大鼠骨髓间充质干细胞对肝星状细胞增殖的影响

发布时间：2022-01-02 23:44

　　目的:通过观察骨髓间充质干细胞（MSC）对肝星状细胞（HSC）细胞周期及调控蛋白表达的影响,进一步探讨MSC对HSC增殖抑制作用的机制。方法:MSC的分离:在无菌条件下分离SD雄性大鼠股骨骨髓,采用贴壁培养法进行MSC培养、纯化和扩增,传代至第4代使用;大鼠肝星状细胞（HSC-T6）和纤维原细胞系冻融后传代使用。应用6孔塑料细胞培养盒,在半透膜（transwell insert）上接种MSC （2×105cells/ well）,在6孔塑料培养板上接种HSC-T6细胞（2×105cells/ well） ,建立上下双层细胞共培养体系,常规培养;实验分3组:①实验组在半透膜上接种大鼠骨髓间充质干细胞,在6孔塑料培养板上接种肝星状细胞,建立上下双层细胞共培养体系;②对照组将大鼠骨髓间充质干细胞更换为成纤维细胞;③空白组仅行肝星状细胞单独培养。以上体系培养观察72 h。每天于倒置相差显微镜下动态观察活体细胞形态学改变;WST-8法检测肝星状细胞生长抑制率,流式细胞仪分析细胞周期,RT-PCR检测肝星状细胞CyclinD1和P27 mRNA的表达,Western blot检测肝星状细胞Cycl... 

【文章来源】：广西医科大学广西壮族自治区

【文章页数】：70 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

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【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3565122