腺苷A2A受体激动剂缓解小鼠DSS结肠炎及机制研究

发布时间：2017-09-14 22:04

  本文关键词：腺苷A2A受体激动剂缓解小鼠DSS结肠炎及机制研究

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【摘要】：背景:溃疡性结肠炎(UC)是炎症性肠病(IBD)的一种,其以结肠及直肠部位出现不受控制的炎症反应为特点。传统治疗不能有效缓解病情及阻止其复发,且可能会引起严重的副作用。因此,我们亟需探索治疗UC的新方法。新近研究显示,激活腺苷A2A受体可发挥抗炎作用及免疫抑制作用,然而,A2A受体调节肠道免疫反应及可能的机制尚待深入研究。目的:探讨腺苷A2A受体激动剂调节葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导小鼠结肠炎肠道炎症反应及可能的机制。方法:将Balb/c小鼠随机分成4组:正常对照组,DSS组,DSS+CGS21680组,DSS+CSC组。自实验第一天开始,给小鼠饮用4%DSS建立急性结肠炎模型。自实验第3天开始,对DSS+CGS21680组、DSS+CSC组小鼠每天分别给予CGS21680 1mg/kg、CSC 2.5mg/kg腹腔注射至第7天。每天观察各组小鼠疾病活动指数(DAI),第8天处死小鼠,取结肠组织行HE染色评估结肠严重程度,免疫组化测定组织中CD68及p NF-κB p65的表达,组织匀浆检测各组小鼠结肠MPO的含量,ELISA检测TNF、IL-1β的表达量。结果:1.DAI评分:第7天各组小鼠DAI评分,DSS+CGS21680组DAI评分(1.57±0.65)明显低于DSS组(3.10±0.47)与DSS+CSC组(3.07±0.21)DAI评分(P0.05),对照组DAI评分为0,各组与对照组比较均有统计学意义(P0.05)。2.组织病理学评分:DSS+CGS21680组组织病理学评分为1.80±0.79,明显低于DSS组(3.10±0.74)与DSS+CSC组(3.00±0.82)组织病理学评分(P0.05)。对照组组织病理学评分为0,各组与对照组比较均有统计学意义(P0.05)。3.MPO活性:DSS组与DSS+CSC组MPO活性较正常组明显增高(P0.05),其活性分别为9.91±1.66U/g、10.96±1.28U/g。DSS+CGS21680组MPO活性(7.72±0.67U/g)明显比DSS组和DSS+CSC组低,具有统计学意义(P0.05)。4.组织匀浆TNF含量:DSS组与DSS+CSC组TNF表达水平结果分别为270.77±57.55pg/g与265.88±69.35pg/g较正常组明显增高(P0.05)。DSS+CGS21680组TNF表达水平(138.47±40.46pg/g)明显比DSS组和DSS+CSC组低,具有统计学意义(P0.05)。5.组织匀浆IL-1β含量:检测各组IL-1β的表达水平,DSS组和DSS+CSC组IL-1β表达水平较正常组明显增高(P0.05),各组值分别为176.88±55.84pg/g,196.52±47.80pg/g。DSS+CGS21680组IL-1β表达水平(54.71±36.22pg/g)明显比DSS组和DSS+CSC组低,具有统计学意义(P0.05)。6.结肠组织p NF-κB p65的表达:对照组小鼠结肠粘膜中阳性细胞几乎没有,而DSS组与DSS+CSC组p NF-κB p65阳性细胞数分别为68.34±11.55与70.74±10.74。DSS+CGS21680组p NF-κB p65阳性细胞数明显低于DSS组与DSS+CSC组,只有42.12±12.47,与DSS组或DSS+CSC组比较具有统计学意义(P0.05)。7.结肠组织CD68的表达:对照组小鼠结肠组织中仅有极少量或基本没有CD68阳性细胞。DSS组及DSS+CSC组CD68阳性细胞数分别为30.56±9.51与33.97±9.18,两组比较无统计学意义(P0.05)。而DSS+CGS21680组粘膜中CD68阳性细胞数(16.22±6.43)较该两组明显少,与这两组比较有统计学意义(P0.05)。结论:腺苷A2A受体的激动剂能缓解小鼠DSS结肠炎肠道炎症反应,机制可能为抑制外周巨噬细胞向肠粘膜的浸润及抑制NF-κB的激活。
【关键词】：腺苷A2A受体 实验性结肠炎 炎症反应 免疫调节
【学位授予单位】：南昌大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R574.62
【目录】：

• 摘要3-5
• ABSTRACT5-9
• 中英文缩略词对照9-10
• 第1章 引言10-12
• 第2章 材料与方法12-20
• 2.1 实验试剂和仪器12-13
• 2.1.1 主要试剂12
• 2.1.2 主要仪器12-13
• 2.2 实验对象与分组13
• 2.2.1 实验对象13
• 2.2.2 实验分组13
• 2.3 实验方法13-19
• 2.3.1 急性DSS结肠炎模型的建立13-14
• 2.3.2 小鼠结肠炎严重程度14-16
• 2.3.3 结肠组织髓过氧化物酶（myeloperoxidase，MPO）活性的测定16-17
• 2.3.4 ELISA 法检测结肠组织细胞因子 TNF、IL-1β含量17
• 2.3.5 免疫组织化学原位检测结肠组织pNF-κB p65 及CD68 的表达17-19
• 2.4 统计学处理19-20
• 第3章 结果20-28
• 3.1 各组小鼠DSS结肠炎的观察20-24
• 3.1.1 各组小鼠体重20
• 3.1.2 各组小鼠结肠炎DAI评分20-21
• 3.1.3 各组小鼠结肠外观及长度变化21-23
• 3.1.4 各组小鼠结肠炎的结肠组织病理学变化23-24
• 3.2 各组小鼠结肠组织髓过氧化物酶（MPO）活性的测定24-25
• 3.3 各组小鼠结肠组织中TNF、IL-1β的表达25-26
• 3.3.1 各组小鼠结肠组织中TNF表达水平25
• 3.3.2 各组小鼠结肠组织中IL-1β表达水平25-26
• 3.4 各组小鼠结肠组织pNF-κB p65 和CD68 的表达情况26-28
• 3.4.1 各组小鼠结肠组织pNF-κB p65 的表达26-27
• 3.4.2 各组小鼠结肠组织CD68 的表达：27-28
• 第4章 讨论（讨论部分应针对实验结果，，说明什么问题）28-32
• 第5章 结论32-33
• 致谢33-34
• 参考文献34-38
• 附图38-41
• 攻读学位期间的研究成果41-42
• 综述42-52
• 摘要42
• Abstract42
• 引言42-43
• 1 腺苷的代谢43
• 2 腺苷的作用机制43-44
• 3 腺苷与免疫反应44-46
• 3.1 腺苷与固有免疫系统44-45
• 3.2 腺苷与适应性免疫系统45-46
• 4 腺苷与疾病46-47
• 4.1 腺苷与炎症性肠病46
• 4.2 腺苷与其他疾病46-47
• 5 结论47-48
• 参考文献48-52

【参考文献】

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1 黎万玲;牟芝蓉;傅晓岚;吴玉章;;肿瘤细胞诱导T细胞下调表达腺苷脱氨酶[J];免疫学杂志;2008年04期

2 陈文娜,李曦明;动脉粥样硬化发生的免疫学机制[J];免疫学杂志;2004年S1期

本文编号：852571