异甘草酸镁对急性肝衰竭小鼠FGL2凝血酶原酶和血小板活化因子表达的影响

发布时间：2017-04-24 18:00

  本文关键词：异甘草酸镁对急性肝衰竭小鼠FGL2凝血酶原酶和血小板活化因子表达的影响，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:探讨异甘草酸镁对急性肝衰竭小鼠FGL2凝血酶原酶和血小板活化因子表达及微血栓形成的影响,进一步探讨异甘草酸镁的保肝机制,为异甘草酸镁的临床应用提供新的理论依据。方法1、清洁级常规喂养健康雄性KM小鼠50只,饲养1周后随机分为三组,分别为正常对照组,肝衰模型组,异甘草酸镁组,其中异甘草酸镁组又分为25mg/kg、50mg/kg、100mg/kg剂量三个亚组,对照组和模型组各10只,异甘草酸镁组三个亚组各10只。2、模型组和异甘草酸镁组按350 mg/kg D-Galn联合30μg/kg LPS一次性注射进腹腔内诱导肝衰竭模型,造模前3天异甘草酸镁组三个亚组分别腹腔注射25mg/kg、50mg/kg、100mg/kg异甘草酸镁注射液,每天一次,对照组和模型组分别注射等体积生理盐水。于造模8h后处死各组小鼠。3、各组分别进行以下指标检测:1)常规病理切片、HE染色,光学显微镜下观察各组肝组织病理改变和微血栓情况。2)全自动生化分析仪检测丙氨酸基转移酶(ALT)、血清天冬氨酸转移酶(ALT)、总胆红素(TBil)的水平。3)Elisa法检测血清中血小板活化因子(PAF)的水平。4)免疫组织化学染色法检测FGL2凝血酶原酶的表达。5)RT-PCR法检测FGL2m RNA的表达。4、应用SPSS19.0软件进行各组数据统计与分析,组间均数比较采用单因素方差分析。结果:1、正常对照组,模型组,异甘草酸镁组各亚组的肝组织病理改变有明显差异性,其中正常对照组肝小叶结构完整,肝索排列条理清晰,肝细胞未见明显变性和坏死。模型组肝正常组织结构消失,镜下可见大片细胞坏死,残余少许正常肝细胞,很多炎性细胞浸润于坏死区和汇管区,肝窦部充血、微血栓形成明显,符合急性肝衰竭病理改变,结合小鼠临床表现和肝功生化指标结果提示诱导肝衰竭成功,异甘草酸镁组可见部分肝细胞浸润、坏死和微血栓形成,细胞肿胀明显,严重程度和干预药物浓度呈负相关。2、正常对照组血清中ALT、AST、TBi L基本正常,模型组血清ALT、AST含量最高,异甘草酸镁组各亚组血清中ALT、ALT和对照组比较均有不同程度升高,和干预药物浓度呈负相关,但比模型组低。TBi L各组间未见明显差异性,可能和黄疸滞后性有关。3、正常对照组血清PAF浓度最低,模型组血清PAF浓度最高,异甘草酸镁组随着药物浓度的增加,血清PAF浓度逐渐下降,但各亚组浓度均高于对照组,低于模型组。4、正常对照组肝血窦及微血管内皮细胞基本没有或少许FGL2凝血酶原酶表达,模型组可见FGL2凝血酶原酶棕黄色深染色表达,尤其集中在肝血窦和微血管附近内皮细胞高度表达,异甘草酸镁组随着剂量的增加,FGL2的表达逐渐减少,各亚组蛋白含量表达均高于对照组,低于模型组。5、正常对照组FGL2m RNA表达量很少,模型组高表达,与对照组比较差异有统计学意义,异甘草酸镁组各亚组均检测到FGL2m RNA表达,与药物浓度呈负相关性,与模型组以及各亚组间比较差异均有统计学意义。结论:本实验成功诱导急性肝衰竭模型;急性肝衰竭小鼠肝脏中FGL2凝血酶原酶和血小板活化因子高表达,肝组织出现明显的微循环障碍;随着异甘草酸镁药物浓度的增加,可逐渐减轻急性肝衰竭小鼠FGL2凝血酶原酶和血小板活化因子的表达,降低凝血酶的激活及微血栓形成,改善急性肝衰竭的微循环障碍而达到保肝护肝作用。
【关键词】：急性肝衰竭 FGL2凝血酶原酶 血小板活化因子 微循环障碍
【学位授予单位】：南昌大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R575.3
【目录】：

• 摘要3-5
• ABSTRACT5-10
• 中英文缩略词表10-11
• 第1章 前言11-13
• 第2章 材料与方法13-22
• 2.1 实验材料13-14
• 2.1.1 实验动物13
• 2.1.2 主要试剂13-14
• 2.1.3 主要仪器14
• 2.2 实验方法14-21
• 2.2.1 实验动物及分组处理14-15
• 2.2.2 实验动物模型的构建15
• 2.2.3 小鼠的解剖和标本留取15
• 2.2.4 相关试剂及液体的配置15-16
• 2.2.5 病理组织学切片与HE染色16-17
• 2.2.6 肝功生化指标检测17
• 2.2.7 酶联免疫吸附法测定PAF因子浓度17-18
• 2.2.8 免疫组织化学染色法检测FGL2蛋白的表达18-19
• 2.2.9 逆转录聚合酶链反应检测FGL2 mRNA19-21
• 2.4 数据处理与统计21-22
• 第3章 结果22-29
• 3.1 肝脏病理组织形态学观察结果22-23
• 3.2 肝功能生化指标的变化与对比分析23-25
• 3.3 各组PAF因子ELISA检测结果25-26
• 3.4 免疫组化检测FGL2蛋白分布表达26-27
• 3.5 RT-PCR检测FGL2mRNA的表达结果27-28
• 3.6 FGL2和PAF组间相关性分析28-29
• 第4章 讨论29-35
• 4.1 急性肝衰竭微循环障碍发生的原因及机制29-30
• 4.2 Fgl2凝血酶原酶与急性肝衰竭的微循环障碍的作用关系30-32
• 4.3 血小板活化因子（PAF）与急性肝衰竭的微循环障碍的作用关系32-33
• 4.4 各组间Fgl2凝血酶原酶和血小板活化因子（PAF）的相关性分析33
• 4.5 异甘草酸镁的作用机制以及对急性肝衰竭小鼠中Fgl2凝血酶原酶和PAF表达关系的影响33-35
• 第5章 结论与展望35-36
• 5.1 结论35
• 5.2 展望35-36
• 致谢36-37
• 参考文献37-40
• 攻读学位期间的研究成果40-41
• 综述41-45
• 参考文献43-45

【参考文献】

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本文编号：324660