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人KCTD9真核表达质粒及慢病毒表达载体的构建与鉴定

发布时间:2024-04-10 20:28
  背景及目的 我国乙型病毒性肝炎发病率高(约5%),在慢性乙型肝炎基础上诱发的重型肝炎病情尤为凶险,病情进展迅速,病死率较高,可达到70%以上,一直备受临床医生和研究人员的重视。目前内科治疗对于该疾病的作用有限,虽然肝移植是终末期肝病治疗的最终选择,但因我国面临严重的供体短缺、移植价格昂贵等问题而受到临床应用的限制,因此免疫治疗为重型肝炎的治疗提供了新的思路。重型乙型肝炎发病机制复杂,涉及到病毒和宿主双重因素。其中免疫介导的肝细胞损伤中,乙型肝炎病毒(HBV)抗原特异性细胞毒性T细胞(CTL)细胞的作用及机制已经得到较好阐明,而非特异性免疫在其中的作用却尚不明确。本研究室的前期研究首次揭示肝脏自然杀伤细胞(NK细胞)在病毒诱导的肝损伤中发挥至关重要的作用。 本研究室前期通过基因芯片对重症乙型肝炎患者和轻中度慢性乙型肝炎患者的外周血单个核细胞的基因差异表达谱研究,发现离子通道相关基因--potassium channeltetramerisation domain containing9(KCTD9)在慢性乙肝的重症阶段患者的外周血单个核细胞(PBMC)中高度表达,是重型乙型肝炎的一个下调...

【文章页数】:57 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

图2阳性菌落5个,摇菌,菌液分别做PCR后凝胶电泳

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摇菌,菌液分别做PCR后凝胶电泳。图中4bp与2000bp之间有清晰明亮条带。的质粒小提试剂盒提取pcDNA3.1/CT-KCTD9NotI双....


图3pcDNA3.1/CT-GFP载体图谱及其酶切位点

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图4双酶切pcDNA3.1-KCTD9

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华中科技大学硕士学位论酶切产物经凝胶电泳鉴定,可见2条明亮带,一条位于2k1000bp与2000bp之间,表明载体pcDNA3.1/CT-KC....


图6与NCBI文库中KCTD9蛋白氨基酸比对,构建成功pCDNA3.1-hKCTD9的中KCTD9蛋白氨基酸序列比对结果显示第258位氨基酸为同义突变,不会影响蛋白质空

图6与NCBI文库中KCTD9蛋白氨基酸比对,构建成功pCDNA3.1-hKCTD9的中KCTD9蛋白氨基酸序列比对结果显示第258位氨基酸为同义突变,不会影响蛋白质空

华中科技大学硕士学位论文5构建成功pCDNA3.1-hKCTD9的测序。获得的KCTD9基因与NCBI基因文库中KCTD9因比对结果,除第69....



本文编号:3950318

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