肠道HCN2通道在肠易激综合征发病中的作用
发布时间：2021-07-13 07:21
目的:探讨肠道超极化激活环核苷酸门控阳离子通道（HCN）中HCN2亚型在肠易激综合征（IBS）大鼠肠道高敏感及肠道动力异常中的作用,从而进一步揭示IBS发病机理,为IBS的治疗提供新的靶点。方法:（1）IBS模型大鼠自出生后第8d起,每天下午同一时间接受一次结直肠刺激（colorectal irritation,CI）,持续一周;正常对照组大鼠除了不行结直肠刺激外,其他过程与IBS模型组一样。大鼠在出生后第8周,通过检测腹外斜肌对结直肠扩张的反应来评估大鼠是否出现内脏痛觉敏化;并通过腹部触诊与肉眼观察肛门口的清洁度,剔除便秘与明显腹泻的大鼠进入实验。（2）采用Western bolt方法检测HCN2在IBS模型鼠肠道的表达。（3）腹腔注射给予0.1ml浓度为5μmol/L、10μmol/L、50μmol/L的HCN2阻断剂（尼氟酸）,观察不同浓度的尼氟酸（Niflumic acid）对IBS模型组大鼠和正常对照组大鼠腹外斜肌放电的变化。（4）IBS模型大鼠鞘内给予药物ZD7288（HCN非选择性抑制剂）阻断HCN通道,30min后再腹腔注射50μmol/L尼氟酸,观察其对腹外斜肌放电的...
【文章来源】：福建医科大学福建省
【文章页数】：53 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
新生期结直肠扩张刺激导致成年大鼠出现内脏敏感性增强A&B：正常大鼠和IBS大鼠在40和60mmHg结直肠扩张压力下腹肌放电原始图；C:大
CRD (n=8). *: p＜0.052 HCN2 在 IBS 大鼠直肠和回肠的表达水平高于正常大鼠腹外斜肌放电结果显示 IBS 大鼠的内脏痛较正常组明显增强，而我们欲研究肠道 HCN2 通道与内脏痛的关系。那么 IBS 大鼠与正常对照组大鼠肠道 HCN2 的表达情况是否有所不同呢？我们根据Western blot曝光结果采用Image J图像处理软件分析条带的光密度值对蛋白条带进行定量分析，（HCN2 光密度值的相对比=HCN2 光密度值/actin 光密度值）。数据显示：正常大鼠结直肠（colorectum）HCN2 光密度值的相对比值为 0.69±0.15（n=3）；IBS 大鼠结直肠（colorectum）HCN2 光密度值的相对比值为 1.09±0.04（n=3）；正常大鼠回肠（ileum）HCN2光密度值的相对比值为 0.49±0.07（n=3）；IBS 大鼠回肠（ileum）HCN2 光密度值的相对比值为 1.15±0.20（n=3）；IBS 大鼠结直肠和回肠 HCN2 的表达量分别高于正常大鼠，差异有统计学意义（p＜0.05，见图 2、图 3）。
图 3 大鼠回肠 HCN2 表达A：对照组和 IBS 组大鼠回肠 HCN2 蛋白表达水平的原始图；B：对照组和 IBS 组大鼠回肠 HCN2 蛋白表达水平的统计图（n=3）。*: p＜0.05Figure 3 The expression of ileum HCN2 in ratsA: The original diagrams of the expression level of ileum HCN2 protein in normal and IBSrats; B: The statistical chart of the expression level of ileum HCN2 protein in normal and IBS rats(n=3). *: p＜0.053 HCN2 抑制剂尼氟酸可降低 IBS 大鼠的痛觉敏感性为了研究 HCN 通道对内脏痛的影响，腹腔给予 HCN 通道抑制剂，观察 IBS大鼠和正常对照组大鼠内脏痛的变化。用 DMSO 溶解 HCN2 抑制剂（尼氟酸/Niflumic acid）至浓度分别为 5μmol/L、10μmol/L、50μmol/L，腹腔注射不同浓度的尼氟酸，观察正常对照组大鼠和 IBS 模型组大鼠腹外斜肌放电的变化情况，统计结果显示：四组正常对照组大鼠（每组 n=6）分别腹腔注射 DMSO、尼氟酸
【参考文献】：
期刊论文
[1]HCN通道:生物学特性及疼痛相关作用[J]. 吴桐,刘鹤,张励才. 生理学报. 2014(04)
[2]行气润肠汤治疗便秘型肠易激综合征的实验研究[J]. 陆迅,叶柏. 河南中医. 2013(04)
[3]肠易激综合征内脏高敏大鼠模型的建立及动态评估[J]. 李燕舞,巫燕莉,王汝俊,杜群,莫国强,郭钟慧,何风雷. 中药药理与临床. 2012(05)
[4]Hyperpolarization-activated cyclic nucleotide-gated cation channel subtypes differentially modulate the excitability of murine small intestinal afferents[J]. David Grundy. World Journal of Gastroenterology. 2012(06)
[5]腹外斜肌放电测量在肠易激综合征大鼠模型中的应用[J]. 林国威,张睿,林春. 海峡药学. 2006(04)
[6]小鼠空肠cajal间质细胞的分离与培养[J]. 吴志轩,余保平,夏虹,徐龙. 胃肠病学和肝病学杂志. 2005(05)
本文编号：3281628
【文章来源】：福建医科大学福建省
【文章页数】：53 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
新生期结直肠扩张刺激导致成年大鼠出现内脏敏感性增强A&B：正常大鼠和IBS大鼠在40和60mmHg结直肠扩张压力下腹肌放电原始图；C:大
CRD (n=8). *: p＜0.052 HCN2 在 IBS 大鼠直肠和回肠的表达水平高于正常大鼠腹外斜肌放电结果显示 IBS 大鼠的内脏痛较正常组明显增强，而我们欲研究肠道 HCN2 通道与内脏痛的关系。那么 IBS 大鼠与正常对照组大鼠肠道 HCN2 的表达情况是否有所不同呢？我们根据Western blot曝光结果采用Image J图像处理软件分析条带的光密度值对蛋白条带进行定量分析，（HCN2 光密度值的相对比=HCN2 光密度值/actin 光密度值）。数据显示：正常大鼠结直肠（colorectum）HCN2 光密度值的相对比值为 0.69±0.15（n=3）；IBS 大鼠结直肠（colorectum）HCN2 光密度值的相对比值为 1.09±0.04（n=3）；正常大鼠回肠（ileum）HCN2光密度值的相对比值为 0.49±0.07（n=3）；IBS 大鼠回肠（ileum）HCN2 光密度值的相对比值为 1.15±0.20（n=3）；IBS 大鼠结直肠和回肠 HCN2 的表达量分别高于正常大鼠，差异有统计学意义（p＜0.05，见图 2、图 3）。
图 3 大鼠回肠 HCN2 表达A：对照组和 IBS 组大鼠回肠 HCN2 蛋白表达水平的原始图；B：对照组和 IBS 组大鼠回肠 HCN2 蛋白表达水平的统计图（n=3）。*: p＜0.05Figure 3 The expression of ileum HCN2 in ratsA: The original diagrams of the expression level of ileum HCN2 protein in normal and IBSrats; B: The statistical chart of the expression level of ileum HCN2 protein in normal and IBS rats(n=3). *: p＜0.053 HCN2 抑制剂尼氟酸可降低 IBS 大鼠的痛觉敏感性为了研究 HCN 通道对内脏痛的影响，腹腔给予 HCN 通道抑制剂，观察 IBS大鼠和正常对照组大鼠内脏痛的变化。用 DMSO 溶解 HCN2 抑制剂（尼氟酸/Niflumic acid）至浓度分别为 5μmol/L、10μmol/L、50μmol/L，腹腔注射不同浓度的尼氟酸，观察正常对照组大鼠和 IBS 模型组大鼠腹外斜肌放电的变化情况，统计结果显示：四组正常对照组大鼠（每组 n=6）分别腹腔注射 DMSO、尼氟酸
【参考文献】：
期刊论文
[1]HCN通道:生物学特性及疼痛相关作用[J]. 吴桐,刘鹤,张励才. 生理学报. 2014(04)
[2]行气润肠汤治疗便秘型肠易激综合征的实验研究[J]. 陆迅,叶柏. 河南中医. 2013(04)
[3]肠易激综合征内脏高敏大鼠模型的建立及动态评估[J]. 李燕舞,巫燕莉,王汝俊,杜群,莫国强,郭钟慧,何风雷. 中药药理与临床. 2012(05)
[4]Hyperpolarization-activated cyclic nucleotide-gated cation channel subtypes differentially modulate the excitability of murine small intestinal afferents[J]. David Grundy. World Journal of Gastroenterology. 2012(06)
[5]腹外斜肌放电测量在肠易激综合征大鼠模型中的应用[J]. 林国威,张睿,林春. 海峡药学. 2006(04)
[6]小鼠空肠cajal间质细胞的分离与培养[J]. 吴志轩,余保平,夏虹,徐龙. 胃肠病学和肝病学杂志. 2005(05)
本文编号：3281628
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