丙型肝炎病毒河北株E2蛋白胞外核心区的真核表达及应用

发布时间：2017-08-25 03:36

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【摘要】：目的真核细胞表达丙型肝炎病毒(HCV)河北株E2蛋白胞外核心区(E2c)并利用E2c蛋白检测HCV患者血清中特异性抗E2蛋白抗体水平。方法以HCV1b型(河北株)基因序列为基础,设计HCV1b E2c基因序列并通过基因拼接的方法合成;将含有组织型纤溶酶原激活物(t PA)信号肽的E2c扩增产物克隆入p CI-neo真核表达载体,获得p CI-tpa-1b E2c载体;将p CI-tpa-1b E2c真核表达载体转染HEK293T细胞,收集细胞上清后进行浓缩及纯化,Western blot法鉴定蛋白特异性;以获得E2c蛋白为抗原,建立基于雪花莲凝集素(GNA)的改良ELISA检测HCV患者血清特异性抗E2c抗体水平。结果成功利用真核表达系统表达获得E2c蛋白,建立了GNA改良ELISA检测HCV患者血清中抗E2蛋白抗体的方法。结论成功在HEK293T细胞表达HCV-1b E2c蛋白并进行了临床应用。
【作者单位】： 第四军医大学唐都医院传染科;第四军医大学微生物学教研室;
【关键词】： 丙型肝炎病毒(HCV) E蛋白胞外核心区(Ec)蛋白 真核表达 基于雪花莲凝集素的改良ELISA
【基金】：十二五传染病重大专项(2013ZX10004609)
【分类号】：R512.63
【正文快照】： 丙型病毒性肝炎(hepatitis C)严重危害人类健康,其病原体是丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)。全球HCV感染者约为1.3~1.7亿,每年新增30~40万感染人数[1]。HCV感染后极易慢性化,可导致肝纤维化、肝硬化、肝癌[2-3]。HCV属于黄病毒科嗜肝病毒属,其单正链RNA全长约为9600个核

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1 李晓瑶;邹淑慧;夏方娜;杨小平;余克花;刘金辉;;不同基因型丙型肝炎病毒E1、E2蛋白生物信息学分析[J];南昌大学学报(医学版);2014年07期

2 ;[J];;年期

，

本文编号：734850