拉米夫定耐药慢性乙型肝炎患者中新发现的HBV逆转录酶rtM204Q变异株的病毒学特点研究

发布时间：2021-05-07 14:32

　　我国有9300万慢性乙型肝炎病毒（hepatitis B virus, HBV）感染人群,慢性HBV感染可引起慢性乙型肝炎、肝硬化、肝衰竭和肝细胞癌,我国每年死于HBV感染相关疾病的患者约35万人。抗HBV治疗是慢性乙型肝炎治疗及阻断其向肝硬化、肝衰竭和肝细胞癌发展的重要手段,核苷（酸）类似物（nucleos（t）ide analogs, NAs）是抗HBV治疗的主要药物,但随用药时间的延长,病毒的耐药问题已成为临床抗HBV治疗的棘手问题。1998年上市的拉米夫定（lamviudine,LAM）在我国有长达13年的临床抗HBV治疗史,超过120万慢性乙型肝炎患者曾经应用LAM进行抗病毒治疗,由于该药服用方便、安全,治疗费用相对低等优点,目前仍有大量患者在服用该药。HBV多聚酶缺乏校对活性,因此在病毒复制过程中容易产生错配,产生大量序列多样性的病毒株,形成病毒准种。在药物选择压力下,对药物适应性强的病毒变异株可演变为优势株,引起病毒耐药。NAs的作用靶位在HBV多聚酶的逆转录酶（reverse transcriptase, RT）区,抑制病毒的复制。引起病毒耐药的基因变异分为原发耐药变异... 

【文章来源】：桂林医学院广西壮族自治区

【文章页数】：66 页

【学位级别】：硕士

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中文摘要
ABSTRACT
符号说明
前言
1 材料与方法
    1.1 研究对象
    1.2 主要试剂
    1.3 主要仪器
    1.4 HBV DNA提取
    1.5 HBV RT全基因组巢式PCR扩增方法
    1.6 琼脂糖凝胶电泳检测PCR扩增结果
    1.7 HBV DNA的克隆、鉴定及测序分析
    1.8 定点突变改建pTriEx-1.1倍HBV重组质粒
    1.9 五种变异克隆株上RT区与改建成功的pTriEx-1.1-HBV(C)上的RT区置换克隆及鉴定
    1.10 重组质粒转染HepG2细胞及加药培养
    1.11 变异病毒株的复制力测定及对药物敏感性实验
2 结果
    2.1 PCR扩增目的样品L107 HBV RT区,TA克隆及其基因型分析
    2.2 改建的pTriEX-HBV(C)-1.1载体酶切鉴定与测序鉴定
    2.3 HBV突变型与野生型的RT区与pTriEX-HBV-1.1倍载体上的RT进行置换
    2.4 变异病毒复制力水平与表型耐药特点的鉴定
3 讨论
4 结论
参考文献
综述
    参考文献
攻读学位期间发表的学术论文目录
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]Characteristics of general distribution of hepatitis B virus genotypes in China[J]. Chang-Tai Zhu and Chun-Lei Dong Department of Laboratory Medicine,Changzhou Cancer Hospital,Suzhou University,Changzhou 213001,China.  Hepatobiliary & Pancreatic Diseases International. 2009(04)
[2]乙型肝炎病毒的病毒学特点及其临床意义[J]. 徐东平.  解放军医学杂志. 2009(06)
[3]340例慢性乙型肝炎患者乙型肝炎病毒多位点耐药相关突变分析[J]. 徐东平,刘妍,成军,李晓东,戴久增,李乐,梁兆玲,白丽,钟彦伟,许智慧,任晓强,张玲霞.  中华肝脏病杂志. 2008 (10)
[4]核苷(酸)类似物耐药变异对乙型肝炎病毒生物学特性的影响[J]. 陈立,张欣欣.  中国实用内科杂志. 2007(15)



本文编号：3173561