母胎转运与HBV宫内感染的研究

发布时间：2021-07-01 15:00

　　目的:探索HBsAg阳性孕妇细胞是否可进入胎儿血循环,HBV通过细胞转运使胎儿发生宫内感染的机制。方法:选取2006年7月至2008年3月在南昌大学医学院第一附属医院产科足月分娩HBsAg阳性孕妇及其新生儿各160例为研究对象。利用谷胱甘肽S转移酶M1基因（glutathione S-transferase M1,GSTM1）、人血管紧张素转换酶基因（angiotensin-converting enzyme genes,ACE）基因多态性,用等位基因特异性PCR（AS-PCR）和半巢式PCR（hemi-nPCR）方法检测母-胎细胞转运。用实时荧光定量PCR（fluorescence quantitative PCR, FQ-PCR）方法对母儿HBV DNA和PBMC HBV DNA进行定量分析。结果:1、以GSTM1及ACE基因作为母亲的特异性等位基因,收集到56对信息病例对中,其中31例新生儿发生了母儿转运,占55.35%（31/56）。2、当以新生儿外周血PBMC HBV DNA阳性来判断新生儿HBV宫内感染时,母—胎细胞转运组较未转运组新生儿宫内感染率要高（χ213.532,P... 

【文章来源】：南昌大学江西省 211工程院校

【文章页数】：37 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

GSTM1基因多态性琼脂糖凝胶电泳图谱

图 2.1 GSTM1 基因多态性琼脂糖凝胶电泳图谱：多态位点 ACE 基因内含子插入片段约 287bp，经 PCR 扩增后ker 对照，如无 287bp 插入片段，可扩增出 190bp 的缺失型片如有 287bp 的插入片段，可扩增出 490bp 的插入型片段（II 基子则扩增出 190bp 和 490bp 二条片段（ID 基因型）（图 2.1）型 ACE（ID）杂合子，胎儿 ACE（II 或 DD）纯合子的母婴病例

像紫外灯下观察并保存图片。用引物GSTM1-P1、GSTM1-P2 和GSTM1-P3 对信息病例对中的新生儿进行hemi-nPCR 反应,扩增母亲的GSTM1 基因,片段长度为252bp 。(图2.3)图2.3 半巢式PCR检测母亲特异性GSTM1 基因图谱M: pUC19DNAPMspl Marker ,PC:阳性对照(252bp)NC:阴性对照F1、F2 表示新生儿外周血有母亲 DNA ,F3、F4 表示新生儿外周血中无母亲 DNA2）① 用引物 ACE-P3、ACE-I1 和 ACE-P1 对信息病例对中缺失纯合子(DD) 的新生儿进行 hemi-nPCR ,扩增母亲的特异性插入基因( I 基因) ,其中引物ACE-P3 和 ACE- II 扩增片段长度为 425bp ,引物 ACE-P1 和 ACE-I1 扩增片段长度为 356bp.② 用引物 ACE-P1、ACE-P4 和 ACE-P2 对信息病例对中插入纯合子( II) 的新生儿进行 hemi2nPCR ,扩增母亲的特异性缺失基因(D 基因) ,其中引物 ACE-P1和 ACE-P4 扩增片段长度为 226bp

【参考文献】：
期刊论文
[1]乙型肝炎病毒宫内感染的研究现状及今后工作重点[J]. 王素萍,徐德忠.  中华流行病学杂志. 2005(04)
[2]乙型肝炎病毒宫内传播因素和机制的分子流行病学研究[J]. 徐德忠,闫永平,徐剑秋,王文亮,门可,张景霞,刘斌,刘志华,王福生,蒋美玲,陈向红.  中华医学杂志. 1999(01)



本文编号：3259354