腹泻型肠易激综合征患者结肠黏膜蛋白质的筛选与鉴定

发布时间：2024-07-05 18:20

　　[背景与目的]肠易激综合征(irritable bowel syndrome,IBS)是常见的功能性肠病,其发病机制尚不清楚。已提出的有胃肠动力异常,内脏敏感性改变,脑-肠相互作用、神经免疫内分泌失调等机制,但什么细胞及分子参与IBS的机制尚不清楚。细胞或器官功能的异常必然有其物质的基础,蛋白质是生命活动的基础,本研究应用蛋白质组学方法,寻找腹泻型IBS(IBS withdiarrhea,IBS-D)患者和正常人结肠黏膜的差异表达蛋白质,旨在筛选出对IBS-D发病起重要作用的蛋白质,揭示IBS-D的分子机制。 [材料与方法]IBS-D患者5例,诊断均符合功能性胃肠病罗马Ⅲ科研诊断标准,健康志愿者5例为对照组。分别在进行结肠镜检查时,直视下于盲肠及乙状结肠粘膜各活检4块;3块立即置于含0.1%苯甲基磺酰氟的冰盐水中洗净,液氮中保存;1块于福尔马林溶液中固定,石蜡包埋。将两部位液氮标本等量混合,提取组织总蛋白后,进行双向凝胶电泳。采用银染法对凝胶进行显色固定,扫描仪获取图像。使用Image Master 2D Elite软件对图像进行分析,筛选出在IBS-D组表达有明显差异的蛋白质点;选取...

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【学位级别】：博士

【部分图文】：

图1蛋白质点的手工编辑

ImageMasterZD原则上在检测前不对图像作任何处理，在点检测完成后消减背景。(3)匹配匹配是2一DE图像分析中的重要一步。匹配时首先要创建参考凝胶，参考凝胶一般选择一组凝胶中的蛋白点数较多的一张，可以通过改变向量框和搜索框的大小来操纵匹配。由于电泳过程中的一些影响因素的作....

图19(a)IBs一n组10号点(b)正常对照组10号点

图19(a)IBs一n组10号点(b)正常对照组10号点1.2实验仪器及试剂1.2.1仪器:质谱分析仪:电喷雾一四级杆一飞行时间质谱仪(electricsPrayingioquadruploe一timeofflighi一masssPeetromet仃，ESI一Q一TOF一MS)、....

图20检索参数:1号点Q一TOF图

图20检索参数:TyPeofsearehEnzymeFixedmodifieationsVariablemodificationsMassvaluesProteinMassPePtideMassToleraneeFragmentMassToleraneeMax....

图21检索参数:2号点Q一TOF图

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本文编号：4001338