含有ADV耐药突变的HBV聚合酶RT区的原核表达及耐药检测研究

发布时间：2021-09-03 02:57

　　背景乙型肝炎病毒（Hepatitis B virus，HBV）是一种嗜肝DNA病毒，其感染仍是世界范围内慢性肝炎、肝硬化、肝癌的主要成因，严重危害人类健康[1]，而治疗慢性乙型肝炎的首要目标是持久抑制病毒的复制。阿德福韦酯（Adefovir，ADV）是目前被批准治疗慢性乙型肝炎的一种核苷类似物药物，通过抑制HBV聚合酶（HBV Polymerase，HBV-Pol）的活性来抑制病毒复制，但是长期治疗会发生耐药导致治疗失败[2]。HBV聚合酶主要分成四个结构域：N末端蛋白区（TP），间隔区（SD），逆转录酶区（Reverse Transcriptase，RT），核糖核酸酶（RNaseH）区^[3]。该蛋白同时具有DNA聚合酶和RNaseH酶活性，直接参与了HBV基因组的复制。HBV繁殖速度快，但其DNA聚合酶缺乏纠错能力，复制过程中有大量突变发生，使得药物与HBV聚合酶的亲和力下降，进而导致药物抑制病毒复制的作用明显减弱[4,5]，其中HBV聚合酶RT区域的rtN236T和rtAl81T/V变异是与阿德福韦耐药有关的常见变异位点[6,7]。临床研究发现，一些患者在长期... 

【文章来源】：重庆医科大学重庆市

【文章页数】：76 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

-1HBV聚合酶RT区域PCR扩增Fig.2.1-1HBVpolymeraseRTPCRamplification

-2重组质粒SUMO-RTWTPCR筛选Fig.2.1-2ColoniesselectionusingPCR

-3HBV聚合酶RT区域的PCR扩增和重组质粒的酶切鉴定Fig.2.1-3PCRproductsofHBVRTdomainanddigestionofrecombinantplasmid

【参考文献】：
期刊论文
[1]Structural Characteristics and Molecular Mechanism of Hepatitis B Virus Reverse Transcriptase[J]. Hui FENG and Kang-hong HU (State Key Laboratory of Virology, Wuhan Institute of Virology, Chinese Academy of Sciences, Wuhan 430071, China).  Virologica Sinica. 2009(06)
[2]HBV聚合酶研究进展[J]. 韩聚强,胡大荣,叶棋浓.  肝脏. 2008(03)
[3]第三代反义核酸技术—肽核酸[J]. 谢勇恩.  川北医学院学报. 2007(04)
[4]Hepatitis B virus replication[J]. Juergen Beck,Michael Nassal.  World Journal of Gastroenterology. 2007(01)
[5]肽核酸生物传感器直接检测临床标本中提取的病毒基因组DNA[J]. 陈鸣,府伟灵,蔡国儒,刘明华,张波,蒋天伦,陈庆海,秦廷辉.  中华医院感染学杂志. 2003(07)



本文编号：3380261