探索DDAVP联合IL-4对巨噬细胞LPCAT和PAF-AH mRNA的表达影响

发布时间：2017-04-02 21:13

  本文关键词：探索DDAVP联合IL-4对巨噬细胞LPCAT和PAF-AH mRNA的表达影响，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的探索DDAVP联合IL-4对RAW264.7细胞系(小鼠单核巨噬瘤细胞)LPCATmRNA和PAF-AH mRNA的表达影响。方法本实验共分为四组,即RAW264.7细胞系接受4种不同的培养方法,共培养12.5小时,然后提取细胞总mRNA。IL-4+DDAVP组:先用含IL-4(10 ng/ml)的高糖DMEM培养基培养RAW264.7细胞12小时,然后用含DDAVP(100ng/ml)的高糖DMEM培养基培养30min,提取细胞总mRNA。DDAVP组:先用高糖DMEM培养基培养RAW264.7细胞12小时,然后用含DDAVP(100ng/ml)的高糖DMEM培养基培养30min,提取细胞总mRNA。IL-4组:先用含有IL-4(10 ng/ml)的高糖DMEM培养基培养RAW264.7细胞12.5小时后,然后提取细胞总mRNA。空白对照组:先用高糖DMEM培养基培养RAW264.7细胞12.5小时后,提取细胞总mRNA。将各组mRNA逆转录成cDNA,应用实时荧光定量PCR检测细胞LPCAT mRNA和PAF-AH mRNA的表达水平。表达水平=(Etarget)CTcontrol-CTsample)/(Eref)CTcontrol-CTsample),CTcontrol为actin的扩增循环数,CTsample所测产物PAF-AH、LPCAT mRNA的扩增循环数,Eref为actin mRNA的扩增效率,Etarget为所测产物PAF-AH、LPCAT mRNA的扩增效率。应用SPSS 17.0软件进行统计分析,计算每组6个样本的C±s,进行方差分析,两组间比较采用LSD t检验以及Dunnett T3 t检验,P0.05。结果四个实验组RAW264.7细胞LPCAT mRNA表达水平分别为:IL-4+DDAVP组为1.23±0.41,DDAVP组为0.77±0.35,IL-4组为0.95±0.42,空白对照组为0.70±0.23,方差分析结果为,F=2.58,方差齐,LPCAT mRNA在四个实验组中差异无统计学意义。四个实验组PAF-AH mRNA表达水平分别为:IL-4+DDAVP组为0.54±0.34,DDAVP组为0.30±0.15,IL-4组为0.30±0.11,空白对照组为0.44±0.34,方差分析结果为,F=1.237,方差齐,四个实验组差异无统计学意义(P0.05)。结论DDAVP联合IL-4可能促进巨噬细胞LPCAT mRNA的表达。
【关键词】：DDAVP IL-4 LPCAT PAF-AH 血友病A
【学位授予单位】：华北理工大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R554.6
【目录】：

• 摘要4-5
• Abstract5-10
• 引言10-12
• 第1章 实验研究12-29
• 1.1 材料与方法12-14
• 1.1.1 细胞、试剂及仪器12
• 1.1.2 实验分组及处理12-13
• 1.1.3 细胞培养13
• 1.1.4 细胞总RNA提取及cDNA合成13
• 1.1.5 RT-PCR检测LPCAT及PAF-AH mRNA表达水平13-14
• 1.1.6 统计学处理14
• 1.2 结果14-18
• 1.2.1 细胞培养结果14-15
• 1.2.2 扩增曲线和溶解曲线图示15-16
• 1.2.3 药物刺激对四组细胞LPCAT mRNA的表达水平的影响16-17
• 1.2.4 药物刺激对四组细胞PAF-AH mRNA的表达水平的影响17
• 1.2.5 药物刺激对四组细胞PAF-AH mRNA和LPCAT mRNA的表达水平的影响的统计图17-18
• 1.3 讨论18-24
• 1.3.1 FⅧ的细胞来源19-20
• 1.3.2 FⅧ与vWF的关系20
• 1.3.3 DDAVP和vWF的关系20-22
• 1.3.4 PAF的代谢22-24
• 1.4 结论24
• 参考文献24-29
• 第2章 综述 DDAVP及其治疗出血类疾病的研究进展29-45
• 2.1 DDAVP化学结构29-30
• 2.2 药物动力学、药理作用及其机制30-32
• 2.2.1 药物动力学30
• 2.2.2 药理作用30-31
• 2.2.3 药理作用机制31-32
• 2.3 DDAVP给药方式32
• 2.4 DDAVP的用量32-33
• 2.5 DDAVP副作用及预防33-34
• 2.6 血友病A34-38
• 2.6.1 血友病A的遗传学方面的进展34-35
• 2.6.2 血友病A分子病理学方面的进展35-36
• 2.6.3 血友病A的临床表现36-37
• 2.6.4 血友病A的DDAVP治疗37-38
• 2.7 血管性血友病38-40
• 2.7.1 发病原因以及遗传学方面的研究进展38
• 2.7.2 分子病理学方面的研究进展38-39
• 2.7.3 临床表现39-40
• 2.7.4 DDAVP的治疗40
• 2.8 DDAVP在其他方面的应用40-41
• 2.9 总结41-42
• 2.9.1 优点41
• 2.9.2 缺点41-42
• 2.9.3 DDAVP在国内的应用42
• 参考文献42-45
• 结论45-46
• 致谢46-47
• 导师简介47-49
• 作者简介49-50
• 学位论文数据集50

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1 张杨;探索DDAVP联合IL-4对巨噬细胞LPCAT和PAF-AH mRNA的表达影响[D];华北理工大学;2016年

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