大鼠肝纤维化组织差异MicroRNA的筛选及其与纤维化相关性分析

发布时间：2021-04-21 23:59

　　在肝组织存在纤维化甚至肝硬化的病理改变基础上,各种致病因子的打击更容易造成严重的肝功能衰竭。终末期肝功能衰竭,临床治疗效果差,给人民健康及医疗财政带来了严峻的考验。众多研究表明肝纤维化形成机制复杂,但具有可逆性。近年来研究发现MicroRNA在调控肝纤维化形成过程中发挥着重要的作用,有研究表明促肝纤维化发展的MicroRNA,其抑制剂能有效的逆转肝纤维化。因此有关肝纤维化的MicroRNA研究可能为临床治疗肝纤维化带来新的突破。第一部分构建大鼠免疫性肝纤维化模型目的：明确是否成功构建大鼠免疫性肝纤维化模型。方法：将26只雄性Wistar大鼠随机分为两组（A、B）,A组10只,B组16只。A组为正常对照组,生理盐水腹腔注射（0.5ml/只,2次/周）连续12周；B组为肝纤维化模型组,其中随机选取3只为B1组,腹腔注射猪血清0.5ml/只/次,2次/周,共4周；继续随机抽选3只为B2组,腹腔注射猪血清0.5ml/只/次,2次/周,共8周；余下10只为B3组,腹腔注射猪血清0.5ml/只/次,2次/周,共12周。B1、B2组实验动物分别在第4周末及第8周末处死,留取肝组织进行HE染色、Mas... 

【文章来源】：中南大学湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：54 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
中英文缩略语表
前言
第一部分 构建大鼠免疫性肝纤维化模型
    1.1 引言
    1.2 材料
        1.2.1 研究对象
        1.2.2 主要试剂
        1.2.3 主要仪器设备
        1.2.4 病理染色试剂的配制
    1.3 方法
        1.3.1 实验动物分组及处理
        1.3.2 标本采取
        1.3.3 病理学图片制作
        1.3.4 染色结果分析方法
        1.3.5 统计学方法
    1.4 结果
        1.4.1 大鼠一般情况
        1.4.2 HE及MASSON染色结果分析
        1.4.3 两组肝纤维化分级及胶原面积百分比的比较
    1.5 讨论
    1.6 结论
第二部分 分析大鼠肝纤维化组织与正常肝组织中MICRORNA的表达差异
    2.1 引言
    2.2 材料
        2.2.1 研究对象
        2.2.2 主要试剂
        2.2.3 主要仪器
    2.3 方法
        2.3.1 RNA的提取
        2.3.2 RNA的纯度分析
        2.3.3 MicroRNA表达差异的检测
        2.3.4 qPCR验证各差异MicroRNA在两样本间的表达
    2.4 结果
        2.4.1 两组样本中所获得的MicroRNA数目
        2.4.2 两组样本中存在表达差异的MicroRNA
    2.5 讨论
    2.6 结论
第三部分 研究MicroRNA-138与肝纤维化细胞因子表达的相关性
    3.1 引言
    3.2 材料
        3.2.1 研究对象
        3.2.2 主要试剂
        3.2.3 主要仪器设备
    3.3 方法
        3.3.1 提取RNA
        3.3.2 RNA的纯度分析
        3.3.3 MicroRNA-138表达水平检测
        3.3.4 各细胞因子mRNA检测
        3.3.5 qPCR所得数据结果分析
        3.3.6 统计学方法
    3.4 结果
        3.4.1 MicroRNA-138及各mRNA的qPCR结果
        3.4.2 MicroRNA-138及各mRNA表达水平及其相关系数
    3.5 讨论
    3.6 结论
参考文献
综述
    参考文献
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]基质金属蛋白酶与肝脾纤维化[J]. 褚海波,徐睿.  中国现代普通外科进展. 2013(09)
[2]miR-214通过抑制TOM1表达促进肝星状细胞活化和迁移[J]. 公绪华,陈超,朱樑.  胃肠病学. 2013(07)
[3]肝星状细胞与肝纤维化[J]. 唐桂连.  国际消化病杂志. 2012(05)
[4]肝窦病变对慢性乙型肝炎肝脏微循环障碍的影响[J]. 王勇,丁体龙,马勇,沈烈,张文学,于莉.  实用肝脏病杂志. 2012(04)
[5]胶原蛋白与肝纤维化[J]. 康丽华.  中国疗养医学. 2006(06)
[6]常用肝纤维化动物模型的研究及评价[J]. 林冬静,金政.  时珍国医国药. 2006(03)
[7]视黄醇脂对慢性酒精性肝病患者肝脏纤维化的抑制作用[J]. 刘中宏,郑长青,李春明.  世界华人消化杂志. 2006(02)
[8]Dynamic changes in the expression of matrix metalloproteinases and their inhibitors,TIMPs,during hepatic fibrosis induced by alcohol in rats[J]. Guang-Fu Xu Department of infectious Diseases,1~(st) Affiliated Dongzhimen Hospital,Beijing University of Traditional Chinese Medicine,Beijing 100700,China Xin-Yue Wang De-Lu Tian Liang-Duo Jiang Jin-Xiang Yang Department of Digestive Diseases,1~(st) Aff’diated Dongzhimen Hospital,Beijing University of Traditional Chinese Medicine,Beijing 100700,China Peng-Tao Li Xu Jia Basic Medicine College of Beijing University of Traditional Chinese Medicine,Beijing 100029,China.  World Journal of Gastroenterology. 2004(24)
[9]Potential involvement of leptin in carcinogenesis of hepatocellular carcinoma[J]. Xiu-Jie Wang Shu-Lan Yuan Qing Lu Yan-Rong Lu Jie Zhang Yan Liu Wen-Dong Wang Division of Experimental Oncology,Key Laboratory of Biotherapy of Human Diseases of Ministry of Education,China,West China Hospital,Sichuan University,Chengdu 610041,Sichuan Province,China West China Hospital,Sichuan University,Chengdu 610041,Sichuan Province,China Pathology Department of West China Healthy College,Sichuan University,Chengdu 610041,Sichuan Province,China.  World Journal of Gastroenterology. 2004(17)



本文编号：3152750