幽门螺杆菌空泡毒素VacA促进胃上皮细胞NLRP3炎性小体激活

发布时间：2023-07-01 11:17

　　目的探究H. pylori空泡毒素VacA对胃上皮细胞NLRP3炎性小体激活的影响。方法采用WT H. pylori26695和△VacA H. pylori26695感染AGS细胞,Western blotting、q RT-PCR、ELISA检测NLRP3、Pro-Caspase-1、Caspase-1、pro-IL-1β和IL-1β的表达。siRNA-NC、siRNA-NLRP3转染AGS后,分别用PBS、WT H. pylori26695和△VacA H. pylori26695刺激,qRT-PCR和细胞因子ELISA检测试剂盒分别检测pro-IL-1β的mRNA表达水平和IL-1β的蛋白表达水平。收集慢性胃炎患者标本,鉴别出H. pylori阳性患者的VacA基因型(s1m1型和s1m2型),通过q RT-PCR检测NLRP3、caspase-1、pro-IL-1β的mRNA表达水平及采用细胞因子ELISA试剂盒检测IL-1β蛋白表达水平。C57BL/6小鼠腹腔注射DMSO或者DMSO+Mcc950,H. pylori菌液灌胃,qRT-PCR和ELISA检测胃组织IL-1β的...

【文章页数】：7 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 主要试剂、菌株、临床样品及细胞来源
    1.2 AGS细胞与H.pylori的培养
    1.3 H.pylori感染胃炎模型的建立及管理
    1.4 AGS细胞的体外感染
    1.5 siRNA-NLRP3转染AGS细胞
    1.6 胃黏膜组织及AGS细胞总RNA提取
    1.7 定量实时聚合酶链反应（qRT-PCR)
    1.8 Western blotting
    1.9 ELISA定量检测
    1.1 0 统计学分析
2 结果
    2.1 慢性胃炎患者中不同VacA基因型患者炎性小体相关分子的表达水平
    2.2 WT H.pylori26695和△VacA H.pylori26695分别作用AGS细胞后炎性小体分子的表达水平
    2.3 WT H.pylori26695和△VacA H.pylori26695分别作用AGS细胞后IL-1β的表达水平
    2.4 siRNA-NLRP3阻断WT H.pylori26695和△VacA H.pylori26695作用AGS细胞后IL-1β的表达
    2.5 Mcc950抑制WT H.pylori26695和△VacA H.pylori26695感染小鼠胃黏膜细胞IL-1β的表达
3 讨论



本文编号：3836154