Kruppel样因子15在大鼠腹膜间皮细胞衰老中的作用及机制

发布时间：2023-07-01 11:14

　　【目的】为了探讨Kruppel样因子15在大鼠腹膜间皮细胞衰老中的作用,本研究以TGF-β1诱导的大鼠腹膜间皮细胞衰老为模型,来观察KLF15的作用和可能的作用机制,我们使用脂质体转染大鼠原代腹膜间皮细胞构建细胞过表达KLF15干预,随后检测各通路分子mRNA和蛋白的表达情况及对细胞衰老的影响。【方法】取SD雄性大鼠肠系膜、脾胃韧带,分离培养原代大鼠腹膜间皮细胞,流式细胞术进行细胞鉴定。传代培养至第三代作为实验对象。构建真核过表达质粒pcDNA3.1-KLF15,分别用脂质体转染质粒pcDNA3.1(空载质粒)和pcDNA3.1-KLF15(过表达质粒)至大鼠腹膜间皮细胞,用Western Blot、Real-Time PCR检测KLF15mRNA和蛋白的表达验证是否成功过表达KLF15。观察TGF-β1干预的不同影响。实验分组:(1)对照组(control组);(2)空载质粒转染组(pcDNA3.1组);(3)KLF15过表达组(pcDNA3.1-KLF15组);(4)TGF-β1处理对照组(control+TGF-β1组);(5)TGF-β1处理空载质粒转染组(pcDNA3.1组+...

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【学位级别】：硕士

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缩略语表
中文摘要
Abstract
前言
实验材料与方法
    1 实验主要试剂和耗材
    2 实验方法
    3 统计学处理
实验结果
    1.原代大鼠腹膜间皮细胞培养及鉴定
    2.大鼠KLF15全长基因质粒pcDNA3.1-KLF15的建构和鉴定
    3.质粒转染后KLF15 mRNA和蛋白的表达情况
    4.TGF-β1刺激后Smad2、Smad3、p21mRNA的表达况
    5.TGF-β1刺激后p-Smad2/3、p21蛋白的表达情况
    6.TGF-β1刺激后细胞衰老β-半乳糖苷酶染色检测细胞衰老情况
讨论
结论
参考文献
综述
    参考文献
致谢



本文编号：3836149