自身免疫性肝病Kupffer细胞抗原呈递分子的表达变化
本文关键词:自身免疫性肝病Kupffer细胞抗原呈递分子的表达变化
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【摘要】:目的:肝脏kupffer细胞抗原呈递功能的变化在自身免疫性肝病(autoimmune liver disease,ALD)的发病机制中占有重要位置,本文拟探讨肝脏kupffer细胞抗原呈递分子的表达在自身免疫性肝病中的变化情况。首先观察肝穿组织CD40/CD68、CD80/CD68、HLA-DR/CD68免疫荧光共定位染色的情况,明确抗原呈递分子CD40、CD80、HLA-DR均在肝脏kupffer细胞上表达,进而比较肝穿组织中CD40、HLA-DR免疫组化染色结果,探索其在自身免疫性肝病中的表达情况,并探讨CD40、HLA-DR是否具有相关性。最后分析CD40、HLA-DR与肝功能、凝血功能等化验结果的关系,揭示肝脏kupffer细胞抗原呈递分子的表达在自身免疫性肝病发病机制中的作用。方法:(1)选择2010年1月至2015年6月在天津市总医院消化内科就诊并行肝穿检查的患者,按照自身免疫性肝炎(autoimmunehepatitis,AIH)、原发性胆汁性胆管炎(primary biliary cholangitis,PBC)、PBC-AIH重叠综合征(PBC-AIH Overlap syndrome,PBC-AIH OS)的诊断标准进行分组,并将酒精性肝病、脂肪肝、慢性病毒性肝炎作为非自身免疫性肝病患者组用于对照(以下简称为非自免肝组),并记录入选患者的血生化、凝血功能等检查结果。(2)对入选患者肝穿的冰冻切片分别进行CD40/CD68、CD80/CD68、HLA-DR/CD68免疫荧光共定位染色,观察CD40、CD80、HLA-DR在肝脏组织中的表达情况。(3)对入选患者肝穿的石蜡切片分别进行CD40、HLA-DR免疫组化染色,随机选取10个高倍镜视野(400倍),统计CD40+kupffer细胞及HLA-DR+kupffer细胞的数量,取均值,利用方差分析进行组间比较。(4)将CD40、HLA-DR的免疫组化结果进行相关性比较。(5)将CD40、HLA-DR的免疫组化结果与肝功能、凝血功能等生化指标进行相关性分析。结果:(1)免疫荧光双染结果显示CD40、CD80、HLA-DR均在肝脏CD68+kup ffer细胞上表达。(2)免疫组化试验中,CD40在自身免疫性肝病组的阳性细胞数低于对照组。CD40免疫组化阳性产物呈棕褐色或棕黄色颗粒状着色,主要位于细胞膜,少部分位于细胞质。分别计算自身免疫性肝炎、原发性胆汁性胆管炎和非自身免疫性肝病3组肝穿标本中的CD40阳性的kupffer细胞数绝对值,结果显示:3组间CD40阳性的kupffer细胞的计数绝对值比较具有统计学意义(P=0.04,P0.05)。AIH与PBC组比较无统计学差异(P=0.428,P0.05);AIH与非自免肝组比较具有统计学意义(P=0.02,P0.05)(3)免疫组化中,HLA-DR在自身免疫性肝病组的阳性细胞数低于对照组,HLA-DR免疫组化染色阳性产物呈棕褐色颗粒,主要位于细胞膜。分别统计AIH、PBC和非自身免疫性肝病3组的HLA-DR阳性的kupffer细胞计数的绝对值,结果显示3组比较其结果具有统计学意义(P=0.015,P0.05),AIH与非自身免疫性肝病组比较具有统计学意义(P=0.017,P0.05),(4)CD40与HLA-DR进行相关性分析,结果显示呈正相关。(5)CD40、HLA-DR结果与肝功能、凝血功能化验检查结果进行相关性分析,结果显示CD40、HLA-DR与AIH患者的谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)具有相关性。结论:(1)CD40、HLA-DR、CD80主要在肝脏kupffer细胞上表达,抗原呈递分子的变化可能引起抗原呈递功能的改变。(2)自身免疫性肝病患者组的肝穿石蜡切片免疫组化染色显示CD40及HLA-DR表达较非自身免疫性肝病组数量减少,且CD40、HLA-DR与自身免疫性肝炎的ALT、AST变化相关,提示自身免疫性肝病可能存在kupffer细胞抗原呈递功能减弱,是导致自身免疫性肝病肝损害的原因之一。
【关键词】:自身免疫性肝病 kupffer细胞 抗原呈递 抗原呈递分子 自身免疫
【学位授予单位】:天津医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:R575
【目录】:
- 中文摘要4-6
- Abstract6-10
- 缩略语/符号说明10-12
- 前言12-16
- 研究现状、成果12-15
- 研究目的、方法15-16
- 一、自身免疫性肝病患者肝穿组织免疫荧光染色观察kupffer细胞CD40、CD80、HLA-DR的表达情况16-27
- 1.试验对象和方法16-22
- 1.1 试验对象16
- 1.2 诊断标准16
- 1.3 主要试剂及试验方法16-22
- 1.3.1 CD40、CD68免疫荧光染色16-18
- 1.3.2 CD80、CD68免疫荧光染色18-20
- 1.3.3 HLA-DR、CD68免疫荧光染色20-22
- 2.结果22-24
- 2.1 CD40、CD68免疫荧光染色结果22
- 2.2 CD80、CD68免疫荧光染色结果22-23
- 2.3 HLA-DR、CD68免疫荧光染色结果23-24
- 3.讨论24-26
- 4.小结26-27
- 二、自身免疫性肝病肝组织免疫组化CD40、HLA-DR的表达27-44
- 1.试验对象和方法27-34
- 1.1 试验对象27-28
- 1.2 诊断标准28-29
- 1.3 主要试剂及试验方法29-34
- 1.3.1 CD40染色29-32
- 1.3.2 HLA-DR染色32-34
- 1.4 试验结果判断方法34
- 1.5 统计学方法34
- 2.结果34-40
- 2.1 CD40在自身免疫性肝炎、原发性胆汁性胆管炎、PBS-AIH重叠综合征及非自身免疫性肝病患者的表达34-36
- 2.1.1 自身免疫性肝病的肝脏标本HE染色的特点34-35
- 2.1.2 CD40在肝脏组织中的表达35-36
- 2.2 HLA-DR在自身免疫性肝炎、原发性胆汁性胆管炎、PBS-AIH重叠综合征及非自身免疫性肝病患者的表达36-38
- 2.3 CD40与HLA-DR的相关性分析38
- 2.4 CD40与HLA-DR在自身免疫性肝病患者的临床化验因素的关系38-40
- 3.讨论40-42
- 4.小结42-44
- 结论44-45
- 参考文献45-49
- 发表论文和参加科研情况说明49-50
- 综述50-58
- 综述参考文献55-58
- 致谢58-59
- 个人简历59
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3 谢t,
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