TNF-α及IL-4在实验性慢性末端回肠炎的表达和意义

发布时间：2017-06-23 19:17

  本文关键词：TNF-α及IL-4在实验性慢性末端回肠炎的表达和意义，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的研究肿瘤坏死因子-α(tumour necrosis factor-a,TNF-α)和白介素-4(interleukin-4,IL-4)在慢性末端回肠炎(Chronic Terminal Ileiti, CTI)中的表达水平，探讨TNF-α和IL-4对实验性末端回肠炎的发生、发展及治疗的关系。 方法选择60只雄性SD大鼠随机分为三组：对照组（A）、造模组(B)、缝线组(C)，对照组常规麻醉，造模组采用末端回肠-盲肠吻合术，缝线组在回肠末端仅作手术缝线，分别于第2、8周处死，取大鼠回肠末端，RT-PCR法检测TNF-α mRNA、IL-4mRNA的表达水平。余标本置于4%甲醛中浸泡24小时，对末端回肠组织进行苏木素－伊红（hematoxylin-eosin staining,HE）后，观察其病理学变化，并对其炎症评分（histopathological score, HS）及免疫组织化学染色。 结果 1.一般情况：A组大鼠的被毛有光泽，活动自如，食量正常，粪便呈颗粒样。B组与C组动物在术后第3天均出现精神萎靡、懒动，饮食及体重下降。术后12天开始，各组SD大鼠一般情况开始恢复，但B组SD大鼠的体重在术后2周之前较其他两组恢复慢，但在术后3-8周时三组SD大鼠体重无明显差异（P＞0.05）。 2.末端回肠组织肉眼组织病理学评分：术后2周，B、C组可见组织粘膜充血、水肿，表现为急性炎性反应，两组评分差异无统计学意义（P＞0.05）；术后8周时，B组SD大鼠末端回肠肠管粘连、狭窄，B组与A、C组比较差异有显著性(P0.05)，A、C组回肠末端组织未见明显炎性细胞浸润及结构破坏，两组差异无统计学意义(P＞0.05）。 3、回肠末端组织镜下炎症评分：2周时，B组与C组末端回肠镜下观均可见中性粒细胞浸润， B、C组炎症评分差异有统计学意义(P＜0.05），但C组低于B组(P 0.05)。第8周，B组镜下见大量炎症细胞浸润粘膜及粘膜下层，主要是淋巴细胞，部分粘膜有脱落、糜烂、浅溃疡形成现象。B组与C组相比评分明显增加，8周时B组炎症最为明显时期(P＜0.05）。C组与A组相比差异无显著性(P＞0.05）。B组2至8周大体肉眼观及镜下观炎症评分升高趋势一致。 4、末端回肠组织TNF-α mRNA的表达水平术后2周时，三组SD大鼠末端回肠组织中TNF-α mRNA的表达水平，三组进行比较，总体来说差异有统计学意义(P0.05）。B组最高，较A、C组明显升高(P＜0.05）。在术后8周时，B组中TNF-αmRNA的表达水平明显升高，B组与A、C比较差异有显著性意义(P＜0.05），A组与C组比较差异无统计学意义(P＞0.05）。表明TNF-α在末端回肠炎的发病过程中有明显的促炎作用，并与末端回肠炎性活跃程度呈正相关。 5.免疫组化显示TNF-a阳性表达于细胞浆或者细胞核，呈现棕黄色颗粒，术后2周时，A、B、C组末端回肠组织的TNF-α表达率分别为10.0%,80.0%,70.0%.8周时，A、B、C组末端回肠组织的TNF-α表达率分别为10.0%,90.0%,40.0%.2、8周时，三组进行比较，总体来说有差异。2周时，B、C组中TNF-α表达率均较A组高，8周时，B组中TNF-α表达率较A、C组均高。2周时，B组、C组中TNF-α的平均吸光度值均较A组高，两组比较差异无统计学意义(P0.05），两组与A组比较差异均有统计学意义(P0.05)。8周时，B组吸光值有所升高，但C组明显降低，两组评分比较差异有统计学意义(P0.05），C组与A组比较差异无统计学意义(P0.05） 6、末端回肠组织IL-4的表达水平A组的IL-4mRNA表达水平高于术后2周时的B、C组，且差异有统计学意义(P＜0.05），B组与C组比较差异无统计学意义(P＞0.05）；术后8周时，三组之间差异无统计学意义(P＞0.05）。在免疫组化中，IL-4以胞质和/或胞膜呈棕黄色为阳性，术后2周时，A、B、C组末端回肠组织中IL-4表达率分别为80.0%,30.0%,20.0%.8周时，A、B、C组末端回肠组织中IL-4表达率分别为80.0%,90.0%,70.0%.2、8周时，三组进行比较，总体来说有差异。2周时，A组中IL-4表达率最高，8周时，B、C组IL-4表达率均较2周时升高。2周，三组之间差异有统计学意义(P＜0.05）。2周时， A组IL-4平均吸光度值均较B组、C组高，A与B、C比较差异有统计学意义(P＜0.05）。8周时，三组之间差异无统计学意义(P＞0.05）表明IL-4参与CTI的发病过程。 结论 1、TNF-α在CTI肠组织中高表达，且表达强度与炎症严重程度呈正相关。 2、IL-4在CTI肠组织中表达水平降低，且表达程度与CTI初期急性发展期呈负相关，而后期的变化不显著。 3、TNF-α和IL-4可能参与CTI的发生及发展，IL-4抗炎作用不如TNF-α促炎作用显著。
【关键词】：SD大鼠 慢性末端回肠炎 肿瘤坏死因子-α 白细胞介素-4 RT-PCR 免疫组化
【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R574
【目录】：

• 摘要4-7
• Abstract7-10
• 英文缩略词表10-11
• 前言11-12
• 材料与方法12-19
• 结果19-31
• 讨论31-36
• 结论36-37
• 参考文献37-40
• 综述40-45
• 参考文献43-45
• 研究生期间发表的论文45-46
• 致谢46

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