乙型肝炎病毒表型耐药分析方法建立的研究

发布时间：2025-04-01 03:37

　　目前,全世界有大约3.5亿的慢性乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)感染者,我国约有9300万的HBV感染者。HBV慢性感染可以引起慢性乙型肝炎、肝硬化、肝衰竭进而诱发为肝癌。临床上治疗HBV慢性感染的药物主要有:1.α-干扰素(IFN-α);2.核苷(酸)类似物(NA)。α-干扰素主要是通过诱导细胞产生抗病毒蛋白和免疫调节来达到抗病毒的作用。与核苷(酸)类似物相比,α-干扰素治疗应答持续更久,但是α-干扰素治疗慢性乙型肝炎(Chronic hepatitis B,CHB)有效率仍然较低,仅为30%～50% ,且具有副作用多,价格昂贵等缺点,并且有其他因素决定着α-干扰素抗病毒疗效。 核苷(酸)类似物是近些年来临床治疗慢性乙型肝炎患者的重要药物,在体内核苷(酸)类似物可在磷酸激酶作用下形成三磷酸化合物,拮抗HBV所需的天然底物脱氧鸟苷三磷酸(dGTP)。核苷(酸)类似物作用靶点是HBV逆转录酶,其可以在3个环节上抑制HBV逆转录酶的活性,依次是:碱基引导(base priming)、从mRNA前体反转录成负链DNA、HBV DNA正链合成。目前,在我国临床应用的...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图2.1临床检测得到RT区突变基因，巢式PCR

1.16.1分别取出HBsAg、HBeAg检1.16.2将分别吸取每份检测上清50应杯内。1.16.3分别加入酶结合物50μl于H37℃，温浴2h。1.16.4取出反应杯，甩掉液体，用洗1.16.5分别加入显色液A、B各50μ1.16.6加入50....

图2.2临床LAM耐药突变株测序结果

胶回收电泳图M：分子量标准；9077：临床检测得到RT区突变基因，巢式PCR扩增条带。Figure2.1ElectrophoresisofRTmutationinclinicalbyPCRamplificationM：moleculemarker;90....

图2.3RT区突变株定点突变回复为野生型测序

M：moleculemarker;9077:RTmutationinclinicalbyPCRamplification2.2HBVRT区突变株序列测定图：图2.2临床LAM耐药突变株测序结果HBVDNART区LAM耐药突变rtL180M（....

图2.1实时荧光PCR方法检测不同浓度LAM作用下HBV基因组转染细胞的HBVDNA复制

黑色杂质本底）。（5）将胶片在流水下冲洗。（6）收集醋酸纤维膜与胶片一起做标记（日期，样本号）。1.9采用扫描软件读取条带，分析实验结果2结果2.1HBV核心颗粒DNA水平检测，荧光定量PCR检测结果加用不同浓度LAM药物（0μmol/L、0.01μmol/L....

本文编号：4038884