携改良型HBVpre-S1基因表达载体的构建及相关研究

发布时间：2021-05-09 04:19

　　目的：肝脏疾病是世界性的常见疾病,现有的治疗方法却不理想,基因治疗将可能是治疗最为有效方法。然而,目前肝病的基因治疗进展缓慢,其中最主要的原因是缺乏高效的、肝细胞特异性的载体。因此,研制出高效的嗜肝性基因治疗载体,是肝病基因治疗取得实质进展的关键。pre-S1蛋白含有HBV和肝细胞膜结合的位点,该位点位于第21-47位氨基酸,是重要的免疫介导部位,肝细胞、B细胞和T细胞均可表达针对这一肽段的受体,变异的病毒只要这一区段完好就有传染性。本研究采用基因重组技术,将HBV表面蛋白中嗜肝性成分的基因编码作无免疫原性修改后,构建出携改良型HBVpre-S1基因表达载体,为下一步嗜肝性重组腺相关病毒微球的制备提供实验研究基础。方法：以我国HBV流行株adr的DNA为模板,PCR法提取并扩增pre-S1的编码基因HBVpre-S1,然后将提取的HBVpre-S1基因用定点突变延伸的方法,通过两个独立的PCR扩增反应,将预设的突变构建在重叠区域,同时存在于两个扩增片段中,混合得到的两个重叠DNA片段,用两条分别与两个原始片段末端结合的引物进行第二次PCR扩增,将硬性较强的脯氨酸用柔性较大的丙氨酸替换,... 

【文章来源】：西南医科大学四川省

【文章页数】：58 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
1 携改良型HBVpre-S1基因表达载体的构建及相关研究
    1.1 中文摘要
    1.2 英文摘要
    1.3 前言
    1.4 材料与方法
    1.5 结果
    1.6 讨论
    1.7 结论
    1.8 参考文献
    1.9 英汉缩略词对照表
2 致谢
3 乙肝病毒pre-S1基因的研究现状(综述)
    参考文献



本文编号：3176611