趋化轴CXCL12-CXCR4/CXCR7在肝硬化脾亢大鼠脾脏组织中的表达及意义

发布时间：2023-05-05 22:12

　　目的：探讨趋化因子CXCL12及其受体CXCR4/CXCR7在肝硬化脾功能亢进大鼠脾脏组织中的表达及意义,为进一步研究肝硬化脾亢脾组织纤维化进程的发生机制提供理论依据。方法：50只雄性SD纯系大鼠,随机分成模型组(n=40)和对照组(n=10)。对照组大鼠采用0.9%生理盐水灌胃。模型组采用40%CCL4花生油溶液灌胃,每周2次,每次0.3ml/100g,15%白酒作为饮用水,共8周制作肝硬化脾功能亢进大鼠模型,共8周。肉眼观察大鼠形态变化,经HE染色、Masson染色,行肝功能检查及血常规验证肝硬化脾功能亢进模型建立成功后,测量脾指数、脾横径及脾长径,Masson三色染色检测脾脏组织纤维化程度,免疫组织化学,Western-blot和qRT-PCR方法检测两组大鼠脾脏组织中趋化因子CXCL12及其受体CXCR4/CXCR7的蛋白及基因的表达水平。正态分布的计量资料以x±s表示,两组间的比较采用独立样本t检验。结果：肝功能变化：模型组大鼠肝功能ALT, AST及TBIL分别为(237.80±105.11)U/L、(685.70±246.47) U/L、(30.04±8.77)μmol/...

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【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
1. 引言
    1.1 肝硬化脾功能亢进的概述
    1.2 肝硬化脾亢并发外周血细胞减少的原因研究进展
        1.2.1 造血功能障碍
        1.2.2 细胞吞噬破坏作用
        1.2.3 免疫功能紊乱
        1.2.4 脾脏的过分阻留
    1.3 趋化因子及趋化因子受体的概述
    1.4 趋化轴CXCL12-CXCR4/CXCR7的概述
        1.4.1 趋化轴CXCL12-CXCR4/CXCR7与组织纤维化的关系
    1.5 本文的研究意义
    1.6 技术路线
2. 材料与方法
    2.1 实验动物
    2.2 实验仪器与设备
    2.3 实验试剂
        2.3.1 肝硬化脾亢模型所需试剂
        2.3.2 HE染色试剂
        2.3.3 Masson三色法试剂
        2.3.4 免疫组化试剂
        2.3.5 Western blot试剂
        2.3.6 RT-PCR试剂
    2.4 实验方法
        2.4.1 肝硬化脾亢模型的建立
        2.4.2 标本的采集与处理
        2.4.3 HE常规染色检测
        2.4.4 Masson三色法检测
        2.4.5 免疫组织化学法检测
        2.4.6 Western blot检测
        2.4.7 RT-PCR检测
        2.4.8 荧光定量PCR反应
        2.4.9 数据处理
    2.5 统计学方法
3. 结果与分析
    3.1 动物模型行为表现
    3.2 肝脾外观形态变化
    3.3 肝脏病理形态学变化
    3.4 脾脏病理形态学变化
    3.5 部分肝功能生化指标变化
    3.6 外周血细胞数量变化
    3.7 脾指数、脾横径及脾长径的变化
    3.8 免疫组化法检测结果
    3.9 蛋白印迹检测结果
    3.10 实时荧光定量PCR检测结果
    3.11 CXCL12、CXCR4、CXCR7三者之间的相关性
    3.12 CXCL12、CXCR4、CXCR7与脾脏胶原纤维面积的相关性
4. 讨论
    4.1 肝硬化脾亢的治疗现状
    4.2 构建肝硬化脾亢模型的方法
    4.3 趋化轴CXCL12-CXCR4/CXCR7在脾脏组织中的表达与意义
5. 结论
参考文献
缩写对照表
附录
致谢



本文编号：3808459