S100A16通过CaM/CAMKK2/AMPK通路调节小鼠肝脏脂代谢

发布时间：2021-07-07 18:58

　　目的:既往研究表明S100钙结合蛋白A16（S100 calcium binding protein A16,S100A16）参与调节脂肪细胞脂代谢,而S100A16与肝脏脂代谢的关系尚不清楚,本研究旨在探讨S100A16在非酒精性脂肪性肝病（Nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD）中的作用。方法:选用5周龄S100a16转基因小鼠模型（S100a16 transgenic）、S100a16基因敲低小鼠模型（S100a16 knockdown）、Wildtype C57BL/6小鼠为实验对象,三种基因型小鼠各20只,再随机分配到正常脂肪饮食组（Normal fat diet,NFD）和高脂饮食组（High fat diet,HFD）,共6组:Wildtype小鼠正常脂肪饮食组（n=10）;Wildtype小鼠高脂饮食组（n=10）;S100a16 transgenic正常脂肪饮食组（n=10）;S100a16 transgenic高脂饮食组（n=10）;S100a16 knockdown小鼠正常脂肪饮食组（n=10）;S100a16 knockdo... 

【文章来源】：南京医科大学江苏省

【文章页数】：83 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
中文摘要
ABSTRACT
前言
材料和方法
    1.实验材料
        1.1 药品和试剂
        1.2 主要试剂及配方
        1.3 实验耗材和仪器
        1.4 实验动物及饲养条件
        1.5 细胞株及培养条件
    2.实验方法
        2.1 高脂和正常脂肪喂养动物实验
        2.2 小鼠脂代谢及肝功能指标测定
        2.3 小鼠肝脏病理染色
        2.4 小鼠肝脏甘油三酯含量检测
        2.5 细胞实验常规操作
        2.6 细胞质粒转染实验
        2.7 细胞脂肪酸培养实验
        2.8 细胞甘油三酯含量检测
        2.9 细胞油红O染色
        2.10 STO-609 抑制细胞CAMKK2 活性实验
        2.11 免疫沉淀、免疫共沉淀及质谱分析
        2.12 免疫荧光实验
        2.13 Quantity Real-time PCR实验
        2.14 提取总蛋白质并采用BCA法检测蛋白浓度
        2.15 Western Blot实验
    3.统计分析
实验结果
    1.S100a16 transgenic 、knockdown基因型小鼠验证
    2.小鼠S100a16 transgenic加重HFD诱导的脂肪肝,而S100a16 knockdown则起缓解作用
    3.S100a16 transgenic小鼠血脂和转氨酶均明显增高,而S100a16 knockdown小鼠则降低
    4.S100a16 质粒成功转染LO2 细胞
    5.S100A16 与CaM相互作用
    6.S100A16 通过CaM / CAMKK2 / AMPK通路调节小鼠肝脏脂肪生成
    7.S100A16 促进LO2 细胞甘油三酯合成
    8.S100A16 通过CaM / CAMKK2 / AMPK通路调节LO2 细胞脂代谢
    9.STO-609 阻断S100A16 对CaM/CAMKK2/AMPK通路作用
讨论
结论
参考文献
文献综述 S100A16 及其相关性疾病
    参考文献
附录:中英文缩略词对照表
攻读学位期间发表文章情况
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]S100A16基因敲除小鼠模型的构建与鉴定[J]. 童佩,奚玲,杨洁,刘云.  南京医科大学学报(自然科学版). 2017(05)
[2]11β-HSD1与S100A16共同调节3T3-L1脂肪细胞的分化[J]. 李璐,辛婧,薛一,杜新丽,张日华,刘云.  中华内分泌代谢杂志. 2014 (09)
[3]S100A16转基因小鼠的构建与鉴定[J]. 杜新丽,薛一,张媛媛,张日华,刘云.  南京医科大学学报(自然科学版). 2012(03)

硕士论文
[1]钙结合蛋白S100A16基因敲除小鼠的构建以及S100A16对高脂饮食诱导下肥胖小鼠糖脂代谢的影响及其机制研究[D]. 童佩.南京医科大学 2017
[2]S100A16与11β-HSD1共同调节糖脂代谢的研究[D]. 奚玲.南京医科大学 2016



本文编号：3270186