溃疡性结肠炎患者肠道菌群变化及其与IL-23/IL-17轴的关系

发布时间：2022-12-09 21:02

　　背景:溃疡性结肠炎（ulcerate colitis,UC）的病因及发病机制至今仍未完全阐明。目前普遍认为主要由环境因素、遗传易感因素、肠道屏障功能障碍、免疫功能异常等因素相互作用所致,其中慢性炎症反应和免疫应答紊乱是造成UC的关键病理环节,而肠道内菌群紊乱又是造成炎症反应和免疫应答改变的重要因素。目的:探讨溃疡性结肠炎（UC）患者肠道菌群分布和种类的变化及其与IL-23/IL-17轴之间的关系。方法:收集20例UC活动期患者和20例健康对照者的新鲜粪便样本,采用直接涂片镜检和传统细菌培养鉴定法分析菌群分布;利用Real-Time PCR检测目标菌群表达的变化;常规方法检测血红蛋白、白蛋白、血沉、C反应蛋白水平;经结肠镜活检取UC患者正常及病变黏膜组织,进行Mayo评分,Baron分级,HE染色观察组织病理变化;免疫组化、Western blot观察IL-17、IL-23蛋白表达的改变。结果:（1）与对照组比,活动期UC患者菌群失调程度明显升高（P＜0.05）;（2）需氧培养结果表明,活动期UC患者的大肠杆菌菌数较正常人显著降低（P＜0.01）,肠球菌菌数明显增加（P＜0.01）;厌氧... 

【文章页数】：58 页

【学位级别】：硕士

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摘要
ABSTRACT
英文缩略词表
1 前言
2 材料与方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 研究对象
        2.1.2 研究对象的纳入标准
        2.1.3 研究对象的排除标准
    2.2 实验试剂
        2.2.1 细菌涂片及培养相关试剂、耗材
        2.2.2 Real-timePCR试剂及耗材
        2.2.3 Westernblot试剂和耗材
        2.2.4 HE染色、免疫组化试剂和耗材
    2.3 主要仪器及设备
    2.4 主要试剂配制
        2.4.1 不同培养基的配制
        2.4.2 科氏改良法(Kopeloffmodification)革兰染色液
        2.4.3 WesternBlot试剂配制
        2.4.4 免疫组化试剂配制
    2.5 实验方法
        2.5.1 直接涂片镜检和菌群分析
        2.5.2 细菌培养及鉴定
        2.5.3 细菌Real-timePCR荧光定量分析：
        2.5.4 血红蛋白、白蛋白、血沉、C反应蛋白测定
        2.5.5 疾病临床 Mayo 评分、Baron 分级及结肠组织病理学分析
        2.5.6 结肠组织形态学观察(HE染色法)
        2.5.7 免疫组织化学法检测结肠IL-17、IL-23的表达
        2.5.8 Westernblot法检测结肠IL-17、IL-23的表达
3 统计学处理
4 实验结果
    4.1 直接涂片镜检和菌群分析结果
    4.2 细菌培养鉴定结果
    4.3 细菌 Real-Time PCR 荧光定量分析结果
    4.4 血红蛋白、白蛋白、血沉、C反应蛋白水平测定结果
    4.5 疾病临床活动度及组织病理积分
    4.6 结肠IL-17、IL-23的表达及其与病理组织学、肠道菌群的关系
        4.6.1 IL-17、IL-23蛋白表达与定位
        4.6.2 IL-17、IL-23表达与Baron分级及病理组织学积分的相关性
        4.6.3 IL-17、IL-23表达与大肠杆菌、肠球菌、拟杆菌、双歧杆菌、乳酸杆菌荧光定量的相关性分析
5 讨论
6 结论
7 参考文献
致谢
综述
    参考文献
在读期间发表论文


【参考文献】：
期刊论文
[1]Fecal microbiota in pouchitis and ulcerative colitis[J]. Kai-Yu Li,Jian-Lin Wang,Jiang-Peng Wei,Sen-Yang Gao,Ying-Ying Zhang,Li-Tian Wang,Gang Liu.  World Journal of Gastroenterology. 2016(40)
[2]益生菌对炎症性肠病诱导和维持缓解疗效的meta分析[J]. 王霄腾,戴金锋,吕宾.  胃肠病学. 2015(01)
[3]肠道菌群影响宿主行为的研究进展[J]. 罗佳,金锋.  科学通报. 2014(22)
[4]Helicobacter pylori infection and inflammatory bowel disease: Is there a link?[J]. Konstantinos Papamichael,Panagiotis Konstantopoulos,Gerassimos J Mantzaris.  World Journal of Gastroenterology. 2014(21)
[5]肠道菌群失调的研究进展[J]. 刘慧,孙涛.  医学综述. 2014(03)
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[7]溃疡性结肠炎动物模型的研究进展[J]. 罗凤燕,白爱平.  世界华人消化杂志. 2013(07)
[8]溃疡性结肠炎肠道菌群结构ERIC-PCR指纹图谱分析[J]. 吴瑞丽,孙自勤,魏志.  胃肠病学和肝病学杂志. 2012(09)
[9]益生菌对肠道菌群的影响——以Lactobacillus casei Zhang研究为例[J]. 张家超,郭壮,孙志宏,陈卫,张和平.  中国食品学报. 2011(09)
[10]Remission induction and maintenance effect of probiotics on ulcerative colitis: A meta-analysis[J]. Li-Xuan Sang, Bing Chang, Wen-Liang Zhang, Xiao-Mei Wu, Xiao-Hang Li, Min Jiang, Department of Gastroenterology, First Affiliated Hospital, China Medical University, Shenyang 110001, Liaoning Province, China.  World Journal of Gastroenterology. 2010(15)

博士论文
[1]溃疡性结肠炎患者粪便乳杆菌种的研究[D]. 崔熠.中南大学 2012
[2]不同浓度嗜酸乳酸杆菌对急性实验性结肠炎的疗效和结肠菌群的影响及其免疫相关机制研究[D]. 任科雨.中南大学 2010



本文编号：3715370