游离脂肪酸对THP-1巨噬细胞NALP3炎性通路的影响

发布时间：2021-03-27 18:22

　　目的:探讨NALP3炎性小体在非酒精性脂肪性肝炎（non-alcoholic steatohepatitis,NASH）的炎症发生发展中的可能作用。方法:选择THP-1构建体外巨噬细胞模型,用不同浓度的棕榈酸干预24 h;用不同浓度的N-乙酰半胱氨酸（N-acetylcysteine,NAC）预处理细胞后加入高浓度的棕榈酸孵育24 h。分别用活性氧（reactive oxygen species,ROS）指示剂结合流式细胞仪检测THP-1中ROS的变化;ELISA检测细胞上清液中IL-1β的浓度;免疫荧光技术检测NALP3,caspase-1蛋白的表达;荧光定量PCR检测NALP3蛋白复合体各组分（NALP3,ASC,caspase-1）mRNA的表达水平。结果:与空白组相比,各棕榈酸组细胞内ROS增加,NALP3和caspase-1蛋白表达及其分泌IL-1β水平均增加（P<0.05）,并随棕榈酸浓度增加而增强;NAC预处理后,与单纯棕榈酸组相比,各NAC组THP-1产生ROS水平均下降,同时NALP3和caspase-1蛋白表达水平,NALP3复合体各组分mRNA水平及其分泌I... 

【文章来源】：中南大学学报(医学版). 2014,39(08)北大核心CSCD

【文章页数】：7 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 细胞培养
        1.2.2 分组
    1.3 ELISA测定IL-1β
    1.4 流式细胞仪检测细胞内ROS
    1.5免疫荧光法检测THP-1内NALP3, caspase-1蛋白的表达
    1.6 荧光定量PCR检测NALP3蛋白复合体各组分m RNA表达
    1.7 统计学处理
2 结果
    2.1 PA对THP-1内ROS, IL-1β的影响
    2.2 NAC预处理对PA刺激THP-1产生ROS, IL-1β的影响
    2.3 NAC预处理对PA孵育刺激的THP-1细胞NALP3炎性复合体各组分m RNA表达水平的影响
    2.4 THP-1细胞内NALP3, caspase-1蛋白的变化
        2.4.1 不同浓度PA对THP-1细胞内NALP3, caspase-1蛋白表达的影响
        2.4.2 不同浓度NAC预处理对PA刺激的THP-1巨噬细胞NALP3, caspase-1蛋白表达的影响
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]NALP3炎性体在小鼠非酒精性脂肪性肝炎发病中的作用[J]. 方文莉,施敏,魏珏,王霆,王玉刚.  肝脏. 2012(05)
[2]Roles of liver innate immune cells in nonalcoholic fatty liver disease[J]. Yu-Tao Zhan, Department of Gastroenterology and Hepatology, Beijing Tongren Hospital, Capital Medical University, Beijing 100730, China Wei An, Department of Cell Biology, Capital Medical University, Beijing 100069, China.  World Journal of Gastroenterology. 2010(37)
[3]枯否氏细胞在大鼠非酒精性脂肪性肝炎发病中的作用[J]. 范建高,钟岚,王国良,巫协宁,李明升,靖大道,张丕利.  中华肝脏病杂志. 2001(01)



本文编号：3103980