TIM-1蛋白在小鼠肝脏缺血再灌注损伤中的作用和机制研究

发布时间：2017-08-24 15:41

  本文关键词：TIM-1蛋白在小鼠肝脏缺血再灌注损伤中的作用和机制研究

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【摘要】：背景： 肝脏缺血再灌注损伤是影响肝移植成功率和肝移植术后移植物功能的重要因素,长时间体外冷缺血状态及后续再灌注性肝损伤仍是原位肝移植术后出现并发症及不良预后的主要原因。T细胞免疫球蛋白粘蛋白-1(TIM-1)表达在CD4+T细胞上,且是同种异体移植后免疫反应的一种共刺激信号。 目的： 为研究TIM-1蛋白在小鼠肝脏缺血再灌注损伤中的作用及其机制；阻断TIM-1信号对肝脏缺血再灌注损伤的影响。 方法： 通过模拟临床实际情况,采用20小时低温冷灌保存供肝的同种异体小鼠原位肝移植模型,分析了TIM-1信号对移植肝脏缺血再灌注损伤的影响和作用机制。我们选取C57BL/6小鼠,获取肝脏,置于4℃的UW液中保存20小时,原位移植到同系的小鼠体内。并通过术后 结果： 发现在术后早期(1小时)受体CD4+T细胞内TIM-1激活较为明显。实验组小鼠注射单克隆TIM-1抗体(RMT1-10)阻断TIM-1信号后6小时后,血清谷丙转氨酶(ALT)水平显著低于对照组,同时移植肝的病理形态显著优于对照组。在实验组中,阻断TIM-1信号后Thl细胞相关的IFNγ、Tbet基因表达降低,而Th2细胞相关的IL-4、IL-10及Th17细胞相关的IL-17基因表达升高；实验组肝内中性粒细胞和巨噬细胞的浸润程度及功能均降低；实验组显示促凋亡基因NF-kB表达受到抑制的同时抗凋亡基因Bcl-2、Bcl-XL基因表达增强。运用过继性细胞转移技术迁移TIM-1表达阳性的CD4+T细胞到无免疫性缺血再灌注损伤的RAG-/-基因敲除小鼠,阻断其TIM-1信号后减少了Tbet转录,降低了巨噬细胞的活化,平衡了肝脏缺血再灌注损伤应激。 结论： 在原位肝移植受体天然免疫中表达TIM-1的CD4+T细胞是介导缺血再灌注损伤的重要免疫机制。
【关键词】：缺血再灌注损伤 体外冷缺血 原位肝移植 共刺激信号 过继性转移
【学位授予单位】：浙江大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R575
【目录】：

• 致谢5-8
• 序言8-9
• 中文摘要9-11
• Abstract11-13
• 缩略词表13-15
• 目次15-17
• 1 绪论17-29
• 1.1 研究目的21-24
• 1.2 技术路线24-29
• 2 材料和方法29-50
• 2.1 实验动物及模型29-34
• 2.2 实验材料及方法34-50
• 3. 结果50-74
• 3.1 肝移植模型中缺血再灌注损伤激活CD4 T细胞表达TIM-150
• 3.2 TIM-1信号介导肝脏缺血再灌注损伤,阻断TIM-1信号减轻肝功能损伤50-53
• 3.3 阻断TIM-1信号差异性调节CD4 T细胞的细胞因子表达53-57
• 3.4 阻断TIM-1信号抑制中性粒细胞和巨噬细胞功能57-66
• 3.5 阻断TIM-1信号抑制肝缺血再灌注损伤介导的肝细胞坏死/凋亡66-69
• 3.6 肝脏缺血再灌注损伤需要依赖CD4 T细胞的TIM-1信号69-74
• 4. 讨论74-78
• 5. 结论78-79
• 参考文献79-83
• 附录83-87
• 综述87-96
• 参考文献91-96
• 作者简历及在学期间所取得的科研成果96-9

【共引文献】

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本文编号：732145