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高压氧调控急性重症胰腺炎大鼠脾细胞凋亡的实验研究

发布时间:2017-07-19 05:00

  本文关键词:高压氧调控急性重症胰腺炎大鼠脾细胞凋亡的实验研究


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【摘要】:目的探讨高压氧治疗对急性重症胰腺炎大鼠脾细胞凋亡的影响,研究其发生机制,并为合理开展相关临床治疗提供理论依据。方法首先选取45只SD雄性大鼠,随机分为3组,即正常对照组(5只)、假手术(sham)组(20只)、急性重症胰腺炎(SAP)组(20只),其中sham组只进行单纯的开关腹术,SAP组均采用逆行胆胰管注射牛磺胆酸钠的方法制备胰腺炎模型,sham组和SAP组各分为4个亚组,每组5只,分别在术后3h、6h、12h和24h处死。检测正常对照组和各模型组大鼠血淀粉酶,并用Western blot方法检测所提取的各组脾组织蛋白中Bax和Bcl-2的表达量,Bax在急性重症胰腺炎各亚组中表达以6h组最高,之后降低;Bcl-2表达呈递减趋势,故选取SAP-6h组为HBO干预组;再选取30只SD雄性大鼠,随机分为急性重症胰腺炎高压氧治疗(SAP-HBO)组(15只)和急性重症胰腺炎6h(SAP-6h)组(15只),其中SAP-HBO组于造模成功后1h内给予高压氧治疗(压力为2ATA,氧浓度98%,治疗时间为1h),分别于造模后6h处死SAP-HBO组和SAP-6h组。计算各组大鼠腹水量;HE染色观察胰腺组织病理变化;Western blot方法检测所提取的各组脾组织蛋白中Bax和Bcl-2的表达量;采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的标记染色法(TUNEL法)检测脾脏细胞的凋亡,计算凋亡指数(AI)。结果1.SAP-HBO组Bax表达明显低于SAP-6h组;SAP-HBO组Bcl-2表达明显高于SAP-6h组;2.SAP-HBO组凋亡指数(30.072±1.143)明显低于SAP-6h组(58.440±1.263);3.SAP-6h组胰腺组织标本可见明显出血坏死,大量炎细胞浸润,而SAP-HBO组胰腺组织标本出血坏死及炎细胞浸润情况轻于SAP-6h组;4.SAP-HBO组腹水量(6.200±0.960ml)明显低于SAP-6h组(11.033±1.187 ml)。结论SAP时,高压氧治疗可能通过增强抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,抑制促凋亡蛋白Bax的表达来抑制脾细胞的凋亡,减少免疫细胞的耗竭,调控机体免疫功能状态,保持机体免疫平衡,以此改善急性重症胰腺炎。
【关键词】:急性重症胰腺炎 高压氧 Bax/Bcl-2 脾细胞 凋亡
【学位授予单位】:华北理工大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2015
【分类号】:R576
【目录】:
  • 摘要4-5
  • Abstract5-8
  • 英文缩略表8-10
  • 引言10-11
  • 第1章 实验研究11-31
  • 1.1 材料与方法11-13
  • 1.1.1 材料11-13
  • 1.2 方法13-19
  • 1.2.1 实验动物分组13
  • 1.2.2 动物模型制备13
  • 1.2.3 高压氧治疗方案13-14
  • 1.2.4 取材14-15
  • 1.2.5 苏木-伊红(hematoxylin eosin,,HE)染色15
  • 1.2.6 Tunel法检测细胞凋亡15-17
  • 1.2.7 Western blot法17-19
  • 1.2.8 统计学分析19
  • 1.3 结果19-25
  • 1.3.1 首批大鼠各组血清淀粉酶变化19-20
  • 1.3.2 首批大鼠各组脾脏Bax和Bcl-2 表达情况20-21
  • 1.3.3 HBO治疗对SAP大鼠的影响21-25
  • 1.4 讨论25-28
  • 1.5 小结28
  • 参考文献28-31
  • 第2章 综述31-42
  • 2.1 高压氧治疗在急性重症胰腺炎时对体内各脏器微循环的影响31-33
  • 2.2 高压氧治疗在急性重症胰腺炎时对体内炎症细胞因子及炎症介质的影响33-34
  • 2.3 高压氧治疗在急性重症胰腺炎时对免疫功能的影响34-35
  • 2.4 HBO在SAP时对肠屏障功能的影响35-36
  • 2.5 HBO在SAP时对肺功能的影响36-37
  • 2.6 小结与展望37-38
  • 参考文献38-42
  • 结论42-43
  • 致谢43-44
  • 导师简介44-45
  • 作者简介45-46
  • 学位论文数据集46

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前3条

1 周业江;熊玉霞;周彤;范伟;伍晓汀;;Cyclooxygenase-2在急性胰腺炎大鼠肺微循环障碍中的作用[J];四川大学学报(医学版);2007年02期

2 严际慎,成雨,罗建飞,余莉;脾脏在急性胰腺炎中作用的实验研究[J];中华肝胆外科杂志;2005年05期

3 傅强;崔乃强;邵伟;曾宪民;崔乃杰;;急性出血坏死性胰腺炎小鼠辅助性T细胞亚群1/2的变化规律及中药干预作用研究[J];中国中西医结合急救杂志;2006年04期

中国博士学位论文全文数据库 前1条

1 陈涵;氢水和高压氧预处理对肠缺血再灌注损伤保护作用的研究[D];第二军医大学;2010年



本文编号:561243

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