉粥样硬化、减轻肝脏脂质蓄积、促进白色脂肪棕色化。但是关于PYC对Plin5在NA... 

【文章来源】：中国医科大学辽宁省

【文章页数】：61 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

OA呈浓度及时间依赖性诱导HepG2细胞中Plin5表达注：a：不同OA浓度（solventcontrol、200M、400M）刺激HepG2细胞，Plin5mRNA

图 2 PPAR 介导了 HepG2 细胞中 OA 诱导的 Plin5 表达注：a：分别用 PPAR 抑制剂 GW6471、PPAR 抑制剂 GSK0660、PPAR 抑制剂 GW9662处理 HepG2 细胞，Plin5 mRNA 表达；b：PPAR 抑制剂 GW6471 处理 HepG2 细胞，Plin5 蛋白表达；c：PPAR 抑制剂 GW6471 处理 HepG2 细胞，Western blot 结果灰度值分析，以 GAPDH为内参，校正 Plin5 蛋白表达；*P<0.05 vs solvent control，#P<0.05 vs OA 组。d：不同 OA 浓度（solvent control、200 M、400 M）刺激 HepG2 细胞，PPAR mRNA 表达；e：不同 OA 浓度（solvent control、200 M、400 M）刺激 HepG2 细胞，PPAR 蛋白表达；f：不同 OA 浓度（solventcontrol、200 M、400 M）刺激 HepG2 细胞，Western blot 结果灰度值分析，以 GAPDH 为内参，校正 PPAR 蛋白表达；*P<0.05 vs solvent control，#P<0.05 vs OA 组。3.3 PI3K 介导了 HepG2 细胞中 OA 诱导的 Plin5 的表达为探究 HepG2 细胞中激酶与 Plin5 的调控关系，我们筛选了 p38MAPK 和 PI3K

中国医科大学硕士学位论文两个激酶。当用 p38MAPK 抑制剂 SB203580 处理细胞后，发现 OA+ SB203580 组与OA组相比，Plin5的蛋白表达无明显变化 (P>0.05)。而给予PI3K抑制剂LY294002处理细胞后发现 OA+LY294002 组 Plin5 的 mRNA 表达明显降低，与 OA 组相比存在统计学差异（P<0.05）。Western blot 结果提示，OA+LY294002 组与 OA 组相比，Plin5 的蛋白表达明显降低，存在统计学差异（P<0.05）（图 3）。


本文编号：3103955