郁金散调控MAPK和PI3K/Akt信号通路改善肝纤维化的机制研究

发布时间：2021-07-02 21:26

　　目的:通过建立四氯化碳诱导小鼠肝纤维化模型,探究郁金散对肝纤维化的改善作用及可能的调控机制,为新药的开发提供了有力的实验依据。方法:1.将C57BL/6小鼠随机分为8组:（1）正常组（Normal）,5只、（2）四氯化碳模型组（CCl4）,10只、（3）郁金散低剂量组（CCl4+YJP-100mg/kg）,9只、（4）郁金散中剂量组（CCl4+YJP-200mg/kg）,9只、（5）郁金散高剂量组（CCl4+YJP-300mg/kg）,10 只、（6）郁金散单独给药组（YJP-300 mg/kg）,9只、（7）水飞蓟宾阳性对照组（CCl4+Silybin-100mg/kg）,9只、（8）扶正化瘀胶囊阳性对照组（CCl4+FZHY-2g/kg）,9只。用10%的四氯化碳给小鼠腹腔注射6周,诱导小鼠肝纤维化。其余药物灌胃给药6周,每天1次。在第6周末,处死小鼠取其眼球血与肝组织,并观察小鼠一般状态。2.用酶联免疫吸附测定法测定各组血清ALT、AST、TNF-α、IL-1β、IL-12和IL-18的水平。3.肉眼观察解剖后小鼠肝脏的颜色与表面光滑程度。通过苏木精-伊红染色和天狼星红2种染色方... 

【文章来源】：延边大学吉林省 211工程院校

【文章页数】：70 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１．郁金散对小鼠血清中ＡＬＴ、ＡＳＴ、ＩＬ－ｌｐ、ＩＬ－１２、ＩＬ－１８和ＴＮＦ－ａ??水平的影响

可改善肝组织纤维化程度。??以上肝组织形态学及肉眼观察结果说明，郁金散可以降低ｅｃｕ所致??炎性反应，减少胶原沉积，而改善肝损伤、肝纤维化。（见图２）??Ｎｏｒｍａｌ?ＣＣＩ４?ＣＣ１４＋ＹＪＰ－Ｉ００?ＣＣ１４＋ＹＪＰ－２００?ＣＣＩ４＋ＹＪＰ－３００?ＹＪＰ－３００?Ｃ：Ｃ：１４＋Ｓｉｌｙｂｉｎ?Ｃ：Ｃ１４＋?ＦＺＩＩＹ??ｍｍｍｕｍｍｍ??图２．郁金散对ＣＣＵ诱导下的小鼠新鲜肝脏及肝组织病理学镜下表现；??分别用Ｈ＆Ｅ和Ｓｉｒｉｕｓ?ｒｅｄ染色观察，显微镜下所见均为放大１００倍。??１２??

观察到ａ－ＳＭＡ、Ｃｏｌｌａｇｅｎ－Ｉ在汇管区和中央静脉周围的表达逐渐减少，呈??现剂量依赖性。高剂量组仅能见到两者有少量的表达，阳性对照组效果??弱于郁金散治疗组。（见图３－ａ）??Ｎｏｒｍａｌ?ＣＣ１４?ＣＣ１４＋ＹＪＰ－１００?ＣＣＭ＋ＹＪＰ－２００?ＣＣＩ４＋ＹＪＰ－３００?ＹＪＰ－３００?Ｃａ４＋ＳＵｖｂｌｎ?ＣＣ１４＋?ＦＺＨＹ??■■■■■■■■??——??图３－ａ．郁金散对ＣＣＩ４诱导下的小鼠中ａ－ＳＭＡ、Ｃｏ丨ｌａｇｅｎ－Ｉ阳性表达水??平，镜下所见均为放大４００倍后所得。??蛋白免疫印迹法结果：ＣＣ１４腹腔注射后，模型组ｏｔ－ＳＭＡ、Ｃｏｌｌａｇｅｎ－Ｉ??的蛋白表达显著增加。与正常组相比，差异有统计学意义（＃＃＃Ｐ＜０．００１），??表明ＣＣＵ致小鼠肝损伤是成功的。郁金散低剂量组仅能明显抑制ａ－ＳＭＡ??表达，不能明显抑制Ｃｏｌｌａｇｅｎ－Ｉ蛋白的表达，无显著性差异。中、高剂??量组郁金散及水飞蓟宾、扶正化瘀均可显著抑制两种蛋白的表达，差异??有统计学意义（…Ｐ＜〇．〇〇ｌ），且随着郁金散给药剂量的不断增加，两种??蛋白的表达降低越明显。高剂量组郁金散灌胃后，Ｃｏｌｌａｇｅｎ－［蛋白降低??１３??

【参考文献】：
期刊论文
[1]HBV infection-induced liver cirrhosis development in dual-humanised mice with human bone mesenchymal stem cell transplantation[J].   Science Foundation in China. 2019(01)
[2]复方鳖甲软肝片防治大鼠肝纤维化作用及机制[J]. 杨宇,赵月涵,庄海,郑志强,江苔,李龙宽,陈应强.  贵州医科大学学报. 2018(12)
[3]水苏碱对四氯化碳致小鼠急性肝损伤的保护作用[J]. 郭书凯,周艳丽,吕茂盛,吴晓凡,陈美华.  泰山医学院学报. 2018(12)
[4]“茵陈—郁金”药对配伍对肝纤维化模型大鼠作用效果研究[J]. 陈一凡,孙会卓,罗慜婧,乔雅兰,施晓军,王敏,高誉珊.  贵阳中医学院学报. 2018(02)
[5]扶正化瘀胶囊合恩替卡韦对慢性乙肝肝纤维化的临床疗效[J]. 张艳鹤.  实用中西医结合临床. 2018(03)
[6]扶正化瘀片调节肝纤维化miR-122基因相关因子表达研究[J]. 张巍,邵明亮,张海丛,吴宗耀,苗同国,郑欢伟,谢星童,王蕊.  北京中医药大学学报. 2018(01)
[7]慢性乙型肝炎患者血清还原型谷胱甘肽的水平变化及其对肝功能与影响[J]. 姜荷,李群,张国旗,盛楠.  山东医药. 2017(33)
[8]桂郁金对肝星状细胞TGF-β1/Smad信号通路的影响[J]. 张技,蒋淼,李白雪.  中药与临床. 2017(04)
[9]MicroRNA与肝癌诊治研究进展[J]. 张伟,董政,荣义辉.  肝脏. 2017(02)
[10]Liver fibrosis and hepatic stellate cells: Etiology, pathological hallmarks and therapeutic targets[J]. Chong-Yang Zhang,Wei-Gang Yuan,Pei He,Jia-Hui Lei,Chun-Xu Wang.  World Journal of Gastroenterology. 2016(48)

博士论文
[1]新型脯氨酸羟化酶抑制剂BT1001和BT1011抗肝纤维化的作用及机制研究[D]. 王中峰.吉林大学 2018



本文编号：3261258