MitoQ保护mtDNA减轻肠缺血/再灌注致肠屏障损伤的作用及机制研究

发布时间：2021-12-24 07:57

　　背景:缺血/再灌注是临床上一项重大地挑战,尤其发生在胃肠道上。肠道是对缺血最敏感的组织器官之一。肠缺血/再灌注（intestinal ischemia reperfusion,I/R）损伤作为外科危急重症,常见于严重的创伤,感染,休克。随着近年来研究的深入,肠道被认为是诱发多功能脏器衰竭的因素。肠缺血/再灌注损伤后,不仅可以引起肠组织的局部损害,而且由于肠屏障功能障碍将会进一步导致细菌和毒素移位到体内循环,引起网状内皮系统发生系列反应,促炎症细胞因子大量释放入血,并进一步在循环系统弥散,导致毒血症、休克等,继而损害肝、肺、肾等多个器官,最终导致患者死亡。近年来,尽管在缺血/再灌注损伤的防治和机制研究中已经取得了很大的进展,但如何有效地预防和减轻缺血/再灌注损伤仍然是临床工作者们面临的重要难题。有研究表明氧化应激和线粒体功能障碍在缺血/再灌注损伤中发挥了重要作用。线粒体DNA（mtDNA）易受到氧化应激损伤。但缺血/再灌注损伤与mtDNA之间的关系尚不明确。MitoQ是目前研究最多和应用最广泛的线粒体靶向抗氧化剂。由TPP+与辅酶Q10的苯醌部分通过一个十碳脂肪链共价结合构成。近年来研究... 

【文章来源】：东南大学江苏省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：43 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图２ＩＥＣ－６细胞Ｔｕｎｅｌ染色??

通过Ｔｉｍｅｌ染色及流式细胞仪检测Ａｎｎｅｘｉｎ－Ｖ／ＰＩ阳性的细胞比率。与对照组相比，??缺氧／复氧处理后的Ｔｕｎｅｌ阳性细胞明显增多（图２），通过流式细胞仪检测Ａｎｎｅｘｍ－Ｖ／ＰＩ??阳性细胞数也明显增多（图３）；而与缺氧／复氧相比，ＭｋｏＱ治疗组Ｔｕｎｅｌ阳性肠上皮细??胞明显减少（图２），流式细胞仪显示Ａｎｎｅｘｉｎ－Ｖ／ＰＩ阳性细胞数也减少（图３）。表明??ＭｉｔｏＱ能抑制缺氧／复氧引起的细胞凋亡。??：＞＼？＼??■■■■■■??■■■■■■??正常纽?ＨＲ?ＭｉｔｏＱ?０．１?ｍＭ＋Ｈ．Ｕ?ＭｉｔｏＱ?０．５?ｊｘＭ＋ＨＲ?ＭｉｔｏＱ?ｌｆｉＭ＋Ｈ＾Ｒ?ＤＴＴ＋ＨＲ??图２ＩＥＣ－６细胞Ｔｕｎｅｌ染色???ｊ?１???１?????Ｐ??！＂？?：?尹???一￣；??Ｖ?ｙ?．＾Ｍ｜ｉｒ??气．３滢?＇?ｎ??＇Ｍ?０?＊Ｊ？?ｎＫ?Ｉ?ＫＭ?０１???．?．Ｊ?？＿＿Ｉ?，?，?１，１，?Ｊ???＾????＿＿＾????????■?Ｉ?，，ｉ，ｙ?．?一?！－？?＇＊？??ｒｔ?ｎｔ＞ｔｉ?”?＊＂?，ｆｌ?ｎｍ?Ｈ?？?ｕ？?＊?？？?ｎ＇ｍ??Ｃｏｎｔｒｏｌ?ＨＲ?ＭｉｔｏＱ?０．１?ｐＭ＋Ｈ?Ｒ????ｊ????ｉｉ????＊ｊ?＃?Ｖ?＾?Ｖ?ｉｊｊｐｆｒ．，．．＇?？??＾ｒ－??ｐ￣￣：??ｐ?Ｍｔ?？—??ｉ?－?＂ｊ??ｊ?｜?？?ｔｎ?＇Ｊ＊?１?？?ｊ＊??￣￣?Ｉ？＿ｉ?？．．．．ｉ．．

通过检测Ｈ９ｃ２细胞中线粒体膜电位及ＡＴＰ水平的变化来反应细胞中线粒体功能的??变化。从结果可以发现与对照组相比，缺氧／复氧后ＩＥＣ－６细胞中线粒体膜电位明显降低??（图），ＡＴＰ水平也显著下降（图４）；而与单纯缺氧／复氧处理后相比，用ＭｉｔｏＱ后预??处理再行缺氧／复氧处理，ＩＥＣ－６细胞线粒体膜电位明显升高，ＡＴＰ含量也明显增多。表??明ＭｈｏＱ能减轻缺氧／复氧引起的ＩＥＣ－６细胞线粒体功能障碍。??０?Ｐ???ｆｌ????＞?ｔ?－??、＜?？？？？＿．．??ＴＴ—Ｊ，?；；?：：＇??￣Ｖ■…＂－，＾?二?＊７；?＾￣?．??Ｃｏｎｔｒｏｌ?ＨＲ?ＭｉｔｏＯ?０．１?ｕＭ＋Ｈ?Ｒ??、ｔ??１?、ｉ?????＊??ｒ?Ｓ＇?ｉ?ｙ??許一—???ｒ＿?＾?：????Ｉ?＊?＾００－＇＇?－?＾ｐｒ??．？？?？?ｔ：?＊＊?＇?＊■??Ｈ＾?－Ｚ＇?ｉ?：：?＾?Ｈ?ｚ＜?？■ｂ￣＾??；ｉ?＊：＂?—７?ｉ－?－?＇；；；??ＭｉｔｏＱ?０．５?ｊｏＭ＋ＨＲ?ＭｉｔｏＱ?ｌ＾ｉＭ＋ＨＲ?ＤＴＴ＋ＨＲ??■Ｍａｆｌｉｌｉ??／、ｗｖ＾??图４?ＡＴＰ水平及ＩＥＣ－６细胞线粒体膜电位水平??４．?ＭｉｔｏＱ减轻肠缺血／再灌注引起的ｍｔＤＮＡ损伤??４．１?ＭｉｔｏＱ对小鼠肠缺血／再灌注后ｍｔＤＮＡ拷贝数及ｉｎｔＤＮＡ基因转录水平的影响??不同组的小鼠进行相应的处理后，ＰＣＲ检测ｍｔＤＮＡ拷贝数及ｍｔＤＮＡ基因转录水??平的变化来反应ｍｔＤＮＡ受损程度。与对照姐相比


本文编号：3550110