Ascl2通过调节Th17功能参与炎症性肠病发病的机制研究

发布时间：2023-07-01 13:50

　　背景炎症性肠病(Inflammatory Bowel Disease,IBD)是一类常见的胃肠道的慢性炎症性疾病,主要包括克罗恩病(Crohn’s Disease,CD)和溃疡性结肠炎(Ulcerative Colitis,UC)。目前广泛认为Th17细胞在IBD的疾病进展过程中起到了关键的免疫损伤作用,但Th17细胞的功能及分化机制尚不清楚。最近研究证据表明,Ascl2在免疫调节中发挥了重要作用。有文献初步发现Ascl2对Th17细胞有调节作用,因此,Ascl2与Th17细胞功能之间的关系以及Ascl2如何参与IBD的发病机制需要我们进一步研究和探索。目的本研究旨在探究Ascl2如何参与IBD的发病机制,从而为IBD寻找新的治疗靶点。方法首先,通过qRT-PCR检测Ascl2在IBD患者肠黏膜组织中的表达情况。然后,通过细胞培养、慢病毒转染、qRT-PCR、流式细胞术、Elisa检测共同研究Ascl2与Th17细胞功能之间的关系及其作用机制。最后,通过构建实验性小鼠结肠炎模型进一步分析Ascl2在调节肠道炎症中的作用。结果活动期IBD患者肠黏膜组织中Ascl2的表达明显低于正常对照人...

【文章页数】：48 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
英文缩写对照
第一章 绪论
    1.1 CD4⁺T细胞在IBD疾病中的作用
    1.2 Ascl2的研究现状
        1.2.1 Ascl2的结构
        1.2.2 Ascl2在人体正常组织中的定位
        1.2.3 Ascl2的相关研究
    1.3 本论文的主要贡献
    1.4 本论文的结构安排
第二章 实验材料与方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 研究对象
        2.1.2 主要实验仪器
        2.1.3 主要实验试剂
        2.1.4 主要实验试剂配置
    2.2 实验方法
        2.2.1 总RNA提取
        2.2.2 逆转录反应
        2.2.3 实时荧光定量PCR
        2.2.4 分离小鼠脾脏中CD4⁺T细胞
        2.2.5 慢病毒转染CD4⁺T细胞
            2.2.5.1 Lentiviral vector包装
            2.2.5.2 转染CD4⁺T细胞
        2.2.6 将转染的CD4⁺T细胞诱导分化Th17细胞
        2.2.7 流式细胞术
            2.2.7.1 细胞表面染色
            2.2.7.2 细胞内染色
        2.2.8 酶联免疫吸附试验
        2.2.9 统计学分析
第三章 结果
    3.1 Ascl2的表达与IBD患者肠黏膜炎症有负性相关性
    3.2 Ascl2抑制Th17细胞分化并促进IL10的产生
    3.3 Ascl2通过促进Blimp1的表达从而促进Th17细胞产生IL10
    3.4 Ascl2通过抑制肠道Th17分化改善TNBS诱导的结肠炎
    3.5 本章小结
第四章 讨论
    4.1 CD4⁺T细胞具有可塑性
    4.2 Th17细胞的分型
    4.3 IL10的免疫抑制作用
    4.4 IL10信号通路的相关分子
第五章 总结与展望
    5.1 总结
    5.2 展望
致谢
参考文献
攻读硕士学位期间的研究成果



本文编号：3836360