乙酰化酶基因hMOF与HBV复制相关性的研究

发布时间：2017-09-17 13:10

  本文关键词：乙酰化酶基因hMOF与HBV复制相关性的研究

  更多相关文章： 乙肝病毒复制 乙酰化酶 慢病毒载体 hMOF

【摘要】：目的:HBV的复制与宿主细胞内表观遗传学因子的相关性成为新进关注的热点。本课题探讨乙酰化酶基因h MOF与慢性乙型肝炎病毒感染后HBV复制的相关性。方法:1.构建乙酰化酶基因h MOF慢病毒RNAi文库,选择8对可以保证干扰效率的sh RNA序列,构建慢病毒载体;2.sh RNA慢病毒感染Hep G2.2.15细胞,感染后72 h后,q PCR检测HBV pg RNA,确保干扰效率;3.沉默h MOF 72 h及96 h后,ELISA检测细胞上清分泌的HBs Ag与HBe Ag含量,q PCR检测HBV-DNA的含量;4.免疫组化方法分别检测HBe Ag阳性与HBe Ag阴性慢性乙型病毒性肝炎患者肝组织中h MOF的蛋白水平表达,q PCR方法检测h MOF m RNA水平,分析其与患者血清HBs Ag、HBe Ag、HBV-DNA的相关性。结果:1.成功构建了8个h MOF基因的慢病毒载体;2.沉默h MOF基因后,HBs Ag、HBe Ag、HBV-DNA的表达水平显著下调;3.HBe Ag阳性慢性乙型病毒性肝炎患者肝组织中h MOF的蛋白及m RNA表达水平明显高于正常对照组(P0.001、P=0.004),且h MOF的蛋白水平与HBs Ag、HBe Ag、HBV-DNA均成正相关(r2=0.3275、P0.001,r2=0.22、P=0.0051,r2=0.4195、P0.001);HBe Ag阴性慢性乙型病毒性肝炎患者肝组织中h MOF的蛋白表达水平明显高于正常对照组(P=0.0083),且h MOF的蛋白水平与HBV-DNA成正相关(r2=0.1896、P=0.0377)。结论:沉默h MOF基因后,Hep G2.2.15细胞分泌的HBs Ag、HBe Ag、HBV-DNA表达显著下调;慢性乙型病毒性肝炎患者肝组织中h MOF的蛋白表达水平与HBV-DNA成正相关;HBe Ag阳性患者肝组织中h MOF的m RNA及蛋白表达水平与HBs Ag、HBe Ag成正相关,提示h MOF可能在HBV复制的过程中发挥重要作用。
【关键词】：乙肝病毒复制 乙酰化酶 慢病毒载体 hMOF
【学位授予单位】：上海交通大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R512.62
【目录】：

• 摘要5-7
• abstract7-10
• 英文缩写10-11
• 绪论11-18
• 第一部分 乙酰化酶基因hMOF RNA干扰文库的构建及其对Hep G2.2.15 细胞感染影响的研究18-40
• 前言18-19
• 材料与方法19-27
• 结果27-37
• 讨论37-40
• 第二部分 乙酰化酶基因hMOF与HBV复制相关性的研究40-75
• 前言40-41
• 材料与方法41-56
• 结果56-73
• 讨论73-75
• 结论75-76
• 参考文献76-82
• 致谢82-84
• 攻读学位期间取得的学术成果84

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