长爪沙鼠肝星状细胞的分离培养与鉴定

发布时间：2017-07-08 12:19

  本文关键词：长爪沙鼠肝星状细胞的分离培养与鉴定

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【摘要】：目的探索长爪沙鼠稳定、经济的肝星状细胞分离和培养方法,为深入探讨长爪沙鼠肝纤维化的细胞机制提供技术支撑。方法取成年雄性长爪沙鼠,用链蛋白酶、胶原酶及DNA酶体内门静脉灌注消化长爪沙鼠肝脏细胞,经Nycodenz密度梯度离心,分离肝星状细胞。台盼蓝拒染实验鉴定细胞活力,α-SMA,Desmin免疫细胞化学染色鉴定细胞性质。结果肝星状细胞得率为0.5~1×107/肝。肝星状细胞存活率在90%以上。原代培养3 dα-SMA阳性细胞达75%以上,传代培养后,α-SMA,Desmin阳性达100%。结论成功建立了稳定可靠的长爪沙鼠肝星状细胞分离培养方法,为肝脏相关疾病研究和防治药物的开发提供了技术支持。
【作者单位】： 浙江省医学科学院实验动物中心浙江省实验动物与安全性研究重点实验室;
【关键词】： 长爪沙鼠 肝星状细胞 细胞分离 原代培养
【基金】：国家自然科学基金(31301933) 浙江省科技计划项目(2013C37012,2013C37013,2014C27013)
【分类号】：R575
【正文快照】： 。肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC),又称储脂细胞(fat-store cell,FSC)、间质细胞和Ito细胞,主要分布于肝细胞与肝窦内皮细胞之间的窦周隙内(Disse间隙)[1-2]。HSC在肝纤维化的发生发展中具有核心作用,是促进肝纤维化发展的主要因素[3]。静息状态的HSC主要参与维生素A

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本文编号：534543