人参皂苷对异丙肾上腺素致乳鼠心肌细胞肥大的影响及其机制
本文关键词:血管紧张素Ⅱ诱导H9c2心肌细胞肥大模型的建立及泛素化结蛋白水平的变化,由笔耕文化传播整理发布。
《辽宁医学院》 2015年
人参皂苷对异丙肾上腺素致乳鼠心肌细胞肥大的影响及其机制
邬丹丹
【摘要】:目的研究人参皂苷(Rg1)对异丙肾上腺素致乳鼠心肌细胞肥大的影响,并探讨其机制。特别是从能量代谢及NF-кB/PGC-1α信号通路的角度探讨人参皂苷(Rg1)对心肌细胞肥大的保护作用及其可能机制。方法原代培养新生SD大鼠乳鼠心肌细胞,应用Iso 10μmol/L诱导心肌细胞肥大的模型,观察不同浓度Rg1(12.5、25、50μmol/L)及核因子-кB(NF-кB)特异性抑制剂BAY11-7082(5μmol/L)对心肌细胞的作用。细胞随机分为6组:正常对照组、Iso模型组、Iso+Rg1(12.5、25、50μmol/L)组及Iso+BAY11-7082组。消化分离法以及计算机图像分析系统检测心肌细胞的体积;考马斯亮蓝(Bradford)法检测心肌细胞中总蛋白的含量;酶联免疫吸附(ELISA)试验法检测心肌细胞中三磷酸腺苷(ATP)、单磷酸腺苷(AMP)及游离脂肪酸(FFA)的含量;反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测心房利钠肽(ANP)m RNA的表达;蛋白免疫印迹(Western blot)法检测心肌细胞p65、PGC-1α蛋白的表达。结果与正常对照组相比,Iso模型组的心肌细胞体积增大,总蛋白含量增多,游离脂肪酸(FFA)含量增加,ATP/AMP比值下降(P0.05);ANP m RNA表达水平增加(P0.05);PGC-1α蛋白表达下降,p65蛋白表达增加(P0.05)。与Iso模型组相比,Rg1(25、50μmol/L)剂量组及BAY11-7082均能有效抑制Iso诱导的心肌细胞肥大,使心肌细胞体积分别减少了24.80%,26.56%、33.46%,总蛋白含量降低了29.07%、41.64%、42.44%。此外,FFA的含量减少,ATP/AMP比值增加(P0.05)。同时,Rg1(25、50μmol/L)剂量组及BAY11-7082也能显著逆转ANP m RNA及p65、PGC-1α的表达(P0.05)。实验发现,Rg1对心肌肥厚具有保护作用,且Rg1(50μmol/L)剂量组的心肌保护作用与BAY11-7082(5μmol/L)的保护作用一致。结论人参皂苷对Iso诱导的心肌细胞肥大有明显的保护作用。其机制可能与NF-кB/PGC-1α信号通路有关,通过调控游离脂肪酸(FFA)及ATP的利用,从而改善肥厚心肌的能量代谢,发挥保护作用。
【关键词】:
【学位授予单位】:辽宁医学院
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2015
【分类号】:R285.5
【目录】:
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,本文编号:223369
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