PNPLA3基因多态性与乙型肝炎病毒相关性肝细胞癌的相关性及其机制研究

发布时间：2017-07-29 19:32

  本文关键词：PNPLA3基因多态性与乙型肝炎病毒相关性肝细胞癌的相关性及其机制研究

  更多相关文章： PNPLA3 基因多态性 肝细胞癌 Hep G2.2.15

【摘要】：肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)个体之间发病率及疾病进程的不同,提示遗传因素在HCC发生发展过程中至关重要。目前有研究证实PNPLA3rs738409[G](编码:I148M)位点多态性和许多疾病所致的HCC相关联,但是PNPLA3 I148M基因多态性是否是导致HCC的独立因素,如何引起肝脏损伤的机理目前仍不明确。本课题通过人群水平、细胞水平及分子水平系统地探讨了PNPLA3 rs738409多态性位点对HCC的作用及可能的作用机制,以期验证PNPLA3 rs738409多态性位点与青岛汉族人群中乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)相关HCC的相关性,进而阐明此多态性及相关的遗传因素对HBV相关性HCC患者的影响。首先,本文在人群水平研究了青岛地区汉族人群中PNPLA3 I148M基因多态性与HBV相关性HCC的相关性。临床收集了230例HBV相关性HCC患者及219例慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)患者的血液样本并进行PNPLA3基因型检测及相关分析,同时选取254例健康人群作为对照组,同时进行相关检测。结果提示,PNPLA3 rs738409 G等位基因的频率分布在HCC组为24.3%,CHB组为12.8%,健康对照组为7.17%,各组间比较时均有明显差异(P0.05)。非条件Logistic回归分析显示,与携带CC基因的人群相比,携带G基因的人群发生HCC的比值比(OR)是3.974(95%CI:2.712-5.824,P=0.000),发生CHB的OR为1.700(95%CI:1.179-2.451,P=0.004)。调整性别、年龄因素后,发生HCC的OR为4.099(95%CI:2.783-6.036,P=0.000),发生CHB的OR为1.709(95%CI:1.182-2.471,P=0.004)。HCC组中,血清谷草转氨酶、谷丙转氨酶、总胆红素、总胆固醇、总胆汁酸水平在突变型基因组高于野生型CC基因组(P0.05)。CHB组中,血清谷草转氨酶、谷丙转氨酶、甘油三酯、总胆固醇、总胆汁酸水平在突变型基因组高于野生型CC基因组(P0.05)。上述的结果提示,青岛的汉族人群中,PNPLA3 rs738409[G]I148M基因多态性与HCC及CHB的发生发展相关,与肝脏损伤相关。其次,本文通过体外实验,在细胞和分子水平对PNPLA3 I148M的作用机制进行探讨。在成功构建PNPLA3野生型及I148M突变型慢病毒过表达载体后分别转染肝癌细胞株Hep G2.2.15,对HBV DNA表达量、促炎因子IL-8及抑癌基因p53在m RNA及蛋白水平的表达差异分别进行检测。研究结果显示PNPLA3蛋白在野生型及突变型中都表现为过表达。PNPLA3 I148M突变组HBV DNA病毒载量及IL-8表达高于对照组及野生型组,但无统计学差异(P0.05),提示PNPLA3I148M对HBV病毒载量和IL-8表达无显著性影响。然而p53的表达在m RNA及蛋白水平均显著升高。研究结果提示,PNPLA3 I148M基因多态性可通过调节抑癌基因p53的表达对肝癌细胞产生影响。更为深入的作用机制则需要进一步的研究探讨,从而为日后开展HBV防治的个体化精准医疗提供基础数据支持。
【关键词】：PNPLA3 基因多态性 肝细胞癌 Hep G2.2.15
【学位授予单位】：青岛大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R735.7;R512.62
【目录】：

• 中文摘要2-4
• Abstract4-8
• 第一章 PNPLA3 I148M基因多态性与乙型肝炎病毒相关性肝细胞癌的相关性研究8-40
• 引言8-10
• 第一节 试验资料和方法10-20
• 1.1 受试者10-13
• 1.2 设备和仪器13-14
• 1.3 分子生物学相关试剂14
• 1.4 试验步骤14-17
• 1.5 统计分析17-19
• 1.6 试验的路线图19-20
• 第二节 结果20-30
• 2.1 一般特征比较20
• 2.2 各项生化指标的比较20-22
• 2.3 肝细胞癌及慢性乙型肝炎与PNPLA3 I148M基因多态性的相关性分析22-30
• 第三节 讨论30-35
• 3.1 全基因组关联分析与肝细胞癌的发病机制30-32
• 3.2 肝细胞癌与PNPLA3 I148M基因多态性的关系32-34
• 3.3 目前存在的问题与未来的展望34-35
• 第四节 结论35-36
• 参考文献36-40
• 第二章 PNPLA3 I148M基因多态性在体外培养肝细胞中的作用研究40-69
• 引言40-41
• 第一节 实验资料41-45
• 1.1 质粒、菌株、细胞和主要试剂41-42
• 1.2 实验仪器与设备42-43
• 1.3 试剂的配制43-45
• 第二节 方法45-54
• 2.1 人肝癌细胞株Hep G2.2.15的培养45-46
• 2.2 慢病毒载体构建46-49
• 2.3 慢病毒包装49-50
• 2.4 慢病毒感染Hep G2.2.15细胞50
• 2.5 检测细胞上清液中HBV的量50-51
• 2.6 RT-PCR检测PNPLA3、炎症因子、凋亡因子的mRNA量51-52
• 2.7 Western blot检测PNPLA3蛋白、炎症因子、凋亡因子过表达52-54
• 第三节 结果54-63
• 第四节 讨论63-65
• 第五节 结论65-66
• 参考文献66-69
• 结论69-70
• 文献综述70-98
• 1 PNPLA3概述71-72
• 2 PNPLA3功能鉴定及结构特征72-73
• 3 PNPLA3的生物学特征73-76
• 4 PNPLA3与肝脏损伤及肝纤维化76-79
• 5 PNPLA3与肝细胞癌79-84
• 6 PNPLA3 I148M基因多态性的作用与种族及性别的关系84-85
• 7 PNPLA3的分子研究85-86
• 8 总结86-87
• 参考文献87-98
• 攻读学位期间的研究成果98-99
• 致谢99-100

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8 贾克东;;肝细胞癌的诊断进展及治疗现状[A];全国中西医结合肝病新进展讲习班、江西省第二次中西医结合肝病学术会议资料汇编[C];2010年

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