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免疫性血小板减少症患者外周血免疫细胞亚群的功能研究

发布时间:2017-04-16 17:22

  本文关键词:免疫性血小板减少症患者外周血免疫细胞亚群的功能研究,由笔耕文化传播整理发布。


【摘要】:目的:通过检测B细胞培养上清中Ig G水平及树突状细胞、CD8+T细胞、CD4+T细胞培养上清中各细胞因子水平变化,探讨ITP患者外周血免疫细胞亚群的功能变化与疾病发生的关系,阐述ITP发生的复杂机制,进一步指导ITP的治疗。方法:1.采用密度梯度离心法分离ITP患者外周血单个核细胞;2.免疫磁珠分选术分别分选出B细胞、树突状细胞、CD8+T细胞和CD4+T细胞;3.应用流式细胞仪检测分选后B细胞、树突状细胞、CD8+T细胞和CD4+T细胞的纯度;4.应用ELISA法测定B细胞培养上清中Ig G水平,树突状细胞培养上清中细胞因子IL-2、IL-6、IL-12、IL-27、TNF-α和IFN-γ的水平,CD8+T细胞培养上清中细胞因子IL-2、IL-12、IL-17、TNF-α、IFN-γ和TGF-β的水平,CD4+T细胞培养上清中细胞因子IL-2、IL-4、IL-10、IL-17、TNF-α、IFN-γ和TGF-β的水平。结果:1.ITP患者IgG水平(16.79±1.12pg/ml)显著高于对照组(5.18±0.79pg/ml)(P0.01)。2.ITP患者树突状细胞培养上清中细胞因子IL-12、IL-27的含量(51.39±4.55pg/ml、178.07±50.31pg/ml)显著高于对照组(23.64±2.82pg/ml、92.74±43.57pg/ml)(P0.01)。3.ITP患者CD8+T细胞培养上清中细胞因子TGF-β的含量(203.26±48.51pg/ml)显著低于对照组(395.80±74.05pg/ml)(P0.01)。4.ITP患者CD4+T细胞培养上清中细胞因子IL-4、IL-10、IL-17的含量(17.26±2.11pg/ml、4.12±0.39pg/ml、15.89±1.31pg/ml)显著高于对照组(10.53±1.32pg/ml、2.10±0.44pg/ml、9.42±0.24pg/ml)(P0.01),而细胞因子TGF-β的含量(379.47±44.83pg/ml)显著低于对照组(667.42±67.25pg/ml)(P0.01)。结论:1.ITP患者的IgG型抗体明显升高,对IgG型抗体的测定对ITP的临床诊断具有辅助意义。2.ITP患者树突状细胞分泌的IL-12、IL-27细胞因子量较对照组升高,提示ITP患者树突状细胞有可能通过增加分泌IL-12、IL-27参与ITP的发病。3.CD8+T细胞可能通过分泌TGF-β发挥的免疫调节的作用参与了ITP的发病。4.ITP患者Th细胞免疫失衡趋向于Th2细胞的优势性表达。5.IL-17、TGF-β参与了ITP的发病,在患者体内可能存在Th17/Tregs平衡紊乱。
【关键词】:免疫性血小板减少症 免疫细胞亚群 细胞因子
【学位授予单位】:青海大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:R558.2
【目录】:
  • 摘要4-6
  • Abstract6-10
  • 主要符号对照表10-11
  • 第1章 前言11-13
  • 第2章 对象与方法13-20
  • 2.1 研究对象13
  • 2.1.1 临床病例纳入标准13
  • 2.2 主要试剂和仪器设备13-16
  • 2.2.1 试验所需主要仪器13-14
  • 2.2.2 试验所需主要试剂14-15
  • 2.2.3 试验所需主要溶液配制15-16
  • 2.3 研究方法16-19
  • 2.3.1 研究流程图16
  • 2.3.2 外周血单个核细胞的分离16-17
  • 2.3.3 磁珠分选17
  • 2.3.4 流式细胞术测定分选细胞的纯度17-18
  • 2.3.5 细胞培养18
  • 2.3.6 培养上清提取18
  • 2.3.7 ELISA方法检测培养上清中细胞因子及IgG水平18-19
  • 2.4 统计学方法19-20
  • 第3章 结果20-25
  • 3.1 一般临床资料的比较20
  • 3.2 磁珠分选细胞的纯度测定20-22
  • 3.2.1 B细胞的纯度测定20
  • 3.2.2 树突状细胞的纯度测定20-21
  • 3.2.3 CD8~+T细胞的纯度测定21
  • 3.2.4 CD4~+T细胞的纯度测定21-22
  • 3.3 各免疫细胞亚群(B细胞、树突状细胞、CD8~+T细胞、CD4~+T细胞)培养上清中的IgG及细胞因子含量测定22-25
  • 3.3.1 B细胞分泌的IgG含量测定22
  • 3.3.2 树突状细胞分泌的细胞因子含量测定22-23
  • 3.3.3 CD8~+T分泌的细胞因子含量测定23
  • 3.3.4 CD4~+T分泌的细胞因子含量测定23-25
  • 第4章 讨论25-28
  • 第5章 结论28-29
  • 参考文献29-32
  • 致谢32-34
  • 综述34-40
  • 参考文献38-40
  • 作者简介40

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前6条

1 周振海;李小银;潘倩影;周燕英;李娟;;免疫性血小板减少症患者外周血单个核细胞来源树突状细胞活化状态的研究[J];中国免疫学杂志;2014年09期

2 何学鹏;杨凯;陈鹏;刘兵;张媛;王芳;郭智;刘晓东;楼金星;陈惠仁;;血小板相关抗体水平对特发性血小板减少性紫癜预后的价值研究[J];国际输血及血液学杂志;2014年03期

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6 王金慎;韩月芹;魏丽夏;秦道刚;杨巧芝;;急性特发性血小板减少性紫癜患儿Th1/Th2类细胞因子的基因表达水平[J];中华实用儿科临床杂志;2013年03期


  本文关键词:免疫性血小板减少症患者外周血免疫细胞亚群的功能研究,,由笔耕文化传播整理发布。



本文编号:311310

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