一种新型脂肪变性HepG2细胞模型及线粒体能量代谢障碍评价

发布时间：2017-09-18 23:18

  本文关键词：一种新型脂肪变性HepG2细胞模型及线粒体能量代谢障碍评价

  更多相关文章： HepG细胞 脂肪变性 活性氧 线粒体膜电位 能量代谢

【摘要】：目的探讨建立一种新型的脂肪变性Hep G2细胞模型的方法,并对细胞线粒体能量代谢障碍程度进行评价。方法予25%的胎牛血清和0.1%的医用脂肪乳DMEM培养基初步诱导12 h后,进一步予油酸和棕榈酸组成的0.1 mmol/L游离脂肪酸(FFA)DMEM培养基再次诱导12 h,建立脂肪变性Hep G2细胞模型,并以无血清DMEM培养基作为对照比较。诱导成功后,采用油红O染色观察细胞内脂滴沉积状况,并用全自动生化仪检测细胞上清液丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶含量和细胞内三酰甘油(TG)含量;采用流式细胞仪测定细胞内活性氧(ROS)和线粒体膜电位的变化,采用磷钼酸比色法测定细胞内三磷酸腺苷(ATP)含量,综合评测脂肪变性细胞线粒体能量代谢障碍的程度。结果与对照组比较,模型组细胞内橘红色脂滴大量形成,且TG和ROS含量明显增高(P0.01),而线粒体膜电位及细胞内ATP含量显著降低(P0.01)。结论采用25%胎牛血清、0.1%中/长链脂肪乳和0.1 mmol/L FFA分阶段诱导Hep G2细胞,可以成功在体外建立脂肪变性细胞模型,该模型会引起细胞线粒体能量代谢紊乱,与非酒精性脂肪性肝病临床发病机制存在相似性。
【作者单位】： 暨南大学医学院中医系;广东省中医院大学城院区放疗科;暨南大学附属第一医院中医科;
【关键词】： HepG细胞 脂肪变性 活性氧 线粒体膜电位 能量代谢
【基金】：国家自然科学基金资助项目(编号:81302878,81273617) 中国肝炎防治基金会天晴肝病研究基金科研课题(编号:CFHPC20132184) 广东省中医药局建设中医药强省科研项目(编号:20152112,20151224)
【分类号】：R575.5
【正文快照】： 非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是一种遗传-环境-代谢应激相关性疾病[1],其发病与胰岛素抵抗、线粒体功能障碍、氧化应激和肥胖等因素密切相关[2-3],其中线粒体损伤引起的能量代谢障碍在NAFLD发病机制中起关键作用[4]。目前大鼠、小鼠等动物模型是研究NAFLD发病的重要实验载体,但

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 赵琳阁;;脂肪变性·肥大[J];中原医刊;1984年02期

2 姚柳;张东红;谢喜娜;朱毅;;可溶性表氧化物水解酶抑制剂在高同型半胱氨酸血症引起的小鼠肝脏脂肪变性中的作用研究[J];中国病理生理杂志;2012年11期

3 B.Guiu;E.Crevisy-Girod;C.Binquet;L.Duvillard;D.Masson;C.Lepage;张华;;预测Ⅱ型糖尿病的脂肪变性:临床生物标记与~1H-MRS分析的比较[J];国际医学放射学杂志;2012年03期

4 王敏;刘进;林竹;潘博;王运盛;康静静;唐娜;张嘉嘉;胡凤娇;杨利峰;尹晓敏;赵德明;周向梅;;2011年秋季实验用鼠健康状况的病理学调查和分析[J];实验动物科学;2012年03期

5 刘江;李伟平;施杰民;戴利成;刘春燕;丁健;唐涛;;内质网应激参与细胞脂肪变性的研究[J];医学研究杂志;2012年12期

6 蒋爱丽;;对非酒精性脂肪肝病人行钆塞酸增强MR成像以无创性鉴别单纯脂肪变性和脂肪性肝炎:验证假设研究[J];国际医学放射学杂志;2014年04期

7 范竹萍,曾民德;非酒精性脂肪变性综合征的临床特征和自然史[J];肝脏;2001年03期

8 ;脑病合并内脏脂肪变性(Reye综合征)[J];国外医学参考资料(儿科学分册);1974年03期

9 赵斐;谢萍;姜佳丽;张令强;安威;展玉涛;;他莫昔芬体外促进HepG2细胞脂肪变性观察[J];实用肝脏病杂志;2014年01期

10 王万东;陈东风;;非酒精性脂肪变性肝细胞模型中ATF4基因的表达及其意义[J];第三军医大学学报;2010年14期

中国重要会议论文全文数据库 前2条

1 任卓;;二甲双胍对脂肪变性成肌细胞甘油三酯含量的影响[A];中华医学会第十二次全国内分泌学学术会议论文汇编[C];2013年

2 杨慧霞;王庆祝;秦贵军;刘飞;王芳;王晓静;;胰淀素对脂肪变性人L-02肝细胞甘油三酯代谢的影响[A];中华医学会第十二次全国内分泌学学术会议论文汇编[C];2013年

中国重要报纸全文数据库 前5条

1 刘金兰;不要小觑脂肪肝[N];农村医药报（汉）;2008年

2 北京地坛医院 主任医师 崔振宇;脂肪肝应综合治疗[N];家庭医生报;2004年

3 张静;脂肪肝的分类和分期[N];医药养生保健报;2007年

4 指导专家 重庆市中医院肝病科主任 刘华宝 记者 夏冰冰;“大腹便便”者警惕脂肪肝[N];医药导报;2010年

5 副主任医师 陈继英;多管齐下治疗脂肪肝[N];医药经济报;2009年

中国博士学位论文全文数据库 前2条

1 刘江;内质网应激参与细胞脂肪变性的研究[D];浙江大学;2010年

2 王艳;HepG2.2.15细胞脂肪变性对HBV基因表达及SOCS-3和SREBP-1c通路的影响[D];山西医科大学;2011年

中国硕士学位论文全文数据库 前6条

1 王川;水甘油通道蛋白7、9在非酒精性脂肪肝病中治疗与预防作用的研究[D];重庆医科大学;2011年

2 赖姝婕;PKCδ激活对肝细胞内质网应激和脂肪变性的调控作用[D];第三军医大学;2014年

3 陈露;还原性谷胱甘肽对LO2细胞脂肪变性中凋亡的影响[D];中南大学;2012年

4 张一帆;枳i子水提取液对乙醇体外诱导脂肪变L-02细胞UCP2基因的表达的影响[D];中南大学;2011年

5 拜明军;不同性质脂肪酸对肝细胞脂代谢及内质网应激的影响和机制探讨[D];重庆医科大学;2008年

6 王万东;内质网应激合并固醇调控在非酒精性脂肪性肝病中的意义[D];第三军医大学;2011年

，

本文编号：878101