中和IL-17及受体对DSS诱导小鼠结肠炎的作用

发布时间：2017-07-16 23:04

  本文关键词：中和IL-17及受体对DSS诱导小鼠结肠炎的作用

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【摘要】：[目的与背景]炎症性肠病(IBD,Inflammatory bowel disease)是慢性复发性胃肠道炎性疾病,由溃疡性结肠炎(UC,ulcerative colitis)和克隆恩病(CD,Crohn's disease)构成。近年发现Th17细胞在炎症性肠病的发病机制中起重要的调控作用。因此Th17细胞所其分泌的细胞因子IL-17很有可能成为治疗的潜在靶点。IL-17具有IL-17A和IL-17F两种主要亚型;IL-17的受体主要有IL-17RA和IL-17RC两种亚型。本研究中采用IL-17A、IL-17F的中和抗体阻断IL-17细胞因子;IL-17RA和IL-17RC的中和抗体阻断IL-17的受体。通过对DSS诱导的小鼠结肠炎模型的IL-17在两个层面、4个主要位点的阻断,消除IL-17的炎症效应,削弱Th细胞的作用,并比较得出哪个位点的阻断疗效最佳。以期为炎症性肠病的临床治疗提供新的靶点和方法。[材料与方法]84只C57BL/6J雌性小鼠随机分为7组。正常对照组自由饮水;其余六组小鼠均饮用4%葡聚糖硫酸纳(Dextran sulfate sodium)溶液。DSS组仅饮用4%DSS溶液外不加任何其他刺激;DSS+NS组腹腔内注射生理盐水;IL-17A+DSS组腹腔内注射IL-17A抗体;IL-17F+DSS组腹腔内注射IL-17F抗体;IL-17RA+DSS组腹腔内注射IL-17RA抗体;IL-17RC+DSS组腹腔内注射IL-17RC抗体。腹腔内注射于造模后第2、4、6天给药。7天后处死小鼠。取小鼠血ELISA法检测IL-17A、IL-17F、IL-17RA、IL-17RC的含量。免疫组化及Western Blot法检测小鼠结肠组织IL-17A、IL-17F、IL-17RA、IL-17RC的表达。流式细胞分析检测小鼠血、脾脏、肠系膜淋巴结、肠粘膜固有层中Th1、Tc、Th17、Treg细胞的比侈例。[结果]1.在造模7天中,与正常对照组比较DSS组、DSS+NS组、IL-17A+DSS组、IL-17RA+DSS组、IL-17RC+DSS小鼠的体重下降、疾病活动指数升高(p0.05)。而IL-17F+DSS组小鼠体重也有轻度下降、疾病活动指数也轻度增高,但不如其余DSS组明显。7天后处死小鼠,DSS组、NS+DSS组、IL-17A+DSS组、IL-17RA+DSS组、IL-17RC+DSS组与正常对照组比较小鼠的结肠长度缩短、结肠组织的病理组织学评分增高(p0.01)。而IL-17F+DSS组小鼠结肠长度缩短、结肠组织的病理组织学评分增高程度均低于其余DSS组(p0.01)。2.DSS诱导的实验性结肠炎小鼠与正常对照组相比,结肠组织中的IL-17A、IL-17F、IL-17RA 和 IL-17RC 均明显升高(p0.01)。与 DSS 组比较,给予 IL-17A 抗体、IL-17F抗体、IL-17RA抗体和IL-17RC抗体可分别降低结肠组织中的IL-17A、IL-17F、IL-17RA和IL-17RC的含量(p0.05)。IL-17F抗体可减少DSS诱导的结肠炎小鼠的结肠组织中IL-17A、IL-17F、IL-17RA和IL-17RC的表达。3.与正常对照组相比,DSS诱导的实验性结肠炎小鼠的血、脾脏、肠系膜淋巴结及肠粘膜固有层的Th1细胞、Tc细胞、Th17细胞增多,Treg细胞减少。给予IL-17F抗体可使得Th1细胞、Tc细胞、Th17细胞较模型组减少,Treg细胞较模型组增多。[结论]1.DSS诱导的实验性结肠炎小鼠,其血及结肠组织中IL-17及其受体的表达明显增高。并出现了全身及局部组织T细胞亚群的失衡。2.给予IL-17及受体的抗体,可降低IL-17及受体在外周血及结肠组织中的表达。3.IL-17F抗体可缓解DSS诱导的实验性结肠炎小鼠的临床症状及减轻病理组织学改变。.4.IL-17F抗体可降低实验性结肠炎小鼠的血及结肠组织中IL-17及受体的表达,n少Th17细胞,改善T细胞不同亚群的失衡状态,达到一定程度的治疗效果。
【关键词】：IL-17抗体 IL-17受体 炎症性肠病 葡聚糖硫酸钠 实验性结肠炎
【学位授予单位】：中国人民解放军医学院
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R574.62
【目录】：

• 英文缩略词表5-7
• 中文摘要7-9
• 英文摘要9-12
• 前言12-16
• 第一部分 中和IL-17及受体对DSS诱导小鼠实验性结肠炎的症状、病理学及血中IL-17及受体表达的影响16-36
• 材料16-18
• 方法18-22
• 结果22-32
• 讨论32-36
• 第二部分 中和IL-17及受体对结肠炎小鼠结肠组织中IL-17及受体的表达的影响36-55
• 材料36-40
• 方法40-43
• 结果43-53
• 讨论53-55
• 第三部分 中和IL-17及受体对结肠炎小鼠T细胞亚群影响的研究55-93
• 材料55-57
• 方法57-61
• 结果61-89
• 讨论89-93
• 全文结论93-94
• 参考文献94-102
• 综述102-110
• 参考文献107-110
• 攻读学位期间发表文章情况110-111
• 致谢111

【参考文献】

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1 Akiko Yamada;Rieko Arakaki;Masako Saito;Takaaki Tsunematsu;Yasusei Kudo;Naozumi Ishimaru;;Role of regulatory T cell in the pathogenesis of inflammatory bowel disease[J];World Journal of Gastroenterology;2016年07期

2 Aito Ueno;Abhisek Ghosh;Daniel Hung;Ji Li;Humberto Jijon;;Th17 plasticity and its changes associated with inflammatory bowel disease[J];World Journal of Gastroenterology;2015年43期

3 Danuta Owczarek;Dorota Cibor;Mikolaj K Glowacki;Tomasz Rodacki;Tomasz Mach;;Inflammatory bowel disease:Epidemiology,pathology and risk factors for hypercoagulability[J];World Journal of Gastroenterology;2014年01期

4 Tiago Nunes;Gionata Fiorino;Silvio Danese;Miquel Sans;;Familial aggregation in inflammatory bowel disease:Is it genes or environment?[J];World Journal of Gastroenterology;2011年22期

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本文编号：550901