鸡尾酒疗法作用肝纤维化大鼠的肝组织定量蛋白质组学研究

发布时间：2017-08-14 10:18

本文关键词：鸡尾酒疗法作用肝纤维化大鼠的肝组织定量蛋白质组学研究

【摘要】：目的：研究EGCG、Taurine 和 Genistein组成的鸡尾酒作用肝纤维化大鼠后,分析和鉴定肝组织中差异表达的蛋白质,探讨鸡尾酒疗法抗肝纤维化作用的蛋白质基础及分子机制,以期为肝纤维化的诊断、治疗和预后寻找可靠的生物标志物并为下一步实验奠定基础。方法：(1)以CCL4诱导大鼠肝纤维化模型,在造模成功后给予鸡尾酒药物治疗,分为中剂量组(牛磺酸100mg/kg+EGCG15mg/kg+三羟基异黄酮10mg/kg)和高剂量组(牛磺酸200mg/kg+EGCG30mg/kg+三羟基异黄酮20mg/kg),用药六周末,处死大鼠,取大鼠肝组织。(2)选取肝右叶相同部位组织经10%甲醛固定,蜡块包埋,HE染色,光学显微镜下应用DMR+Q550图像分析仪进行病理学观察；(3)提取肝组织蛋白,采用同位素iTRAQ试剂标记CCL4模型组及鸡尾酒的中、高剂量组的肝组织全蛋白,经SCX分离和LC-ESI-MS/MS分析后,将得到的质谱数据进行蛋白质数据库搜索鉴定差异表达的蛋白,利用生物信息学方法对差异蛋白进行分析。结果：(1)病理结果显示鸡尾酒疗法各剂量组大鼠肝纤维程度均有不同程度的减轻,肝小叶结构基本完整；(2)以变化倍数大于1.5倍或者小于0.67倍的蛋白为差异表达蛋白的标准,与CCl4模型组相比,鸡尾酒组共鉴定到192种差异蛋白质,其中鸡尾酒中剂量组共发现135个差异表达的蛋白质,55个下调,80个上调；鸡尾酒高剂量组共发现125个差异表达的蛋白质,36个下调,89个上调。在两个给药剂量组与CC14模型组的比值中上、下调一致的差异蛋白共68个,同时上调的蛋白46个,同时下调的蛋白22个。通过对这些差异蛋白分别进行GO、pathway和蛋白互作分析发现其参与翻译后修饰、转录、重组和信号传导通路等过程。结论：牛磺酸、EGCG和三羟基异黄酮组成的鸡尾酒药物作用肝纤维化的SD大鼠后,大鼠肝组织中参与重要生物信号途径的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶、Ras相关蛋白、Vit A结合蛋白、细胞色素P450、组织蛋白酶D、L蛋白等蛋白的表达发生改变。这些蛋白以及其参与的生物进程途径与肝纤维化密切相关、相互作用,共同抗肝纤维化。
【关键词】：iTRAQ 鸡尾酒疗法 肝纤维化 差异表达蛋白
【学位授予单位】：广西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R575.2
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