小鼠胎肝Sca-1～+细胞及人胎肝CD34～+细胞向神经组织细胞分化研究

发布时间：2021-10-01 04:49

　　目的： 了解胎肝干细胞在体内外是否具有向神经组织细胞分化的潜能，即可塑性，以进一步探索其分化规律；建立胎肝来源的细胞在体外向神经组织细胞分化模型。 拟从下面三个方面研究：小鼠胎肝Sca-1⁺细胞在体内向神经组织细胞分化研究；体外诱导小鼠胎肝Sca-1⁺细胞向神经组织细胞分化研究；体外诱导人胎肝CD34⁺细胞向神经组织细胞分化研究。 材料方法： 1．观察小鼠胎肝Sca-1⁺细胞移植后在受体鼠脑组织中的分化情况 利用快速的PCR扩增小鼠Y染色体特异的性别决定区蛋白基因（sex determing region protein,Sry）方法鉴定孕14.5d C57BL／6J胎鼠性别（总时间小于3.5h），免疫磁珠法分离雄性胎鼠肝的Sca-1⁺细胞，尾静脉注射Sca-1⁺细胞（2.0×10³个／小鼠）到致死剂量（10.0Gy）放射线照射的8-10周C57BL／6J雌性小鼠（辐射后4h内注射），然后将实验小鼠饲养在... 

【文章来源】：暨南大学广东省 211工程院校

【文章页数】：111 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

小鼠胚胎性别的鉴定A.M为DNA标准分子量，1OObpladderDNAmarkers，1为空白对照(无DNA模

0dsd10d15d20d60d120dtimeaftertransplantation(day)andmale口ale图2.胎肝Sca一1十细胞向造血细胞分化0d为雌性对照外周血DNA，大小与预计扩增工L一3基因片段一致(649bP)，无sry基因扩增。male照外周血DNA，产物DNA为2条带，大小与预计扩增Sry和工L一3基因(444bp、649bp)，sd、10d、15d、20d、60d、120d分别为移植雄性Sea一1‘10、15、20、60、120天后受体雌鼠外周血DNA扩增产物，Sry基因产物致的延长时间而增加，说明雄性胚胎供体来源的细胞在增加。FigureZ，DifferentiationoffetalliverSea一l十eellsintohematopoietiQuantitativeresultsofeleetrophoresis一bandsfromsrygeneProduetsofPgel一imagesystem.‘od’15PCRProductofbloodDNAfromadultfemalemoubandthesize15eonsisteniwithexPectedIL一3gene(649bp).‘Male’15PCRProbloodDNAfromadultmalemouse，twobandstheirsizesareeonsistentwithesrygene(444bp)andIL一3gene(649bp).‘sd，，‘IOd，，‘15d，‘6Od’，and‘120d’arePCRProduetsofbloodDNAfromadultfemalemo10，15，20，60，12od叮5aftertransplantedwithmaleSca一1十cells，respeetiveheightofbarsinereasedwithtimelengthened，andreaehednormallevelofadultwomonths，indieatingthatmalefetalliver-derivedcellsareincreasinhematoPoietiereconstitution.

ficat‘on’oxZo)}B(magn，ficat‘on‘oXZo)图4.免疫组化和FISH检测胚胎肝来源细胞在受体小鼠脑组织内分化:小鼠Y染色体FISH显示雌性受体小鼠脑组织中存在特异cy3红色荧光杂交信号(A，B)，说明有供体来源的细胞:NetlN免疫组化显示部分供体来源的细胞NeuN阳性(A，实箭头所示)(因为NeuN特异表达于神经元核内，所以没有用DAPI染色细胞核);GFAP免疫组化显示部分供体来源的细胞GEAP阳性(B，实箭头所示)。

【参考文献】：
期刊论文
[1]神经干细胞研究进展[J]. 刘泉开.  现代诊断与治疗. 2000(05)



本文编号：3417187