重组小鼠IL-36成熟肽制备及其在IBD中作用的初步研究

发布时间：2021-07-31 00:55

　　目的:炎症性肠病（inflammatory bowel disease,IBD）普遍被认为是多种因素相互作用所致,如感染、遗传和环境等。IL-36是IL-1家族细胞因子成员,IL-36家族细胞因子有四个成员,IL-36α、IL-36β和IL-36γ作为IL-36受体（IL-36 Receptor,IL-36R）的三种激动配体,IL-36受体拮抗剂（IL-36 Receptor antagonist,IL-36Ra）可与IL-36R结合传递信号;IL-38也可与IL-36R结合发挥作用,IL-36激动配体与IL-36R结合后可募集IL-1受体相关蛋白（IL-1 receptor accessory protein,IL-1RAcP）形成二聚体向下游传递信号。为了研究IL-36对肠道黏膜免疫作用的影响,我们分别检测了IL-36家族细胞因子的表达情况,发现小鼠葡聚糖硫酸钠（Dextran sulfate sodium,DSS）肠道炎症时IL-36α、IL-36β和IL-36γ表达显著增高。为了进一步研究IL-36对肠道炎症的影响,我们成功制备了重组小鼠IL-36α、IL-36β和IL-36γ... 

【文章来源】：中国医科大学辽宁省

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

pET28a-IL-36α质粒测序结果

中国医科大学硕士学位论文10图1.诱导小鼠实验性肠炎模型后IL-36家族细胞因子的表达情况喂饲C57BL/6小鼠2.5%DSS饮用水5天后饮用无菌水，通过real-timeRT-PCR检测模型小鼠结肠在第0、5、8、14天IL-36α、IL-36β和IL-36γmRNA表达水平。数据均来自于三次独立实验，以每组5只小鼠平均值±SD表示。注：*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001。3.2制备重组小鼠IL-36α、IL-36β和IL-36γ成熟肽3.2.1IL-36α成熟肽基因工程菌构建选择PCR阳性菌落提取质粒进行序列测定。经测序鉴定为重组小鼠IL-36α成熟肽基因工程菌。测序结果如图2所示。图2.pET28a-IL-36α质粒测序结果

重组小鼠IL-36α成熟肽的表达结果


本文编号：3312444