胆汁淤积性肝硬化微环境因素对肝脏干细胞的影响
发布时间：2021-08-15 08:56
第一部分高浓度胆汁酸对肝脏干细胞HP14-19的增殖及凋亡的影响目的:探究高浓度毒性胆汁酸对肝脏干细胞HP14-19细胞的增殖、凋亡的影响及凋亡相关信号通路的调控机制,为肝脏干细胞HP14-19体内移植入胆汁淤积性微环境更好的存活提供理论及实验依据。方法:1.以胚胎肝脏干细胞HP14-19细胞为研究对象,CCK-8试剂盒检测胆汁酸在不同浓度（0、100、200、400、800、1200μmol/L）、不同时间（6 h、12 h、24 h、48 h）对HP14-19细胞的活力的影响。2.通过结晶紫染色检测胆汁酸在不同浓度（0、100、200、400、800、1200μmol/L）、不同时间点（6 h、12 h、24 h、48 h）对HP14-19细胞的增殖能力的影响。3.运用流式细胞术及DAPI染核法检测胆汁酸处理HP14-19细胞后的凋亡情况。4.运用Western-blot在蛋白水平检测胆汁酸对HP14-19细胞处理后凋亡信号通路相关标志物的表达情况。结果:1.CCK-8细胞活力检测显示不同浓度胆汁酸作用HP14-19细胞24 h后,当胆汁酸浓度约600μmol/L,细胞存活率接近7...
【文章来源】：重庆医科大学重庆市
【文章页数】：69 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
不同浓度不同时间点GCDC处理HP14-19细胞后的抑制率
重庆医科大学硕士研究生学位论文图 2 结晶紫染色检测 GCDC 处理 HP14-19 细胞的克隆形成Figure 2 Crystal violet staining for detection of colony formation of GCDC-treated HP14-19cells3.3 细胞流式检测 HP14-19 细胞的凋亡细胞流式 Annexin V FITC/PI 双染结果显示：600μmol/LGCDC 处理 HP14-19细胞 24 h 后，与对照组相比，处理组的细胞凋亡率高于对照组，差异具有统计学意义（P<0.05）。
图 4 DAPI 染色检测 GCDC 处理 HP14-19 细胞 24h 后的细胞凋亡Fig.4 Detection of apoptosis in HPDC-14-19 cells treated with GCDC for 24h by DAPI staining3.5 Western-blot 检测凋亡信号通路相关蛋白的表达图 5 Western-blot 检测 GCDC 处理 HP14-19 细胞后凋亡蛋白 Caspase-3、Bax 及 Bcl-2 的表达Fig. 5 Western-blot detected expressions of apoptosis proteins Caspase-3, Bax and Bcl-2 after
【参考文献】：
期刊论文
[1]Human hepatocytes loaded in 3D bioprinting generate mini-liver[J]. Cheng Zhong,Hai-Yang Xie,Lin Zhou,Xiao Xu,Shu-Sen Zheng. Hepatobiliary & Pancreatic Diseases International. 2016(05)
[2]胆道闭锁Kasai术后早期并发症的研究[J]. 叶晓烁,吴宙光,王建尧. 中国实用医药. 2016(19)
[3]氧化应激诱导自噬对骨髓间充质干细胞增殖与凋亡的影响[J]. 刘关羽,何卫阳,朱鑫,杨帆,黄小龙,印胡滨,苟欣. 中国病理生理杂志. 2015(12)
[4]胆汁淤积性肝病诊断和治疗共识（2015）[J]. 陈成伟,成军,窦晓光,段钟平,范建高,傅青春,高春芳,韩涛,韩英,侯金林,胡和平,胡锡琪,黄建荣,贾继东,刘玉兰,陆伦根,马雄,茅益民,南月敏,牛俊奇,邱德凯,任红,尚佳,唐红,王贵强,王建设,王吉耀,王磊,王宇明,魏来,谢青,谢渭芬,许建明,徐铭益,徐小元,杨长青,杨云生,尤红,曾民德,张文宏,张跃新,庄辉,周新民,邹晓平. 临床肝胆病杂志. 2015(12)
[5]胆汁酸代谢与胆固醇结石病[J]. 蔡强,韩天权,蒋兆彦. 上海医药. 2015(18)
[6]先天性胆道闭锁的病因研究进展[J]. 郭振亚,张若岩,柳明江,杜晓宏,张平,王广义,叶军锋. 临床肝胆病杂志. 2015(08)
[7]Importance of the stem cell microenvironment for ophthalmological cell-based therapy[J]. Peng-Xia Wan,Bo-Wen Wang,Zhi-Chong Wang. World Journal of Stem Cells. 2015(02)
[8]aFGF、HGF体外诱导小鼠ESC向肝细胞定向分化及标志物研究[J]. 应佳丽,王雪玲,范丽娇,张少艳. 胃肠病学和肝病学杂志. 2014(11)
[9]HGF/c-Met相关信号通路在大鼠肝脏祖细胞增殖中的作用[J]. 臧金锋,袁寅,高军业,钱海鑫. 中国老年学杂志. 2014(10)
[10]氧化应激在胆汁淤积性肝损伤中的作用及抗氧化治疗研究进展[J]. 王贵阳,李可为. 中国现代普通外科进展. 2014(01)
博士论文
[1]骨髓间充质干细胞移植修复慢性期脊髓损伤的基础研究和转化探索[D]. 张超.天津医科大学 2016
[2]骨髓间充质干细胞和造血干细胞的体内示踪及其促进肝损伤修复的对比研究[D]. 李强.第四军医大学 2013
[3]自体骨髓间充质干细胞移植促进肝硬化肝脏门静脉栓塞剩余肝脏再生的研究[D]. 李廷军.第三军医大学 2013
硕士论文
[1]胚胎干细胞疫苗和肝脏干细胞疫苗对预防和治疗小鼠皮下肝癌移植瘤的对比研究[D]. 郑毅超.福建医科大学 2014
[2]胆盐（GCDA）对肝细胞增殖与凋亡影响及其分子机制研究[D]. 王宁.中南大学 2013
[3]IGF-1、bFGF及TGFα对人表皮干细胞增殖的影响[D]. 陈建国.南京大学 2012
[4]疏水性胆汁酸致新生鼠肝线粒体活性氧产生与膜通透性转换的实验研究[D]. 张秉宜.苏州大学 2007
本文编号：3344234
【文章来源】：重庆医科大学重庆市
【文章页数】：69 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
不同浓度不同时间点GCDC处理HP14-19细胞后的抑制率
重庆医科大学硕士研究生学位论文图 2 结晶紫染色检测 GCDC 处理 HP14-19 细胞的克隆形成Figure 2 Crystal violet staining for detection of colony formation of GCDC-treated HP14-19cells3.3 细胞流式检测 HP14-19 细胞的凋亡细胞流式 Annexin V FITC/PI 双染结果显示：600μmol/LGCDC 处理 HP14-19细胞 24 h 后，与对照组相比，处理组的细胞凋亡率高于对照组，差异具有统计学意义（P<0.05）。
图 4 DAPI 染色检测 GCDC 处理 HP14-19 细胞 24h 后的细胞凋亡Fig.4 Detection of apoptosis in HPDC-14-19 cells treated with GCDC for 24h by DAPI staining3.5 Western-blot 检测凋亡信号通路相关蛋白的表达图 5 Western-blot 检测 GCDC 处理 HP14-19 细胞后凋亡蛋白 Caspase-3、Bax 及 Bcl-2 的表达Fig. 5 Western-blot detected expressions of apoptosis proteins Caspase-3, Bax and Bcl-2 after
【参考文献】：
期刊论文
[1]Human hepatocytes loaded in 3D bioprinting generate mini-liver[J]. Cheng Zhong,Hai-Yang Xie,Lin Zhou,Xiao Xu,Shu-Sen Zheng. Hepatobiliary & Pancreatic Diseases International. 2016(05)
[2]胆道闭锁Kasai术后早期并发症的研究[J]. 叶晓烁,吴宙光,王建尧. 中国实用医药. 2016(19)
[3]氧化应激诱导自噬对骨髓间充质干细胞增殖与凋亡的影响[J]. 刘关羽,何卫阳,朱鑫,杨帆,黄小龙,印胡滨,苟欣. 中国病理生理杂志. 2015(12)
[4]胆汁淤积性肝病诊断和治疗共识（2015）[J]. 陈成伟,成军,窦晓光,段钟平,范建高,傅青春,高春芳,韩涛,韩英,侯金林,胡和平,胡锡琪,黄建荣,贾继东,刘玉兰,陆伦根,马雄,茅益民,南月敏,牛俊奇,邱德凯,任红,尚佳,唐红,王贵强,王建设,王吉耀,王磊,王宇明,魏来,谢青,谢渭芬,许建明,徐铭益,徐小元,杨长青,杨云生,尤红,曾民德,张文宏,张跃新,庄辉,周新民,邹晓平. 临床肝胆病杂志. 2015(12)
[5]胆汁酸代谢与胆固醇结石病[J]. 蔡强,韩天权,蒋兆彦. 上海医药. 2015(18)
[6]先天性胆道闭锁的病因研究进展[J]. 郭振亚,张若岩,柳明江,杜晓宏,张平,王广义,叶军锋. 临床肝胆病杂志. 2015(08)
[7]Importance of the stem cell microenvironment for ophthalmological cell-based therapy[J]. Peng-Xia Wan,Bo-Wen Wang,Zhi-Chong Wang. World Journal of Stem Cells. 2015(02)
[8]aFGF、HGF体外诱导小鼠ESC向肝细胞定向分化及标志物研究[J]. 应佳丽,王雪玲,范丽娇,张少艳. 胃肠病学和肝病学杂志. 2014(11)
[9]HGF/c-Met相关信号通路在大鼠肝脏祖细胞增殖中的作用[J]. 臧金锋,袁寅,高军业,钱海鑫. 中国老年学杂志. 2014(10)
[10]氧化应激在胆汁淤积性肝损伤中的作用及抗氧化治疗研究进展[J]. 王贵阳,李可为. 中国现代普通外科进展. 2014(01)
博士论文
[1]骨髓间充质干细胞移植修复慢性期脊髓损伤的基础研究和转化探索[D]. 张超.天津医科大学 2016
[2]骨髓间充质干细胞和造血干细胞的体内示踪及其促进肝损伤修复的对比研究[D]. 李强.第四军医大学 2013
[3]自体骨髓间充质干细胞移植促进肝硬化肝脏门静脉栓塞剩余肝脏再生的研究[D]. 李廷军.第三军医大学 2013
硕士论文
[1]胚胎干细胞疫苗和肝脏干细胞疫苗对预防和治疗小鼠皮下肝癌移植瘤的对比研究[D]. 郑毅超.福建医科大学 2014
[2]胆盐（GCDA）对肝细胞增殖与凋亡影响及其分子机制研究[D]. 王宁.中南大学 2013
[3]IGF-1、bFGF及TGFα对人表皮干细胞增殖的影响[D]. 陈建国.南京大学 2012
[4]疏水性胆汁酸致新生鼠肝线粒体活性氧产生与膜通透性转换的实验研究[D]. 张秉宜.苏州大学 2007
本文编号：3344234
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