内源性硫化氢合成酶CBS参与孕期应激诱发成年子代大鼠内脏高敏的分子机制

发布时间：2017-06-29 06:00

  本文关键词：内源性硫化氢合成酶CBS参与孕期应激诱发成年子代大鼠内脏高敏的分子机制，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:功能性消化不良(Functional dyspepsia,FD)是一种以慢性内脏痛和胃肠功能紊乱为特征的功能性疾病,但其内脏痛发生的具体机制尚未明确。越来越多的研究表明孕期慢性不良应激可能会对子代产生长期的影响,从而导致胚胎源性疾病。本实验研究孕期应激(Prenatal Maternal Stress,PMS)是否能诱导成年子代雄性大鼠胃部痛觉高敏、以及内源性硫化氢和电压门控型钠通道在该慢性内脏痛模型中的作用。方法:1.将SD雌性孕鼠分成实验(PMS)组和对照(CON)组两组,PMS组孕鼠从怀孕的第6天开始每天随机经历一种异源型间隙性应激(Heterotypical Intermittent Stress,HIS),直至第22天,从而诱导大鼠的慢性内脏痛过敏模型。子代出生后挑选雄性个体,待其6周后进行胃扩张(Gastric Distention,GD)实验等行为学实验。2.运用western blotting方法检测成年子代雄性大鼠胃特异性DRG T7-T10神经元和胃粘膜中硫化氢合酶胱硫醚-β-合成酶(Cystathionineβ-synthase,CBS)、电压门控型钠通道Nav1.7和Nav1.8亚型的表达。3.腹腔注射CBS拮抗剂AOAA翻转子代雄性大鼠的痛行为反应,并检测胃相关DRG神经元中Nav1.7和Nav1.8的表达。4.检测30例临床FD患者胃粘膜中CBS、Nav1.7和Nav1.8蛋白的表达。结果:1.PMS明显增加成年子代雄性大鼠对胃扩张的痛敏反应,表现为6、8周时EMG振幅显著高于对照组,至第10周和12周时,EMG振幅基本恢复至正常水平。2.与对照组相比,PMS组子代大鼠在第6、8周时胃相关DRG神经元中CBS、Na V1.7、Na V1.8蛋白的表达显著升高(6周时,CBS、Nav1.7和Nav1.8:1.15±0.06 VS0.72±0.08、1.84±0.18 VS 1.07±0.21和1.53±0.06 VS 1.19±0.08;8周时,CBS、Nav1.7和Nav1.8:0.85±0.21 VS 0.31±0.07、1.15±0.05 VS 0.43±0.03和3.06±0.34 VS 1.37±0.32,均*P0.05)。3.PMS组子代大鼠腹腔注射CBS拮抗剂AOAA后明显翻转PMS引起的子代大鼠内脏痛觉反应,并且呈一定的剂量和时间效应关系,观察到最优剂量为5mg/kg。连续7天腹腔注射最优剂量AOAA 5mg/kg后,镇痛作用至少持续24小时。与行为学实验相一致,AOAA可使PMS诱导的胃相关DRG神经元中升高的Nav1.7和Nav1.8蛋白下降(Na V1.7:n=4,0.66±0.077 VS 1.15±0.17,*P0.05;Na V1.8:n=4,0.58±0.11 VS1.78±0.30,*P0.05)。4.在6周时,PMS处理后的子代大鼠的胃粘膜CBS、Nav1.7和Nav1.8的表达与对照组相比较均上调,具有显著性差异(CBS:0.76±0.09 VS 0.46±0.04,*P0.05;Nav1.7和Nav1.8:1.52±0.07 VS 0.62±0.06和1.68±0.09 VS 1.13±0.06,*P0.05,*P0.05)。5.运用Western blotting方法检测发现,与正常对照组相比较,FD患者胃粘膜中CBS、Nav1.7和Nav1.8蛋白的表达明显升高(CBS:n=4,1.03±0.08 VS 0.77±0.07,*P0.05;Nav:n=3,0.95±0.08 VS 0.41±0.01,*P0.05;Nav1.8:n=3,0.79±0.11 VS0.378±0.07,*P0.05)。结论:孕期应激可诱导成年子代雄性大鼠慢性内脏痛觉高敏,并可能通过CBS-H2S信号通路介导电压门控型钠通道Nav1.7和Nav1.8亚型参与功能性消化不良的发生。本研究在一定程度上揭示了功能性消化不良慢性内脏痛产生的分子机制,为胃肠道的功能性疾病可能提供新的治疗措施。
【关键词】：功能性消化不良 内脏痛觉高敏 孕期应激 胱硫醚-β-合成酶 电压门控性钠通道Na_v1.7 Na_v1.8亚型
【学位授予单位】：苏州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R57
【目录】：

• 摘要4-6
• Abstract6-9
• 第一章 引言9-11
• 第二章 材料和方法11-18
• 第三章 实验结果18-27
• 第四章 讨论27-30
• 结论30-31
• 展望31-32
• 参考文献32-37
• 综述37-48
• 参考文献43-48
• 中英文对照缩略词表48-49
• 攻读硕士学位期间公开发表的论文49-50
• 本课题获得的基金资助50-51
• 致谢51-52

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