川芎含药血清对肝星状细胞Toll样受体4及下游信号因子MyD88表达的影响

发布时间：2017-08-22 15:23

  本文关键词：川芎含药血清对肝星状细胞Toll样受体4及下游信号因子MyD88表达的影响

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【摘要】：目的：观察川芎含药血清对脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)刺激的大鼠肝星状细胞(hepatic stellate cell, HSC)Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)及下游信号因子髓样分化因子88(myeloid differentiation factor 88, MyD88)表达的影响。方法：选用健康清洁级SD大鼠60只,随机分为川芎低剂量组、川芎中剂量组、川芎高剂量组、模型组、秋水仙碱组、空白组6组,每组10只,给予川芎低中高水煎剂、秋水仙碱、生理盐水连续灌胃7天制备川芎含药血清、秋水仙碱含药血清和空白含药血清。体外培养的肝星状细胞,除空白组外,其余各组均予LPS 1μg-ml-1刺激24 h,各组含药血清干预后于37℃、5% CO2培养箱中培养。24 h后收集细胞,分别采用半定量RT-PCR和Western blot法测定TLR4,MyD88 mRNA和蛋白的表达情况。结果：用LPS刺激大鼠HSC后,TLR4与MyD88的mRNA和蛋白的表达均明显增加(与空白对照组比较P0.01)。川芎含药血清干预后,TLR4、MyD88 mRNA和蛋白的表达明显减少(与模型组比较P0.01或P0.05),其中川芎含药血清中、高剂量组减少最为明显。结论：川芎含药血清可通过抑制LPS诱导的HSC中TLR4及下游信号因子MyD88的表达,参与调控TLR4信号通路而发挥其抗肝纤维化作用。中药川芎抗肝纤维化的效果具有一定的剂量依赖关系。
【关键词】：川芎 肝星状细胞 脂多糖 Toll样受体4 肝纤维化
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R575
【目录】：

• 英汉缩略语名词对照6-7
• 中文摘要7-9
• 英文摘要9-11
• 前言11-12
• 1 实验材料12-13
• 1.1 实验动物12
• 1.2 实验细胞12
• 1.3 实验药物12
• 1.4 主要试剂与器材12-13
• 2 实验方法13-17
• 2.1 药物制备13
• 2.2 含药血清制备13-14
• 2.3 细胞培养14-15
• 2.3.1 相关试剂的配置14
• 2.3.2 细胞培养14
• 2.3.3 细胞传代14
• 2.3.4 细胞冻存14-15
• 2.3.5 细胞复苏15
• 2.4 细胞干预15
• 2.5 RT-PCR检测肝星状细胞内TLR4、MyD88的表达15-17
• 2.6 蛋白质印迹分析(Western blot))检测肝星状细胞内TLR4、MyD88蛋白的表达17
• 3 统计学处理17
• 4 结果分析17-19
• 4.1 川芎含药血清对LPS刺激的肝星状细胞TLR4,MyD88基因表达的影响17-18
• 4.2 川芎含药血清对LPS刺激的肝星状细胞TLR4,MyD88蛋白表达的影响18-19
• 5 讨论19-23
• 5.1 Toll样受体4信号通路与肝纤维化19-20
• 5.2 中医对肝纤维化病机的认识20
• 5.3 中药含药血清的运用20-21
• 5.4 肝纤维化的治疗目标21-23
• 参考文献23-27
• 小结27-28
• 附图28-31
• 1. 肝星状细胞形态28-29
• 2. Western blot检测蛋白的表达29-30
• 3. RT-PCR检测mRNA的表达30-31
• 文献综述 Toll样受体4信号通路与肝纤维化研究进展31-40
• 1 Toll样受体4结构31-32
• 2 Toll样受体4信号通路32-33
• 2.1 MyD88依赖途径32-33
• 2.2 MyD88非依赖途径33
• 3 Toll样受体4信号通路与肝星状细胞33-34
• 4 Toll样受体4信号通路与肝纤维化34-35
• 5 展望35-36
• 参考文献36-40
• 致谢40-41
• 攻读硕士学位期间发表的论文41

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本文编号：719885